胚胎停育患者血清TNF-α和IL-8的表達研究

柳勝賢,王 芳,劉格琳,吳成平

(鄭州大學附屬洛陽中心醫院生殖醫學中心 471009)

胚胎停育是孕早期的一種常見病理現象，它不同于先兆流產，而是孕囊內的受精卵尚未形成胚胎就停止了發育，通俗地說就是胚芽無心管搏動出現了枯萎[1]。胚胎停育不僅對孕婦身心健康造成極大的傷害，同時也給家人、親屬帶來負面影響，加重了社會負擔。造成胚胎停育的因素是多方面的，可能是染色體、內分泌和自身抗體方面出現了問題，也可能是血型不合、病毒感染、生長環境變化而不適合胚胎生長發育。近年來，隨著胚胎停育發生率不斷上升，全面了解胚胎停育的病因，并采取相應的保護措施，在生殖醫學領域具有特殊意義[2]。有研究[3-4]表明，白細胞介素-8(inierleukin-8,IL-8)對早期滋養細胞生長浸潤、胚泡著床及胎盤形成有較大的促進作用，而腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α) 水平升高則對胚胎發育產生較大抑制作用。為進一步了解胚胎停育的發病機制與影響因素，筆者對胚胎停育患者血清中TNF-α和IL-8水平進行了檢測，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2015年1月至2016年12月收治的61例胚胎停育患者為研究組，入選者均符合胚胎停育診斷標準[4]，即有下列4種情形之一：(1)頭臂長度大于或等于7 mm且無胎心；(2)孕囊平均直徑大于或等于25 mm且無胎心；(3)檢查出無卵黃囊的孕囊,14 d后復查未見有胎心的胚胎；(4)檢查出有卵黃囊的孕囊，11 d后仍不見有胎心的胚胎。排除標準：(1)既往有不良妊娠史、精子抗體陰性，性激素及甲狀腺功能檢查和夫婦染色體核型分析出現異常者；(2)停經超過12周及患有子宮畸形、子宮肌瘤及生殖器官急感染等疾病者；(3)合并有嚴重內科疾病及傳染性疾病者。另選同期來本院就診可見胚胎原始心管搏動、既往無不良孕產史的50名正常早孕女性為對照組，兩組對象年齡、孕次、妊娠天數和孕囊直徑比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，詳見表1。本研究經本院醫學倫理委員會批準，受試者均知情同意并簽署知情同意書。

表1 兩組對象臨床資料比較

1.2方法 所有研究對象于入組后次日空腹采集肘靜脈血3 mL，3 000 r/min離心25 min后置于-80 ℃冰箱中待檢。采用微粒子化學發光法檢測血清孕酮，定量測定試劑盒購自威海威高生物科技有限公司[魯食藥監械(準)字2011第2400227號]，嚴格按試劑盒說明進行操作；TNF-α、IL-8采用放射免疫分析技術進行測定，試劑盒購自北京北方生物技術研究所，操作步驟嚴格按照試劑盒操作說明進行。

2 結 果

研究組患者血清孕酮的水平和IL-8水平明顯低于對照組，而TNF-α水平則明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 兩組對象血清TNF-α和IL-8水平比較

3 討 論

所謂胚胎停育指早期胚胎停止生長發育，導致胚胎“消失”，胚胎停育過去稱過期流產或稽留流產，雖然也是典型的妊娠終止，但其病理過程與先兆流產有很大差異[5-6]。導致胚胎停育的原因復雜，除遺傳、解剖、內分泌、環境等因素外，近年來發現，人巨細胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)等病毒感染也極易導致胚胎停育[7]。而TNF-α和IL-8與HCMV感染的發生與擴散有非常密切的關系。

TNF-α既是一種多功能細胞因子，也是一種強有力的誘導劑；它不僅對中性粒細胞具有趨化作用，也對細胞具有吞噬作用，還能促進IL-8的合成及釋放，適量的TNF-α有利于調節滋養層細胞正常增殖、分化和凋亡，這對于懷孕女性能量代謝，提高孕激素及絨毛促性腺激素的合成，繼而植入胎盤、促進胚胎發育，維持妊娠有較大的促進作用[8]。但TNF-α水平過高又會激活促凝血酶原，使胎盤滋養血管素沉積、血栓形成，尤其是激發Th1型免疫反應，排斥胚胎組織[9]。在本研究中，確診為胚胎停育的研究組患者TNF-α平均水平幾乎為對照組的5倍，差異有統計學意義(P<0.01)，這進一步證明，胚胎停育的發生與孕婦體內TNF-α的水平有密切的關聯性，在女性妊娠的初期，體內TNF-α等細胞因子對妊娠的維持可起到極其重要的作用，水平過高或過低都會影響胎盤和胚胎的正常生長[10]。尤其是TNF-α水平超高有利于HCMV的感染及擴散，形成負性調節，加重孕母“免疫抑制”狀態，破壞了機體正常凋亡平衡，影響胚胎的營養吸收和供給，出現胚胎停育[11]。

IL-8是一種受到機體內多種因素調節的炎性細胞因子，在妊娠及女性生殖內分泌、胚泡著床與胚胎生長發育等環節扮演了重要角色[12]。有研究表明，IL-8通過介導體液免疫參與同種異體免疫耐受過程是相當復雜的[13-14]。IL-8能刺激機體β細胞產生抗體及細胞毒性T淋巴細胞分化，增強粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)活性，抑制母體的免疫排斥反應，非常有利于胚泡植入和胚胎生長發育；另一方面，IL-8作為Th2型細胞因子具有抗炎作用，也有利于妊娠。在本研究中，研究組患者外周血中IL-8水平明顯低于對照組(P<0.01)。筆者分析，其中的原因在于IL-8可使Th1/Th2保持平衡，母體對胚胎產生免疫耐受，能保證妊娠進程的延續[15]，而研究組IL-8水平過低，母體免疫系統會對胚胎產生排斥，造成胚胎停育。

孕酮是卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素，給胚胎生長及發育提供支持和保障。有研究[16]表明，滋養細胞中生存素的表達下降通過抑制滋養細胞增殖、分化，胎盤與子宮內膜血管受阻，導致胚胎細胞凋亡，停止發育產生稽留流產，這其中，是否與血清中的IL-8有關還有待于進一步的研究。

總之，導致胚胎停育的因素較多，相關病理也非常復雜，TNF-α水平增高，血清孕酮和IL-8水平降低是否可作為胚胎停育的預測指標還需要進一步進行大樣本研究。本研究結果顯示，胚胎停育患者與正常早孕女性體內孕酮、IL-8和TNF-α的水平相比較差異明顯，可以證實，IL-8和TNF-α作為多效性細胞因子，在維持胚胎正常發育過程中扮演了重要角色，IL-8和TNF-α都可改變孕婦的免疫狀態和細胞因子的表達，通過凋亡異常相互作用影響胚胎正常發育[17]，為今后防治胚胎停育，尋找阻斷免疫因子作用的新療法提供了重要參考。

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