功能性消化不良TRPV1表達和HP感染的關系及意義

王文光 黎云輝

功能性消化不良（FD）是一種最常見的胃腸道疾病，患病率高達30%，臨床特征主要表現為上腹痛﹑上腹脹﹑早飽﹑噯氣﹑食欲不振﹑惡心﹑嘔吐等，進食后胃底容受舒張發生障礙﹑胃竇十二指腸運動協調紊亂﹑內臟高敏等因素均與FD發病有關［1］。目前的研究認為30%～60%的FD患者存在幽門螺桿菌（HP）感染及由此引起的慢性活動性胃炎［2］。辣椒素受體1（TRPV1）是一種傳輸和調節疼痛的感受器，不僅在神經元上有表達，而且在胃腸道黏膜也有分布［3］。最新的研究結果顯示，TRPV1的上調與FD患者內臟高敏感性有關［4］。本文探討TRPV1分別在HP陽性和HP陰性FD患者的變化及臨床意義，現報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2013年8月至2017年4月浙江省紹興市中醫院消化內科收治的168例FD患者為觀察對象，其中男79例，女89例；平均年齡（38.6±5.9）歲，平均病程（2.9±1.3）年。納入標準：（1）FD診斷標準符合羅馬III標準［5］。（2）經13C-尿素呼氣試驗兩項檢測為HP陽性和HP陰性。排除標準：（1）消化性潰瘍﹑反流性食管炎或典型的腸易激綜合征患者。（2）伴隨全身性疾病，如糖尿病或任何惡性腫瘤。（3）嚴重抑郁癥﹑精神病﹑飲食失調﹑甲狀腺功能低下。（4）入組前半個月服用過非甾體抗炎藥﹑抗凝血劑﹑質子泵抑制劑﹑抗菌藥。（5）有胃部手術史。（6）妊娠期患者。168例FD患者中HP陽性患者90例，兩組患者的性別構成比﹑平均年齡﹑平均病程﹑臨床癥狀等一般資料差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究方案經本院倫理學會批準同意，患者均知情同意并簽署知情同意書。同時選擇同期在本院進行健康體檢且13C-尿素呼氣試驗陰性者50例為對照組，入組者無呼吸﹑消化及循環系統疾病，無FD和胃潰瘍癥狀，無近期服藥史。對照組性別構成比和平均年齡與FD-（HP+）組和FD-（HP-）組差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 168例FD患者和對照組均在空腹12h后行電子胃鏡檢查，在內鏡下取胃竇部和胃體部分別取0.3cm×0.3cm大小黏膜組織一塊，生理鹽水沖洗后立刻放入液氮中備用。采用實時熒光定量PCR檢測胃竇部和胃體部黏膜組織中TRPV1基因mRNA的表達，具體過程如下：采用QIAquick RNA Extraction Kit（購自QIAGEN公司，德國）抽提黏膜組織的總RNA，用于cDNA第一鏈的合成（First Strand cDNA synthesis Kit，Takara公司，日本），合成的cDNA第一鏈放于-20℃冰箱保存備用。根據TRPV1基因序列，在Oligo7.5軟件上設計TRPV1基因熒光定量PCR引物，引物序列為：TRPV1F：5'-GAGTTTCAGGCAGACACTGGAA-3'；TRPV1R ：5'-CTATCTCGAGCACTTGCCTCTCT-3'，以GAPDH作為參考基因，引物序列為 ：5'-CGACGTAGTCTCATCTGACTT-3'，5'-GTTGCAGTCGACATAATCGTTGA-3'。 采 用TransStart Green qPCR SuperMix 試劑盒（購于北京全式金有限公司）進行實時熒光定量PCR。在ABI7500分析軟件上分析TRPV1基因及GAPDH基因的Ct值，采用2- Ct法計算TRPV1基因的mRNA水平，采用公式Ct= Ct（TRPV1基因）- Ct（GAPDH基因）。分別采集168例FD患者和對照組空腹靜脈血，采用人胃動素檢測試劑盒（Uscn Life Science Inc）檢測胃動素水平；采用胃泌素檢測試劑盒（購于上海信裕生物科技有限公司）檢測胃泌素水平，采用生長抑素檢測試劑盒檢測生長抑素水平（Uscn Life Science Inc）。

