2013—2016年寧海縣畜禽重大傳染病免疫狀況監測分析

王宗沛，汪審岳，姜俊保，盧　磊

(1.浙江省寧海縣畜牧獸醫局，浙江 寧波 315600； 2.寧波市振寧牧業有限公司，浙江 寧波 315600)

群體抗體水平監測是動物防疫工作的一個重要環節。通過檢測畜禽體內的抗體水平，可及時評估重大動物疫病的免疫效果，防止重大動物疫病的發生與流行[1]。浙江省寧海縣豬、牛、羊年出欄量分別為20.21萬、0.15萬、1.48萬頭，雞、鴨年出欄量分別為171.89萬、80.37萬羽，是寧波市的畜牧業重點縣。為監測該縣畜禽(豬、牛、羊、雞、鴨等)重大傳染病的免疫效果，2013—2016年寧海縣畜牧獸醫局對當地飼養的畜禽，定期進行口蹄疫(foot and mouth disease，FMD)、豬瘟(classical swine fever，CSF)、豬繁殖與呼吸綜合征(豬藍耳病，porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)、禽流感(avian influenza，AI)和新城疫(Newcastle disease，ND)等的抗體檢測。現將各年份的檢測結果進行比較、分析，以期為當地畜禽重大疫病的防控決策提供科學依據，并供同行參考。

1　材料與方法

1.1　被檢血清與保存

從浙江省寧海縣各畜禽養殖場(戶)采集家畜和家禽血液，在采樣場點的選擇上兼顧種畜禽場、規模場和散養戶。血液采集過程中嚴格實行無菌操作，杜絕污染，血清分離后置于-20 ℃冷凍保存。2013—2016年共收集4 086份豬血清、686份牛血清、1 065份羊血清、5 226份雞血清、662份鴨血清。

1.2　強制免疫項目和檢測項目

寧海縣畜牧獸醫局按照我國《中華人民共和國動物防疫法》、《國家中長期動物疫病防治規劃(2012—2020年)》[2]和各年度的國家動物疫病強制免疫計劃[3-5]要求，對當地養殖的畜禽，針對口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、高致病性禽流感等4種動物疫病實行強制免疫，對雞新城疫進行預防免疫。具體免疫項目和檢測項目見表1。

1.3　檢測依據及試劑來源

各抗體的檢測及判定標準依照有關國家標準：O型口蹄疫病毒(FMDV)，檢測依據GB/T 18935—2003[6]，檢測方法為ELISA，試劑購自北京金諾百特科技有限公司；A型口蹄疫病毒，檢測依據GB/T 18935—2003[6]，檢測方法為酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，試劑購自蘭州畜醫研究所；亞洲Ⅰ型口蹄疫病毒，檢測依據GB/T 18935—2003[6]，檢測方法為ELISA，試劑購自蘭州畜醫研究所；豬瘟病毒(CSFV)，檢測依據GB/T 16551—2008[7]，檢測方法為正向間接血凝試驗，試劑購自蘭州畜醫研究所；豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)，檢測依據GB/T 18090—2008[8]，檢測方法為ELISA，試劑購自北京愛德士元亨生物科技有限公司；H5N1亞型禽流感病毒，檢測依據GB/T 18936—2003[9]，檢測方法為血凝(HA)和血凝抑制(HI)試驗，試劑購自哈爾濱維科生物技術開發公司；H7亞型(H7N9)禽流感病毒，檢測依據GB/T 18936—2003[9]，檢測方法為血凝和血凝抑制試驗，試劑購自哈爾濱維科生物技術開發公司；雞新城疫病毒(NDV)，檢測依據GB/T 16550—2008[10]，檢測方法為血凝和血凝抑制試驗，試劑購自青島易邦生物工程有限公司。

