果蔬中有機氯、有機磷農藥殘留檢測技術研究

有機氯農藥是一種廣譜殺蟲劑，具有性質穩定、不易分解等特性。我國雖禁止生產，但已生產的產品在一定范圍內仍在使用，因而它在糧食、水果、禽蛋、茶葉、中藥材中均有檢出。特別是六六六（BHC）、滴滴涕（DDT）曾廣泛適用于糧食作物、果蔬和中藥材栽培中。

有機磷農藥的發展較有機氯農藥要晚一些，是世界上生產和使用最多的農藥品種。其生產品種將近40個，像甲胺磷、敵敵畏、敵百蟲、樂果等年產量均在萬噸以上。它具有品種多、藥效高、應用范圍廣，在環境中降解快、殘毒低等特點。

一、果蔬樣品前處理

樣品前處理包括待測物的提取、凈化和濃縮。果蔬中殘留農藥的常規提取方法有振蕩法，勻漿、搗碎法，索氏提取法，加速溶劑提取法（ASE）等。常用的萃取劑有甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑。

自20世紀90年代起，一些新的樣品前處理技術不斷被引入農藥殘留分析中。目前，我國已報道或已取得廣泛應用的新技術主要有：固相萃取法（SPE）、固相微萃取法（SPME）、超臨界流體萃取法（SFE）、基質固相分散萃取技術（MSPDE）等。

二、果蔬中有機氯、有機磷農藥殘留分析技術

（一）常用分析方法

1.薄層色譜法

薄層色譜（thin layer chromatog-

raphy，TLC）法又稱薄層層析。該方法不需要特殊設備，簡單、快速、直觀，可同時分析多個樣品，但靈敏度較低，常與其他技術聯用。高效薄層色譜法（HPTLC）是更為靈敏的定量薄層分析技術，與其他檢測器聯用使TLC的應用前景大為

提高。

2.氣相色譜法

氣相色譜法是目前應用最多的方法。目前，70%的農藥殘留量檢測是使用氣相色譜法進行的。GC法具有分析速度快、分離效能高、靈敏度高、應用范圍廣、同時分離分析多種組分等優點，廣泛用于相對分子質量較小、易氣化、氣化后又不發生分解的農藥殘留的分析。該方法有多種檢測器可選擇，特別是專用檢測器，能極大提高成分的檢測靈敏度。近年來，我國又出現了雙柱、雙通道分析法。該方法根據成分及標準品在不同類型的色譜柱上的響應情況進行定性和定量，準確性大大提高。2004年，氣相色譜雙柱法已經列入了農業部的部頒標準。

3.高效液相色譜法

該方法具有分離速度快、檢測效率高、重復性好的特點，主要分離檢測極性強、相對分子質量大的離子型農藥，有多種檢測器（紫外檢測器、二極管陣列檢測器、熒光檢測器等）。不同的農藥可用不同的檢測器分析，如氨基甲酸酯類農藥采用柱后衍生化熒光檢測器檢測。HPLC對不易氣化或受熱易分解的農藥更能顯示出突出的優點，但它在分析組分比較復雜的樣品時，選擇性和靈敏度不如氣相色譜好。

4.氣譜-質譜聯用

GC-MS聯用儀（Gas chromato-

graphmass spectrometer，GC–MS）通常指氣相色譜儀和質譜儀的在線聯用技術，可用于農藥單殘留或多殘留的快速分離與定性。近年來，由于串聯質譜（GC-MS-MS）聯用技術已得到了逐步的應用和發展，可以獲得更加豐富的信息。它可以將在色譜上不能完全分離的共流出物利用時間編程和多通道檢測將其完全分開，使分析的準確性進一步提高，因此特別適用于背景干擾嚴重、定性困難、樣品組分含量低的情況，因而串聯質譜是農藥殘留分析的發展趨勢。近年來逐漸被世界各國權威檢測機構用于仲裁分析。

