PIVKA—Ⅱ與GP73聯合檢測在AFP低濃度肝癌診斷中的臨床價值

何彪 邱振華 黃燕金 蘇曉文

【摘要】 目的：探討異常凝血酶原（protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ，PIVKA-Ⅱ）與高爾基體蛋白（Golgi glycoprotein，GP73）聯合檢測對診斷血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）低濃度的原發性肝癌（primary hepatic carcinoma，PHC）的臨床價值。方法：選取本院2015年3月-2016年12月AFP低濃度PHC72例，其他肝病68例，同期體檢正常對照組110例，分別檢測PIVKA-Ⅱ（ELISA）和GP73（ELISA）、AFP（化學發光法）的血清濃度水平。結果：PIVKA-Ⅱ與GP73聯合檢測在AFP低濃度PHC的系列試驗特異度高達100%，聯合試驗敏感度達90.2%。結論：單獨檢測PIVKA-Ⅱ和GP73對AFP低濃度肝癌具有較高的診斷價值，PIVKA-Ⅱ與GP73聯合檢測可提高AFP低濃度肝癌診斷。

【關鍵詞】 肝癌； PIVKA-II； GP73； AFP

【Abstract】 Objective：To combined detection of PIVKA-Ⅱ and GP73 for the diagnosis of low concentration of AFP PHC clinical value.Method：72 cases of low concentration of AFP PHC，and other liver diseases of 58 cases were selected in our hospital from May 2015 to December 2016，110 cases of normal control group in the same physical examination，they were detected in PIVKA-Ⅱ（ELISA）and GP73 （ELISA），AFP（chemiluminescence）concentration level.Result：Combined detection of PIVKA-Ⅱ and GP73 had high diagnostic efficacy at low AFP concentration in PHC，and the specificity of the test was as high as 100%.Joint test sensitivity was 90.2%.Conclusion：The independent detection of PIVKA-Ⅱ and GP73 is high diagnostic value for low AFP PHC，and the combined detection of PIVKA-II and GP73 can improve the diagnostic value of low AFP PHC.

【Key words】 Liver cancer； PIVKA-Ⅱ； GP73； AFP

First-authors address：The Peoples Hospital of Gaozhou，Gaozhou 525200，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.04.028

原發性肝癌（primary hepatic carcinoma，PHC）是現今我國第4位的常見惡性腫瘤，嚴重威脅我國人民的生命和健康[1-2]。對肝癌高危人群的篩查，有助于早期發現、早期診斷、早期治療，是提高肝癌療效的關鍵。臨床上把早期的診療作為延長PHC患者生存期和改善生活質量的重要策略。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是目前大多數醫院最常用的PHC腫瘤標志物，但靈敏度和特異性都不能滿足臨床需要，約30%的肝癌患者AFP水平正常[3]。人異常凝血酶原（protein induced by vitamin K absence or antagonist-II，PIVKA-Ⅱ）是肝臟合成的異常脫羧基凝血酶原，最近研究表示它能通過誘導和刺激肝癌細胞的增殖和侵襲。多項研究數據表明高爾基體蛋白（Golgi glycoprotein，GP73）在肝癌患者中有高濃度的表達，具有較高的特異性。本研究擬通過對PIVKA-Ⅱ與GP73濃度水平回顧性的分析，以提高在AFP低濃度的PHC實驗室診斷水平，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2015年3月-2016年12月的肝病患者140例，納入標準：嚴格按照《原發性肝癌診療規范》（2017年版）進行篩選。排除標準：其他惡性腫瘤患者；嚴重感染或腎功不全患者；代謝性疾病患者；孕婦或哺乳期患者。其中AFP低濃度PHC組72例，PHC組病例選擇經過病理組織切片或細胞學確診；非肝癌的其他肝病組經影像或病理組織學確診68例。本研究已獲倫理學委員會批準和患者知情同意。選取同期體檢健康者110例為健康對照組。

1.2 方法 所有待檢者均要求在清晨空腹狀態下抽靜脈血3～5 mL，血液在室溫下自然凝固后，3 500 r/min分離血清，-75 ℃保存待測。PIVKA-Ⅱ、AFP使用雅培ARCHTECT-I2000進行檢測，使用相應的配套試劑。采用ELISA方法進行測定GP73的濃度，試劑購于中山金橋生物制品公司。以上所有檢測均嚴格按照相應的說明書進行操作。

1.3 觀察指標與評價標準 觀察各組PIVKA-Ⅱ、GP73的陽性率、特異性及敏感度。聯合檢測包括系列試驗（串聯試驗）和平行試驗（并聯試驗），采用多種方法檢測時，系列實驗是指必須幾個指標均為陽性才能診斷為陽性。平行試驗是幾個指標中有一個陽性即診斷為陽性。

