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減控油炸麻花中丙烯酰胺生成方法

2018-04-24 12:01:30張云煥馮亞凈李書國
食品科學 2018年7期
關(guān)鍵詞:影響

張云煥,馮亞凈,李書國*

油炸是現(xiàn)如今最受歡迎的且現(xiàn)存時間悠久的烹調(diào)方式之一,它能使食品產(chǎn)生良好的風味和獨特的質(zhì)構(gòu),但其產(chǎn)生的弊端也不容忽視。2004年2月,瑞典國家食品管理局和斯德哥爾摩大學的一項研究表明,在許多油炸和焙烤食物中發(fā)現(xiàn)了丙烯酰胺(acrylamide,Acr)。Acr是一種α,β-不飽和酰胺,主要在一些經(jīng)高溫加工的富含碳水化合物的食品當中產(chǎn)生,其中含量較高的包括炸薯片、炸薯條等油炸食品和焙烤食品[1-3]。研究表明,氨基酸天冬酰胺與羰基源類物質(zhì)的美拉德反應是Acr形成的主要反應途徑[4]。Acr作為一種神經(jīng)毒素,一旦進入人體內(nèi),就會快速分散在人體的各個組織中,對人體的神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)造成嚴重影響,同時具有一定的遺傳毒性和致癌性[5-6]。國際癌癥研究機構(gòu)也通過動物實驗得出結(jié)論,Acr會導致DNA加合物產(chǎn)生,引起基因突變和染色體畸變,被認為是“潛在的人類致癌物”[4]。

近年來,國內(nèi)外學者對食品中Acr的研究大部分集中在Acr檢測手段[7-9]、生成途徑[10-11]、食品中Acr抑制方法的探究[12-13]等方面,研究對象也大多集中在薯片[14-15]、薯條[16-17]、漢堡包、炸雞腿[18]等西式食品,并且已取得一定研究進展。但是,我國居民飲食以中式餐飲為主,其中,中式傳統(tǒng)油炸面食在我國居民的膳食中占很大比重。中式食品在配方工藝和制作過程方面與西式食品有很大的不同;因此對于中式傳統(tǒng)油炸食品中Acr含量的減控措施的探究意義重大。油炸麻花作為深受大眾喜愛的傳統(tǒng)油炸類面食之一,人群消費量大且食用頻率高,但是對于影響油炸麻花中Acr生成量的研究鮮見報道。因此本實驗分析了影響Acr形成的主要因素,系統(tǒng)地研究了傳統(tǒng)油炸麻花中Acr含量的減控措施,為大眾的健康飲食提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

叔丁基對苯二酚(tertiary butylhydroquinone,TBHQ)、甘露醇、赤蘚糖醇、山梨醇(均為分析純)、VC 天津市河東區(qū)紅巖試劑廠;β-環(huán)糊精、β-葡聚糖(均為分析純) 天津市百世化工有限公司;谷氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、甘氨酸、牛磺酸(食品級)、Acr(純度>99.9%)、正己烷(分析純)、甲酸(分析純);甲醇(色譜純) 北京天華化學試劑開發(fā)公司;實驗用油、小蘇打、小麥面粉 市售;實驗用水均為二次蒸餾超純水。

1.2 儀器與設備

LC-10A高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)儀(ODS C18Hypersi色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)、紫外-可見光檢測器)日本島津公司;TM1810型紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司;反相C18萃取小柱 江蘇天翔新型建材有限公司;FA2204型電子分析天平 上海著海儀器有限公司;KQ2200型超聲波清洗儀 昆山市超聲儀器有限公司;TGL-10B型高速臺式離心機 上海安亭科學儀器廠;GZX-9070MBE型電熱鼓風干燥箱 上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠。

1.3 方法

1.3.1 油炸麻花工藝流程

1.3.2 麻花油炸條件及配料控制

1.3.2.1 油炸溫度對Acr生成量的影響

選定油炸時間180 s,分別取油炸溫度為140、150、160、170 ℃和180 ℃,選取最適油炸溫度。

1.3.2.2 油炸時間對Acr生成量的影響

在最適油炸溫度下,分別取油炸時間為80、120、140、160、180 s和190 s,選取最適時間,后續(xù)實驗均在最適油炸溫度和時間下進行。

1.3.2.3 植物油類型對Acr生成量的影響

選定油炸時間180 s,油炸溫度160 ℃,分別使用棕櫚油、花生油、大豆油和玉米油進行油炸。

1.3.2.4 多酚類抗氧化劑對Acr生成量的影響

分別使用VC、阿魏酸和TBHQ,按0.0%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%和0.5%面粉質(zhì)量添加多酚類抗氧化劑。選定油炸時間180 s,油炸溫度160 ℃,使用花生油進行油炸。