表1畜禽強制免疫和檢測項目

Table1Compulsory immunization and testing program for livestock and poultry

被檢動物Animal強制免疫項目Compulsoryimmunization檢測抗體項目Testedantibody豬SwineO型口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征FMD-O,CSF,PRRSO型口蹄疫病毒、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒FMDV-O,CSFV,PRRSV牛BovineO型、A型及亞Ⅰ型口蹄疫FMDtypesO,A,andAsiaⅠO型、A型及亞Ⅰ型口蹄疫病毒FMDVtypesO,A,andAsiaⅠ羊GoatO型及亞Ⅰ口蹄疫FMDtypesO,andAsiaⅠO型及亞Ⅰ口蹄疫病毒FMDVtypesO,andAsiaⅠ雞ChickenH5N1亞型禽流感H5N1AIH5N1亞型禽流感病毒、H7N9亞型禽流感病毒、新城疫病毒H5N1,H7N9,NDV鴨DuckH5N1亞型禽流感H5N1AIH5N1亞型禽流感病毒、H7N9亞型禽流感病毒H5N1,H7N9

1.4　統計與分析

所得數據采用SAS 8.0軟件中GLM過程進行方差分析，檢驗誤差為5%水平，數據用平均值±標準差表示。

2　結果與分析

2.1　家畜抗體檢測結果

2013—2016年，寧海縣豬O型口蹄疫、豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體年均陽性率分別為76.27%、75.84%和79.88%，各年差別不大，且均大于70%(圖1)，高于農業部規定標準[3-5]，免疫效果較好。對牛O型、A型及亞Ⅰ型口蹄疫抗體進行檢測，年均陽性率分別為93.44%、92.83%和95.19%，其中2014年口蹄疫抗體的陽性率略低于其他年份(圖2-A)。2013-2016年：羊O型口蹄疫抗體陽性率分別為54.58%、45.00%、80.00%和81.91%，年均陽性率為65.37%；亞Ⅰ型口蹄疫抗體陽性率分別為60.00%、45.00%、81.25%和83.81%，年均陽性率為67.52%(圖2-B)。

圖1　豬O型口蹄疫、豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢出情況Fig.1　Test result of FMD-O， CSF and PRRS in swine

圖2　牛(A)和羊(B)口蹄疫抗體檢出情況Fig.2　Test result of FMD in bovine (A) and goat (B)

2.2　家禽抗體檢測結果

2013—2016年，檢測雞的H7N9亞型、H5N1亞型禽流感和新城疫病毒抗體；2013—2015年，檢測鴨的H7N9亞型和H5N1亞型禽流感病毒抗體。檢測結果顯示，雞和鴨的H7N9亞型禽流感抗體陽性率為0。雞的H5N1亞型禽流感抗體年均陽性率98.67%，各年份均在96%以上，免疫合格率高。雞新城疫抗體4年平均陽性率為62.86%，2013年的抗體陽性率較高(71.24%)，其余各年份的抗體陽性率較低，其中2016年僅為58.25%(圖3)。2013—2015年，鴨的H5N1亞型禽流感抗體分別為86.81%、100%、100%(圖4)，年均陽性率為95.60%。

2.3　不同種間免疫效果差異

O型口蹄疫為家畜的強制性免疫項目，其抗體為每年必檢項目。2013—2016年，寧海縣的O型口蹄疫病毒抗體檢測結果顯示，牛的O型口蹄疫抗體的年均陽性率為93.44%，免疫效果顯著(P<0.05)優于羊(圖5)。

2.4　季節對抗體檢出結果的影響

從2013—2016年監測數據可以看出，新城疫抗體受季節影響較大，各月份檢測的抗體陽性率差異大(圖6)，幅度在50%～75%之間，夏季(6—8月)抗體季平均陽性率最低(54.64%)。其余所檢抗體檢測結果受季節影響小，陽性率變化較小，如家禽的H5N1亞型禽流感抗體陽性率在95%～100%間(圖7)。

圖3　雞禽流感和新城疫抗體檢出情況Fig.3　Test result of AI and ND in chicken

圖4　鴨H5N1亞型禽流感抗體檢出情況Fig.4　Test result of H5N1 in duck

柱上無相同小寫字母的表示差異顯著(P<0.05)。Bars marked without the same letters indicated significant difference at P<0.05.圖5　家畜O型口蹄疫病毒抗體檢出情況比較Fig.5　Comparison of detection of FMDV-O antibodies in domestic animals

