北京市密云區呼吸道感染患兒常見呼吸道病毒檢測結果分析

蔣會婷 鄭蘭紫 王婭瓊 耿利彬 張巍巍 馮寶立

呼吸道病毒感染是兒童急性呼吸道感染最常見的原因［1］，為了解北京市密云區兒童呼吸道傳染病的流行動態和呼吸道病毒的感染狀況，現對2014年9月－2016年8月患病兒童的咽拭子樣本，進行了8種呼吸道病毒的檢測，結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本采集 2014年9月－2016年8月，因呼吸道感染到密云區醫院就診的患兒，包括急性上呼吸道感染病例，肺炎病例及重癥肺炎病例，三種類型病例的樣本比例為1∶2∶1。病例定義參照北京市呼吸道傳染病病原學監測工作方案。每月隨機采集10件樣本，每周均衡分布，共采集了240件咽拭子樣本。

1.2 試劑與材料 呼吸道病毒采樣管為友康基業生物科技(北京)有限公司產品。病毒RNA提取試劑羅氏MagNA Pure LC2.0核酸提取試劑盒為Roche公司產品。呼吸道病毒核酸多重聯檢試劑盒為江蘇和創生物科技有限公司產品。

1.3 核酸提取 取50 μL樣本，使用羅氏 MagNA Pure LC2.0型全自動核酸提取儀提取病毒RNA，提取物用100 μL洗脫液溶解，立即置－70℃保存備用，操作方法按照儀器使用說明書。

1.4 實時熒光RT-PCR檢測 用PCR的方法檢測8種常見呼吸道病毒核酸，包括流感病毒(甲型流感病毒、乙型流感病毒)、副流感病毒、腺病毒、冠狀病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、鼻病毒、博卡病毒。按照和創呼吸道病毒核酸多重聯檢試劑盒說明書進行PCR體系配制。使用Roche 480型實時熒光PCR儀進行熒光PCR擴增，根據試劑盒4組16個檢測指標熒光集團信號的設定［2］，進行結果判斷。

1.5 統計學方法 用SPSS 19.0軟件進行數據分析。所得數據采用χ2檢驗進行分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 呼吸道病毒病原譜檢出情況 在240份兒童呼吸道感染病例樣本中，99份樣本檢出呼吸道病毒，陽性率為41.25%。其中流感病毒檢出陽性率最高為9.58%，其次為副流感病毒和鼻病毒，檢出陽性率為7.92%。還出現兩種病毒的混合感染共11例。分別出現人偏肺病毒和副流感病毒混合感染1例，鼻病毒和腺病毒混合感染4例，流感病毒和副流感病毒混合感染2例，鼻病毒和副流感病毒混合感染4例(表1)。

表1 2014年9月－2016年8月密云區呼吸道患兒呼吸道病毒病檢出情況(n=240)

2.2 不同季節檢出情況 對所檢測的呼吸道病毒的總體陽性率而言，春季檢出陽性率最高，為50.00%，夏季最低，為28.17%。經χ2檢驗，不同季節陽性檢出率有統計學差異(P＜0.05)。其中，流感病毒檢出陽性率在冬季(18.33%)和春季(16.67%)較高，副流感病毒檢出陽性率在夏季(12.68%)和秋季(14.29%)較高。腺病毒檢出陽性率最高的季節是秋季(6.12%)，冠狀病毒檢出陽性率最高的季節是冬季(3.33%)，呼吸道合胞病毒檢出陽性率最高的季節是冬季(13.33%)，人偏肺病毒檢出陽性率最高的季節是春季(8.33%)，鼻病毒檢出陽性率最高的季節是春季(10.00%)和秋季(14.29%，表2和3)。

表2 兒童呼吸道病毒感染的流行特征

2.3 不同年齡組患兒呼吸道病毒檢出陽性率比較依據患兒年齡，分為0～、4～、7～14歲3個年齡組對結果進行統計分析，結果顯示0～歲年齡組呼吸道病毒檢出陽性率最高，為43.81%，經χ2檢驗，不同年齡組檢出陽性率無統計學意義(P＞0.05，表2)。其中，4～歲組流感病毒檢出陽性率最高，為14.08%;0～歲年齡組副流感病毒檢出陽性率最高，為9.52%;7～14歲組鼻病毒檢出陽性率最高，為7.81%，其中博卡病毒只在0～歲組有檢出。

表3 不同季節8種呼吸道病毒檢出情況

表4 不同年齡組8種呼吸道病毒檢出情況

2.4 不同性別患兒病毒檢出情況 男童檢出陽性率為34.62%(45/130)，女童檢出陽性率為49.09%(54/110)。經χ2檢驗，性別之間檢出陽性率差異有統計學意義(P＜0.05，表2)。

3 討論

3.1 調查表明，密云區兒童呼吸道病毒檢出陽性率與文獻報道的北京地區兒童呼吸道病毒檢出陽性率基本一致［3］。其中檢出陽性率較高的是流感病毒、副流感病毒和鼻病毒，這與石偉先等［3］、荊紅波等［4］研究結果一致。

3.2 本研究發現，兒童呼吸道病毒檢出存在明顯的季節性，秋季和春季是檢出陽性率較高的季節，這與北京地區春秋寒冷，氣溫晝夜溫差較大，大氣污染有關［5］，李權恒等［6］研究顯示，呼吸道病毒陽性率與空氣質量指數、PM2.5、NO2和SO2等空氣污染物有關。在春季中流感病毒、鼻病毒和人偏肺病毒檢出陽性率高，夏季中副流感病毒檢出陽性率高，秋季中副流感和鼻病毒檢出陽性率高，冬季中流感病毒和呼吸道合胞病毒檢出陽性率高，與有關研究結果一致［7－11］。整體趨勢是冬春季為兒童呼吸道傳染病流行高峰，與既往研究結果一致［11］。對于不同年齡組，呼吸道病毒檢出率無差異，這與有關研究結果不一致［12，13］。流感病毒，副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒和鼻病毒在各年齡組都有檢出，說明各年齡段兒童對呼吸道病毒都易感，因為兒童的抵抗力、免疫力較低，所以應做好兒童呼吸道傳染病防病工作。呼吸道病毒檢出率與也性別有關，女童較男童易感，這與有關報道不同［13，14］，可能與檢測樣本數量有限以及本地區的一些未知因素有關，在以后要增加樣本量并進行多層面的研究分析。

綜上所述，本研究對密云區兒童呼吸道傳染病病毒流行特征有一定的認識。但是由于樣本量較少，也只檢測了病毒類病原，存在一定局限性。此外對于住院患兒也只檢測了上呼吸道樣本，對病毒的檢出勢必存在一定影響，今后應該增加對下呼吸道樣本的采集和分析。

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