1.3.2.5 非還原糖對Acr生成量的影響

分別選取甘露醇、山梨醇、赤蘚糖醇、蔗糖、β-葡聚糖和β-環(huán)糊精,按0.5%面粉質(zhì)量進行添加。固定油炸時間180 s,油炸溫度160 ℃,使用花生油進行油炸。

1.3.2.6 氨基酸對Acr生成量的影響

分別選取半胱氨酸、谷氨酸、賴氨酸和甘氨酸,按面粉質(zhì)量0.0%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%和0.5%進行添加。固定油炸時間180 s,油炸溫度160 ℃,使用花生油油炸。

1.3.3 麻花中Acr的提取

稱取10 g粉碎后的麻花,置于50 mL離心管中,加入20 mL的蟻酸水溶液(φ=0.1%),振蕩搖勻,8 000 r/min離心15 min,收集第一次的上清液,然后在沉淀中再加入20 mL的蟻酸水溶液(φ=0.1%),進行上述操作,連續(xù)收集2 次上清液,然后在上清液中加入10 mL的正己烷,再離心20 min,收集液體。用注射器避開油層吸取上清液中間清液5 mL,過0.45 μm的聚偏氟乙烯濾膜,再取2 mL濾液通過預先活化的C18固相萃取小柱,待樣液全部通過后用l mL水沖洗,棄去濾液,最后用2 mL洗脫液(體積分數(shù)10%甲醇+90%水+0.1%甲酸)進行洗脫,棄去最初的0.5 mL濾液,收集剩余的濾液用于HPLC分析。

1.3.4 HPLC法測定麻花中Acr含量

HPLC分析條件:流動相為甲醇-水(5∶95,V/V);流速0.50 mL/min;柱溫25 ℃;檢測波長200 nm;進樣量20 μL。

標準曲線的繪制:準確稱取0.10 g Acr標準品,充分溶解并定容于100 mL棕色容量瓶,得到1 mg/mL Acr標準液。準確移取1 mL配制好的Acr標準液,定容到100 mL容量瓶中,制得10 μg/mL的標準儲備液。分別移取Acr標準液0.2、0.4、0.8、1.0 mL和2.0 mL,定容到10 mL容量瓶中,得到質(zhì)量濃度分別為0.2、0.4、0.8、1.0 μg/mL和2.0 μg/mL的系列標準溶液。進行HPLC的測定,并以峰面積值-Acr質(zhì)量濃度繪制標準曲線圖。

樣品質(zhì)量濃度計算:稱取各種條件下提取所得樣品,根據(jù)標準曲線方程,計算麻花樣品中Acr質(zhì)量濃度。

2 結(jié)果與分析

2.1 HPLC法測定麻花中Acr質(zhì)量濃度

圖1 Acr標準品HPLC圖Fig. 1 High performance liquid chromatogram of Acr standard

圖2 油炸麻花樣品中Acr的HPLC圖Fig. 2 High performance liquid chromatogram of Acr in fried dough twist

Acr標準品在選取的HPLC條件下分離效果較好,且保留時間均為9.84 min。Acr標準品色譜圖見圖1,自制麻花樣品中Acr的HPLC圖見圖2。對0.2、0.4、0.8、1.0 μg/mL和2.0 μg/mL這5 個質(zhì)量濃度的標準溶液進樣分析,以色譜峰的峰面積為縱坐標,以Acr生成量為橫坐標作標準曲線(圖3),其回歸方程:y=1 627.2x-52.334,線性相關(guān)系數(shù)R2=0.998 7,結(jié)果表明,Acr在0.2~2.0 μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

圖3 Acr標準曲線圖Fig. 3 Standard curve of Acr

2.2 油炸條件對麻花中Acr生成量的影響

在食品加工過程中,影響美拉德反應的因素也會影響Acr的形成。其中,主要的影響因素有食品基質(zhì)、加工溫度、加熱時間、加工方式、水分含量和pH值等[19]。

2.2.1 油炸溫度對麻花中Acr生成量的影響

圖4 油炸溫度對麻花中Acr生成量的影響Fig. 4 Effect of frying temperature on Acr formation in fried dough twist

由圖4可知,控制油炸溫度在140~160 ℃范圍之內(nèi),Acr生成量呈微小的上升趨勢,但在160~180 ℃的范圍內(nèi)時,Acr生成量顯著增多;這是因為油炸麻花樣品中含有大量的淀粉,而淀粉在高溫油炸環(huán)境中會自動分解為一些小分子類單糖,這些單糖經(jīng)過非酶促反應形成了丙烯醛,丙烯醛進一步反應成Acr[20]。綜合考慮Acr生成量和麻花的感官評價,確定適宜的油炸溫度為160 ℃。