1.4 統計學處理 使用SPSS 17.0統計軟件進行分析，計量資料采用（x±s）表示，比較采用t檢驗，計量資料采用率（%）表示，比較采用 字2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組患者一般資料比較 三組患者的年齡、性別比較差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 各組PIVKA-Ⅱ和GP73陽性情況比較 PIVKA-Ⅱ和GP73在AFP低濃度PHC組、其他肝病組和健康對照組兩兩比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。其他肝病組和健康對照組中PIVKA-Ⅱ和GP73陽性情況比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。見表2。

2.3 PIVKA-Ⅱ、GP73單項或聯合檢測的診斷效能分析 對于AFP低濃度PHC診斷效能分析，PIVKA-Ⅱ的敏感度（76.5%）和特異性（95.2%）均高于GP73的敏感度（72.2%）和特異性（94.6%）。在72例AFP低濃度PHC患者中，系列實驗的特異度（100%）、準確度（87.6%）高于平行實驗，但敏感度（57.1%）低于平行實驗（90.2%）。見表3。

3 討論

PHC為我國常見的消化系統腫瘤，具有惡性程度高、病情進展快，致死率較高的特點。我國每年因肝癌死亡的人數占全球的一半。肝癌癥中晚期一般會伴有肝內外的轉移，手術切除術效果較差。目前PHC的診斷主要依靠影像檢查和病理活檢切片檢查，對早期的篩查診斷造成了一定的困難。因此，疾病早期的篩查和及早地診斷在臨床治療PHC上顯得尤為必須和重要。

血清腫瘤標志物對檢測PHC有重要的意義。文獻[4]研究發現，在PHC的早期篩查中，腫瘤標志物檢測比影像學或組織病理學提前4～6個月，目前臨床上檢測AFP是診斷PHC的常用方法。AFP起源于胚胎肝細胞，在肝細胞發生癌變后部分肝癌細胞會恢復產生這種蛋白的能力[5]。但AFP用于原發性肝癌的診斷也存在一些局限性，對于檢測瘤體小的肝癌和早期肝癌，陰性率較高[6-8]。有資料指出包括肝內膽管癌、高分化和低分化的PHC或已液化壞死的PHC患者，AFP濃度水平均發生不增高的情況，對于AFP低濃度或陰性的PHC患者容易造成漏診[9-11]，因此尋求新的標志物，對疾病的早期診斷和治療有著重大的臨床意義。

PIVKA-Ⅱ由肝臟合成，但沒有相應的凝血酶活性，是一種特異性較強和敏感度較高的腫瘤標志物[12-14]。對于肝癌組織中產生PIVKA-Ⅱ的機制有多種說法，其中比較流行的包括在肝癌細胞中γ-羧基凝血酶原轉錄后表達異常和過多的凝血酶原前體產生、維生素K代謝異常后導致Vit-K可用性下降等一系列機制，從而導致在肝癌組織中過表達等。研究表明，肝癌細胞轉種動物肝臟實驗能產生大量PIVKA-Ⅱ并分泌到肝細胞外，而且濃度水平和種植時間成正相關[15-16]。本試驗72例AFP低濃度的PHC患者中的PIVKA-Ⅱ的陽性率遠高于其他肝病組和健康對照組，比較差異均有統計學意義（P<0.05），PIVKA-Ⅱ在其他肝病組的陽性率也高于健康對照組（P<0.05）。GP73是肝細胞中的一組高爾基體Ⅱ型跨膜糖蛋白，在正常生理情況下位于體內細胞的高爾基順面膜囊上，血清濃度極低，但在病理狀況下可游離出肝細胞的表面分泌到血液中[17-18]。國內外的研究發現PHC患者中的GP73可有較高的表達，而且具有較好的組織特異性和敏感性[18-21]。本試驗結果為AFP低濃度PHC患者中的GP73陽性率高于其他肝病組和健康對照組，比較差異均具有統計學意義（P<0.05）。表明了GP73對診斷AFP低濃度的PHC患者具有較高的陽性率，這與文獻[22-23]研究結果一致。在臨床上可以通過檢測GP73從而互補了AFP低濃度的PHC的臨床檢測。

本研究通過單獨檢測AFP低濃度的PHC患者中PIVKA-Ⅱ或GP73，發現前者的敏感度、特異度均高于后者，表明PIVKA-Ⅱ在AFP低濃度的PHC的診斷中有較好的價值，但目前暫未檢索與此相應的研究數據或文獻報道。在兩個病例組的聯合實驗發現，PIVKA-Ⅱ和GP73的系列試驗特異度和準確度均高于平行實驗，其系列試驗特異度高達100%。平行實驗的敏感度也相應地提高到90.2%。單項的PIVKA-Ⅱ或GP73都有其自身的診斷價值的同時也存在相應的局限性。通過PIVKA-Ⅱ和GP73的聯合檢測可進一步提高AFP低濃度的PHC的敏感性和特異性，增高疾病的檢出率，為診治提供更好依據。

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（收稿日期：2017-10-27） （本文編輯：周亞杰）