探討HLA-B27陽性率、TNF-α、CRP水平檢測對強直性脊柱炎的診斷價值

張成亮 ，朱寶林，吳建偉

(江蘇省沭陽縣人民醫院骨科，江蘇宿遷 223600)

強直性脊柱炎(AS)是一種以慢性炎性反應為主的全身性疾病，對機體全部的骶髂關節均可累及，患者時常會出現髖關節痛、腰腿痛，夜間疼痛感增加，且伴有晨僵[1]。由于患者普遍隱匿發病，導致人們對AS的關注度較低。目前，在臨床上對于AS的診斷主要通過影像學檢查以及臨床癥狀來判斷，但疾病早期其骨骼不會發生改變，從而使影像學特征不明顯，其臨床癥狀普遍與多種類風濕性疾病相似，因此，在診斷中極易出現誤診與漏診情況[2]。目前對于AS尚無特異治療，因此抑制病情發展的關鍵在于早期準確診斷，從而采取合理的治療。據相關研究顯示，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C反應蛋白(CRP)作為致炎因子，在AS患者血清中的水平與非AS患者相比均明顯升高[3]。近年來另有研究發現，人類白細胞抗原(HLA-B27)與多種脊柱關節病具有一定的相關性，且臨床已證實HLA-B27與AS具有密切的相關性[4]。因此，本研究通過檢測HLA-B27陽性率、TNF-α以及CRP水平，探討HLA-B27陽性率、TNF-α、CRP水平檢測對AS的診斷意義，為臨床治療提供客觀依據，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2015年9月至2017年3月在本院進行治療的疑似110例AS患者，納入標準：(1)存在腰背疼痛或關節疼痛；(2)對本研究知情同意并簽署知情同意書。排除標準：在本研究前3個月使用過免疫調節藥物。經過診斷其中80例符合AS診斷標準[5]，將其作為AS組，其中男59例，女21例，年齡16～48歲，平均(28.34±6.53)歲；剩余30例類風濕關節炎患者作為對照組，其中男21例，女9例，年齡17～49歲，平均(29.53±6.49)歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法分別采集兩組患者空腹靜脈血5 mL，使用肝素進行抗凝處理。加入30 μL的抗HLA-B27 FITC/CD3PE抗體與60 μL的肝素抗凝全血于測定管中，將其均勻混合后，室溫避光進行15 min染色。加入2 mL的溶血素進行離心處理后棄上清液，使用磷酸鹽緩沖溶液(PBS)洗滌1次，在進行離心處理后棄上清液。加入0.5 mL含1%的多聚甲醛PBS懸浮細胞后將其置于8 ℃的環境中待檢。使用流式細胞術檢測HLA-B27陽性率，按照試劑盒中的標準設定其界值，其結果判定使用HLA-B27軟件獲取15 000個下撥，通過FSC-SSC的參數組合，區分以下3個群體，即外周血白細胞中的淋巴細胞、單核細胞以及中性粒細胞。再設定1個CD3+T淋巴細胞門，進行自動檢測T淋巴細胞B27的表達強度，當其大于界值為陽性，反之為陰性。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測兩組患者血清TNF-α、CRP水平。

1.3觀察指標比較兩組患者HLA-B27陽性率、血清TNF-α、CRP水平以及HLA-B27、TNF-α、CRP檢測對AS診斷的靈敏度、特異度與準確性。

2　結　　果

2.1兩組患者HLA-B27陽性率比較AS組中80例患者，檢測出76例患者為HLA-B27陽性，其陽性率為95%；對照組30例患者檢測結果均為陰性，陽性率為0%，兩組HLA-B27陽性率差異有統計學意義(χ2=144.761，P<0.05)。

2.2兩組患者血清TNF-α、CRP水平比較兩組患者TNF-α、CRP水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1　　兩組患者血清TNF-α、CRP水平比較

2.3單項檢測與聯合檢測對AS的診斷價值比較檢測TNF-α、CRP水平的靈敏度、特異度以及準確性均明顯低于HLA-B27檢測，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2　　單項檢測與聯合檢測對AS的診斷價值比較

注：與HLA-B27相比，△P<0.05

3　討　　論

AS是一類主要累及骶髂、脊柱關節的慢性炎性反應疾病，其病因目前尚不明確，普遍認為與環境和遺傳有關[6]。在青少年中較為常見，且男性多于女性，起病10年內會出現嚴重的關節功能障礙，具有較高的致殘率[7]。由于AS臨床癥狀無典型特點，而其診斷標準相對嚴格，若僅僅依賴影像學有所顯示時才就醫，患者通常已處于疾病中晚期，耽誤了治療時機。因此，在AS疾病早期對其進行準確的判斷具有重要的臨床意義。

TNF-α主要由單核細胞與巨噬細胞分泌產生，是介導自身免疫反應的重要細胞因子，具有免疫調節作用，同時在炎性反應中起重要作用[8]。據相關研究報道，在AS的發病機制中，TNF-α具有重要作用[9]。但本研究結果顯示，類風濕關節炎患者與AS患者血清TNF-α水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，但均明顯高于正常值。提示TNF-α有可能參與了AS的發病機制。但若僅憑TNF-α水平升高來判定是否患有AS并不可靠。本研究結果顯示，TNF-α靈敏度僅為53.8%，且特異度較低。CRP為一種典型的急性時相反應蛋白，存在于機體肝臟，可通過結合Fcγ受體清除免疫符合物以及凋亡的細胞碎片，同時可刺激單核細胞表面，調節其他免疫反應；當機體出現感染、損傷、炎性反應時其水平會急速升高[10]。從本研究結果可見，AS患者血清CRP水平與類風濕關節炎相比無明顯變化。盡管有文獻顯示，CRP與AS的發生和發展具有一定關系，但僅依靠檢測CRP水平來診斷AS的靈敏度較低，且特異度也存在一定限制[11-12]，本研究結果也證實了這一觀點。HLA-B27是一種顯性遺傳標記抗原，在免疫系統中可誘導免疫反應以及調節免疫應答，同時可幫助細胞間相互識別；HLA-B27分子能夠與機體自身肽段相結合，使T細胞殺傷自身靶細胞，從而造成組織變性、器官受損[13-14]。多項研究顯示，HLA-B27的表達與AS具有高度的相關性，90%以上的AS患者其HLA-B27檢測均表現為陽性，由此可見，檢測HLA-B27的表達能夠為AS的早期診斷提供重要手段[15]。本研究結果也顯示，在80例AS患者中，有76例患者檢測為HLA-B27陽性，其陽性率可達到95%，在類風濕關節炎患者中檢測HLA-B27則均為陰性。HLA-B27陽性結果與臨床確診結果表現出高度的一致性，可見HLA-B27陽性率對早期診斷AS具有重要的臨床意義。

綜上所述，TNF-α與CRP可參與AS的發生和發展，但仍無法使用患者血清TNF-α、CRP水平的升高來診斷患者是否患有AS。通過對HLA-B27陽性率進行檢測，可對AS的早期診斷與早期治療提供有效依據，具有重要的臨床價值。

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