2.2.2 油炸時間對麻花中Acr生成量的影響

圖5 油炸時間對麻花中Acr生成量的影響Fig. 5 Effect of frying time on Acr formation in fried dough twist

在油炸溫度為160 ℃時,進行不同油炸時間的實驗。從油炸時間對Acr生成量的變化曲線(圖5)可知,在80~190 s的范圍內(nèi),Acr的生成量隨著油炸時間的延長而呈上升趨勢,即時間越長,Acr的生成量越多。考慮到麻花生熟程度,綜合油炸溫度和油炸時間的實驗結(jié)果,最終將后續(xù)實驗的條件設為160 ℃油炸180 s。

2.2.3 植物油種類對油炸麻花中Acr生成量的影響

本實驗選用4 種不同植物油:花生油、玉米油、大豆油和棕櫚油,研究不同類型的油對油炸麻花中Acr生成量的影響,結(jié)果見圖6。

圖6 不同類型植物油對麻花中Acr生成量的影響Fig. 6 Effect of vegetable oils on Acr formation in fried dough twist

使用棕櫚油處理的麻花Acr生成量為(65.12±0.18)μg/kg,比花生油實驗組、大豆油實驗組和玉米油實驗組產(chǎn)生的Acr分別高出62.5%、44.4%和30.0%。Kotsiou等[21]也曾得出類似的結(jié)論,他們將棕櫚油提取物加入模擬體系中,發(fā)現(xiàn)Acr的生成量明顯增多。主要原因是棕櫚油的主要成分是裂環(huán)烯醚萜,裂環(huán)烯醚萜結(jié)構(gòu)中含有醛基,可與氨基酸發(fā)生反應,促進了Acr的形成。

在食品工業(yè)生產(chǎn)中,用于油炸食品的油類一般是棕櫚油,因其性質(zhì)穩(wěn)定,且在油炸烹飪過程中不易發(fā)生分解,所以廣泛地應用于油炸食品當中;但棕櫚油經(jīng)高溫產(chǎn)生的Acr生成量相對較多,因此在日常烹飪中,應盡量避免棕櫚油的使用,盡可能選擇Acr生成量較少的花生油、大豆油和玉米油等。

2.3 麻花配料對麻花中Acr生成的影響

2.3.1 酚類抗氧化劑對麻花中Acr生成量的影響

圖7 酚類抗氧化劑對麻花中Acr生成量的影響Fig. 7 Effect of phenolic antioxidants on Acr formation in fried dough twist

由圖7可知,未添加任何食品添加劑時Acr的產(chǎn)生量為56.2 μg/kg,添加VC和阿魏酸均有抑制效果,且當添加量在0.1%~0.3%范圍內(nèi),抑制作用不很明顯;繼續(xù)增大添加量至0.4%,VC和阿魏酸產(chǎn)生明顯的抑制效果,抑制率可達23.85%和19.92%;當添加量為0.5%時抑制率最大,分別為40.93%和45.02%。VC雖然起初對Acr的生成有促進作用,但最終會大量減少Acr的生成;阿魏酸可使Acr的生成量減少近50%,這可能是由于阿魏酸會與Acr前體及中間產(chǎn)物反應;而TBHQ在添加量0.1%~0.5%范圍內(nèi),添加量與Acr生成量呈正相關(guān)趨勢。

Acr的形成不是單純的氧化過程,抗氧化劑的作用主要是通過抑制油脂氧化而阻止羰基類化合物形成Acr。一些酚類抗氧化劑的醌型結(jié)構(gòu)會通過與氨基類物質(zhì)反應破壞Acr,從而降低Acr生成量,而酚型結(jié)構(gòu)則可能促進Acr形成。綜合本實驗結(jié)果及前人研究推斷,抗氧化劑可能通過以下兩種方式抑制Acr的形成:其一是抗氧化產(chǎn)物破壞生成的Acr;其二是形成的醌或羰基化合物與Acr的主要前體天冬酰胺和3-氨基丙酰胺反應,從而抑制Acr的形成[22-23]。總之,抗氧化劑對Acr形成的影響因抗氧化劑種類和植物來源而異,有的抑制Acr生成,有的促進Acr生成,因此對其作用機理還需做深入研究。

2.3.2 非還原性糖對麻花中Acr生成量的抑制作用

表1 非還原糖對麻花中Acr生成量的抑制作用Table 1 Inhibitory effect of non-reducing saccharides on Acr formation in fried dough twist