圖6　雞新城疫抗體不同月份的檢出情況Fig.6　Detection of chicken ND antibody in different months

圖7　家禽H5N1亞型禽流感抗體不同月份的檢出情況Fig.7　Detection of poultry H5N1 in different months

3　討論

我國將口蹄疫、豬瘟、高致病性禽流感、雞新城疫等列為一類動物疫病，豬繁殖與呼吸綜合征等列為二類動物疫病[11]。這些疾病的爆發給畜禽業造成巨大的經濟損失，同時嚴重地危害人類的健康和生命安全。對畜禽進行預防接種是我國采取的防治主要傳染性疾病的重要措施之一，并通過檢測血清免疫抗體來反映群體的免疫效果和抵抗力。寧海縣對口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、高致病性禽流感等4種動物疫病實行強制免疫，應免畜禽免疫密度要達到100%，將雞新城疫列為常規預防免疫。目前常用的血清學方法有3種：血凝和血凝抑制試驗、瓊脂擴散試驗(AGP)、酶聯免疫吸附試驗。本文依照有關國家標準進行抗體的檢測和判定。抗體檢測結果表明，寧海縣養殖場(戶)畜禽重大傳染病整體免疫效果良好，牛、豬、雞等動物免疫抗體陽性率全年保持在70%以上，羊口蹄疫和雞新城疫免疫不合格，待改進。

按照畜禽群體免疫合格率應達到70%以上的要求，寧海縣羊口蹄疫和雞新城疫抗體陽性率達不到標準，值得引起相關部門和有關養殖單位重視。口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄獸的一種急性、發熱性、高度接觸性傳染病，多發生于牛、羊、豬等偶蹄類動物，具有較大的危害性[12-13]。寧海縣羊多為農戶山區散養，農戶防疫意識較弱，免疫操作不規范，這是當地2013—2014年口蹄疫抗體檢測不合格的主要原因。發現問題后，寧海縣畜牧獸醫局及時改進，指導和督促養殖戶進行規范免疫，2015—2016年取得明顯成效，O型和亞Ⅰ型口蹄疫抗體陽性率均大于80%。雞新城疫雖然沒有列入國家強制免疫計劃，但雞新城疫是一種熱性、敗血性的急性傳染病，是危害養雞業最嚴重的疫病之一，而且人感染后會引起結膜炎等癥狀。胡北俠等[14]調查顯示，新城疫能感染人，養禽場工作人員新城疫病毒抗體陽性率為33.3%。寧海縣是養雞業大縣，為保證雞群及其接觸人群的健康和禽業的可持續發展，將雞新城疫列為當地常規預防免疫。但新城疫抗體水平低，陽性率<70%，與其他地區報道[15]的情況相似。經分析，主要原因是新城疫免疫在農戶中只進行了飲水免疫，未進行注射免疫，免疫質量低下，抗體效果很差。此外，新城疫抗體水平受季節影響明顯，夏季抗體季平均陽性率最低。其主要原因是夏季溫度高，養殖場保存條件較差，加之飲水免疫自身的不足，疫苗免疫效果受影響。為了有效防控新城疫的發生，建議有條件的養殖場，特別是祖代場和父母代場，采取滴鼻+弱毒苗肌注的免疫方式。

寧海縣畜牧獸醫局按照《中華人民共和國動物防疫法》，認真貫徹《國家中長期動物疫病防治規劃(2012—2020年)》和各年度的國家動物疫病強制免疫計劃要求，結合寧海縣實際，制定免疫實施方案，重點抓好高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟等強制免疫，全面落實免疫措施。同時，要求免疫時應規范操作，做好各項消毒工作，防止人為傳播疫情，并加強疫苗的運輸和保存以保證免疫效果。此外，還定期組織免疫效果監測與評價工作，對被抽檢的養殖場和農戶存欄的家禽和家畜群體抗體合格率未達到規定要求的，限期進行加強免疫。畜禽多數疾病的發生與飼養管理有密切關系，在進行抗體監測的同時，建議養殖場和農戶加強飼養管理，注意環境衛生，并做好隔離、封鎖和消毒工作。

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