高效液相色譜質(zhì)譜法測(cè)定白酒中的環(huán)己基氨基磺酸

◎ 葉彩平，沈 潔，聶榮榮

（梅州市食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)所，廣東 梅州 514000）

白酒保持適度的甜味，可以給人甘醇、綿甜的愉悅感，為追求高檔白酒的醇甜感，一些企業(yè)在生產(chǎn)勾兌過(guò)程中，向低檔白酒中添加各類人工合成的甜味劑，如甜蜜素、三氯蔗糖、糖精鈉等[1]。

目前，市面上的甜味劑多種多樣，而且各種甜味劑的檢測(cè)方式各有不同，甚至連樣品凈化方式都各有不同。增加了檢驗(yàn)的時(shí)間及難度。筆者通過(guò)實(shí)驗(yàn)，對(duì)各種甜味劑的共性進(jìn)行分析，使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，大大簡(jiǎn)化了樣品前處理，提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1 材料與方法

1.1 儀器與藥品

1.1.1 儀器

島津超高效液相色譜串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀（LCMS-8040）、AB 液相色譜儀-質(zhì)譜聯(lián)用儀（API4000）、電噴霧離子源、Labsolutions 色譜工作站。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)品

甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）、三氯蔗糖、糖精鈉、安賽蜜（由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供）。

1.1.3 溶液配制

（1）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液溶液的配制。用水將各標(biāo)準(zhǔn)品溶解定容，配制成100 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。置于1 ～4 ℃ 冰箱保存，可保存12 個(gè)月。

（2）20 mg·L-1標(biāo)準(zhǔn)使用液的配制。準(zhǔn)確吸取 10 mL 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用水稀釋并定容至50 mL，混勻。置于1 ～4 ℃冰箱保存，可保存6 個(gè)月。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：C18柱，2.1 μm，100 mm×2.1 mm；流動(dòng) 相：甲醇、水（10 ∶90）；梯度洗脫條件見表1；流速：0.3 mL·min-1；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫35 ℃。

表1 液相色譜梯度洗脫條件表

1.2.2 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧電離源（ESI）；掃描方式：多反應(yīng)檢測(cè)（MRM）掃描；錐孔電壓：28 V；駐留時(shí)間：3.5 ms。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)步驟

（1）樣品前處理。酒樣經(jīng)水浴加熱蒸發(fā)乙醇后以水定容，過(guò)0.22 μm 的微孔濾膜過(guò)濾

（2）優(yōu)化。對(duì)4 種甜味劑進(jìn)行優(yōu)化，確定母離子、子離子，挑選強(qiáng)度最大的兩對(duì)母離子與子離子作為定性離子對(duì)及定量離子對(duì)。負(fù)離子模式下優(yōu)化方法見表2。

表2 各甜味劑參考保留時(shí)間、定性定量離子對(duì)表

（3）上機(jī)。將配制好的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按濃度由低到高的順序進(jìn)樣測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 液相色譜-質(zhì)譜圖譜

液相色譜-質(zhì)譜圖譜如圖1 ～圖7 所示。

圖1 甜蜜素定性離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（178.00/79.95）

圖2 糖精鈉定量離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（181.90/42.10）

圖3 糖精鈉定性離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（181.90/42.10）

圖4 三氯蔗糖定性離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（395.00/359.00）

圖5 三氯蔗糖定量離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（395.00/361.00）

圖6 安賽蜜定性離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（161.90/82.00）

圖7 安賽蜜定量離子對(duì)色譜-質(zhì)譜圖（161.90/77.90）

2.2 精密度試驗(yàn)

用標(biāo)準(zhǔn)混合液進(jìn)樣1.00 μL，重復(fù)進(jìn)8 次，得出各組分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），見表3。

表3 方法的精密度表

2.3 添加標(biāo)準(zhǔn)樣品回收率實(shí)驗(yàn)

取白酒樣品先測(cè)出各種甜味劑值，然后加入標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定其回收率，實(shí)驗(yàn)表明回收率均在85%以上，具體見表4。

表4 回收率測(cè)定結(jié)果表

3 結(jié)論

本文對(duì)酒樣樣品檢驗(yàn)儀器及方法改進(jìn)，采用超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)，加快檢測(cè)速度，但不影響其峰型及回收率，從而達(dá)到快速測(cè)定、提高工作效率的目的。