非還原性糖對Acr生成量的抑制作用見表1,甘露醇、山梨醇、赤蘚糖醇、β-葡聚糖和β-環(huán)糊精均對Acr生成量有抑制作用,效果由大到小依次是β-環(huán)糊精、甘露醇、山梨醇、赤蘚糖醇、β-葡聚糖。蔗糖的加入沒有抑制Acr生成,反而增加了Acr的生成量,增加率為25.3%,表明雖然油炸食物中物質(zhì)種類較豐富,存在比較復雜的體系,但是非還原糖對于Acr的作用規(guī)律受其他因素影響較小。因此可以考慮在實際油炸食品制作過程中添加一定比例的非還原糖,可起到改善口感和抑制Acr生成的作用。

環(huán)糊精的分子具有特殊中空的略呈錐形的圓筒立體環(huán)狀結(jié)構(gòu),其“內(nèi)腔疏水,外壁親水”[24-26],具有較好的包埋作用,可以阻隔天冬酰胺與葡萄糖、果糖等還原糖的接觸從而降低二者之間的反應,抑制Acr的形成。

2.3.3 氨基酸種類對麻花中Acr生成量的影響

圖8 不同種類氨基酸對麻花中Acr生成量的影響Fig. 8 Effect of amino acid type on Acr formation in fried dough twist

研究了4 種氨基酸分別與Acr反應,結(jié)果顯示它們對Acr的生成均有一定的抑制作用,且隨著添加量的增大,Acr生成量不斷減少,但減小的程度不同(圖8)。當氨基酸添加量小于0.2%時,甘氨酸的抑制作用最為顯著,半胱氨酸、谷氨酸次之,賴氨酸無明顯抑制效果;當氨基酸添加量在0.3%~0.5%范圍內(nèi),谷氨酸對應的Acr生成量迅速下降,最終抑制效果優(yōu)于其他3 種氨基酸;當添加量為0.5%,半胱氨酸、谷氨酸、賴氨酸、甘氨酸抑制率達到最大,分別為53.20%、60.85%、18.14%、48.40%,賴氨酸僅18.14%,原因可能是賴氨酸在水溶液的溶解度較小。

氨基酸抑制Acr的形成可能有以下機制,一是氨基酸能競爭性地消耗Acr的前體或者通過氨基酸的親核反應來增加消除Acr的能力;二是某些氨基酸可以和天冬酰胺競爭還原糖,Acr主要是由氨基酸與還原糖發(fā)生美拉德反應生成,其中天冬氨酸與還原糖反應生成的Acr最多,其他氨基酸只生成少量的Acr,因此通過加入除天冬氨酸以外的氨基酸,可以和天冬氨酸競爭反應進而減少Acr的含量;三是某些氨基酸的活性氨基或巰基與Acr發(fā)生麥克爾加成反應[27-29],如半胱氨酸的巰基會與Acr反應生成半胱-S-丙氨酸,從而降低Acr生成量,某些谷氨酸、甘氨酸、L-半胱氨酸對Acr的抑制率分別達到95%、91%和87%;因此一些氨基酸如谷氨酸、甘氨酸、L-半胱氨酸等可以成為食品中的Acr抑制劑,應用于油炸食品。

3 結(jié) 論

油炸溫度、油炸時間、油炸用油對油炸麻花中Acr的形成均有顯著影響,Acr的形成隨著油炸溫度升高和油炸時間的延長而增加,油炸溫度高于160 ℃后Acr的生成量快速增加,綜合考慮確定最佳的油炸溫度和油炸時間分別為160 ℃和180 s;使用花生油、玉米油、大豆油油炸麻花的Acr生成量均顯著低于棕櫚油;抗氧化劑VC和阿魏酸均能抑制Acr的生成,當添加量大于0.5%時,對Acr的抑制效果明顯增加,而TBHQ反而促進Acr的產(chǎn)生;非還原糖中β-環(huán)糊精對Acr的抑制效果最明顯,而蔗糖則起到促進作用;由于競爭機制和麥克爾加成反應的存在,半胱氨酸、谷氨酸、賴氨酸、甘氨酸均能抑制Acr的生成,添加量低于0.2%時,甘氨酸對Acr形成的抑制效果最佳,添加量在0.3%~0.5%時,谷氨酸抑制效果最佳。綜上所述,通過控制油炸麻花的油炸溫度、時間、植物油類型以及添加合適的食品抗氧化劑、氨基酸以及非還原糖或糖醇等可以顯著抑制Acr的形成,提高油炸麻花的食用安全水平。

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