5.酶分析技術

酶分析技術是直接利用農藥對酶活性抑制原理，檢測農藥殘留的技術。該技術檢測快速、成本低，適合現場檢測和大批量樣品的篩選。它是農藥殘留速測技術之一，在今后的農藥殘留檢測中將占有重要地位。如膽堿酯酶抑制法，以及已被定為國家標準推薦分析方法的速測卡法和分光光度計法。檢出時間小于30min。對超出國家標準允許殘留量或違禁使用的有機磷和氨基甲酸酯類農藥有效檢出率在80%以上。

（二）檢測分析新技術

1.超臨界流體色譜法

超臨界流體色譜（supercritical fluid chromatography，SFC）法是以超臨界流體（supercritical fluid，SF）為流動相的色譜技術。它可以與大部分GC和HPLC的檢測器相連接，如FID、FPD、NPD以及MS等聯用，拓寬了其應用范圍。許多在GC或HPLC上需經過衍生化才能分析的農藥，都可以用SFC直接測定。它的不足是極性較低，因而對于弱極性或非極性的農藥采用超臨界流體色譜分析是理想的，而要分析強極性農藥就必須加入大量的極性溶劑如甲醇等，因而它的使用也有一定的限制。

2.柱切換高效液相技術（CSHPLC）

該方法是將固相萃取與現代高效液相技術相結合，利用多通路切換閥，改變進樣閥與色譜柱、色譜柱與色譜柱、色譜柱與檢測器之間的連接關系，從而在特定時間內使兩種或兩種以上流動相以不同流路或走向洗脫不同柱子以達到多種不同分離目的技術。該技術集樣品凈化與濃縮及分離測定為一體，樣本不需預處理或預處理大大簡化，可直接進樣分析。目前，該技術已廣泛應用于環保、農藥殘留監測等

領域。

3.液相色譜與質譜聯用法

LC-MS聯用儀（Liquid chro-

matographmass spectrometer，LC–MS）通常指高效液相色譜儀與質譜儀的在線聯用。與GC-MS類似，液相色譜作為質譜的特殊進樣器，與GC-MS的區別是LC-MS適合于熱不穩定、難揮發等農藥殘留的快速定性和定量分析。

4.毛細管電泳（CE）和毛細管區帶電泳（CZE）

CE和CZE特別適合分離常規液相色譜難以分離的離子性化合物。CE具有操作簡單、分析速度快、運行成本低、柱高效的特點。CZE分離效率高、操作簡便，具有很大的靈活性，對許多分離參數，如緩沖液的組成和pH值、毛細管的類型以及使用的電場波形等都可以調節，其測定所需樣品量極少。

5.串聯質譜法

質譜-質譜聯用或多級質譜（MS-MS）是在20世紀70年代后期迅速發展起來的一種新型質譜技術，美國農業部的Beltsville農業研究中心利用直接進樣桿技術結合串聯質譜技術分析了水果和蔬菜萃取物中的22種殘留農藥。國外已有許多文獻報道了串聯質譜法在農藥殘留分析中的應用，但國內在這方面的研究較少。

6.免疫分析法

免疫分析法（immunoassay）是以抗原和抗體的特異性、可逆性結合反應為基礎的分析方法，其分為熒光免疫法、發光免疫法、酶免疫法及電化學免疫法等非放射免疫法和放射免疫法。有機氯農藥使用時間最長，應用范圍最廣，但對其殘留免疫分析研究卻較少。

7.生物傳感器技術

生物傳感器是利用生物活性物質，如酶、抗原、抗體、細胞、組織等作為傳感器的識別元件，與樣品中的待測物質發生特異性反應，通過適當的換能器將這些反應（形成復合物、發色、發光等）轉換成可以輸出檢測的信號（電壓、頻率等），通過分析信號對待測物進行定性和定量檢測。在有機磷農藥檢測的應用中，研究較多的是基于膽堿酯酶作分子識別元件的電化學生物傳感器，均是基于有機磷對膽堿酯酶活性的抑制作用而設計的。

三、結論

總之，我國目前應用于果蔬上的農藥殘留檢測技術較多，而利用固相萃取進行凈化、濃縮的前處理，同時借助現代高效液相色譜法、氣相色譜法、氣譜-質譜聯用、超臨界流體色譜法、柱切換高效液相技術等方法進行分析檢測，將是一種行之有效，具有廣泛應用前景的技術。