1.3 統計學方法 采用SPSS19.0 統計軟件。計量資料以（）表示，組間比較采用單因素方差分析，兩組間的比較采用t檢驗，相關性采用pearson分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 TRPV1基因mRNA水平﹑胃動素﹑胃泌素和生長抑素比較 見表1。

表1 TRPV1基因mRNA水平、胃動素、胃泌素和生長抑素比較

2.2 TRPV1基因mRNA水平與胃動素﹑胃泌素和生長抑素相關性分析 TRPV1基因mRNA水平與胃動素及胃泌素均呈明顯負相關，與生長抑素水平呈明顯正相關，差異均具有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 TRPV1基因mRNA水平與胃動素、胃泌素和生長抑素相關性分析

3 討論

在目前已被鑒定的20多個瞬時受體電位中TRPV1被認為是調節疼痛的一個重要的集中點，TRPV1是一種化學感受器，可由各種香料衍生的植物化學物質激活，也可由低PH（＜6）﹑熱和血清素﹑緩激肽和三磷腺苷等炎癥介質激活［6］。消化不良的患者常顯示低痛閾，胃腸道的任何引起疼痛或傳輸疼痛的部分都可能增強FD。研究顯示TRPV1的活化可導致人體消化道疼痛和痛覺過敏［6］。藥理研究結果顯示TRPV1在食管黏膜﹑胃竇G細胞和胃壁細胞中均有表達［7］，近期的研究結果表明FD患者TRPV1在食管下段﹑胃竇部﹑十二指腸部黏膜的表達均明顯高于正常人［4］。本資料結果提示TRPV1在FD患者中呈高水平表達。內臟高敏性是FD發病的一個因素，有文獻指出TRPV1受體的活化可引起擴血管物質降鈣素基因相關肽和P物質等神經遞質的釋放，從而參與內臟高敏性的形成，所以FD患者TRPV1受體的表達水平增加可能與其內臟高敏感有關［4］。

HP是消化道疾病的主要致病菌，HP感染后可導致胃酸分泌增多，誘發胃部炎癥反應，造成胃黏膜的破壞。HP感染被認為是FD的致病因素之一。本資料中對HP陽性和HP陰性FD患者中TRPV1的mRNA水平進行檢測，結果顯示TRPV1在HP陽性FD患者的表達水平高于HP陰性FD患者，提示HP感染可誘發其TRPV1基因表達的增加，通過上調TRPV1的表達促進FD的發生和發展。

FD的發病與胃動力障礙也存在密切的關系，胃動素﹑胃泌素和生長抑素水平的檢測常作為FD治療后臨床療效評價的客觀指標之一，三者與FD的癥狀密切相關。本資料進一步分析TRPV1基因mRNA水平與這三者的相關性，結果顯示TRPV1基因mRNA水平與胃動素及胃泌素均呈明顯負相關，與生長抑素水平呈明顯正相關，進一步提示TRPV1基因高表達與FD有關。

綜上所述，TRPV1在FD患者中呈高水平表達，且HP感染可誘發FD患者TRPV1基因表達的增加，提示抗HP治療對HP陽性的FD患者有益。

［1］ 張聲生,李曉玲．功能性消化不良的中西醫研究進展．首都醫科大學學報,2015,36(4):649-653．

［2］ Suzuki H,Moayyedi P．Helicobacter pylori infection in functional dyspepsia．Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology, 2013,10(3): 168．

［3］ Liao M,Cao E,Julius D,et al．Structure of the TRPV1 ion channel determined by electron cryo-microscopy．Nature, 2013, 504(7478):107-12．

［4］ 史孝敏,彭燕．辣椒素受體1在功能性消化不良上消化道中的表達及其意義．胃腸病學,2016,21(7):414-418．

［5］ Tack J,Talley NJ．Functional dyspepsia--symptoms,definitions and validity of the Rome III criteria．Nature Reviews Gastroenterology& Hepatology,2013,10(3):134．

［6］ Fernandes ES,Fernandes MA,Keeble JE．The functions of TRPA1 and TRPV1: moving away from sensory nerves．British Journal of Pharmacology,2012,166(2):510．

［7］ 胡容,彭燕．辣椒素及TRPV1與功能性消化不良．中國中西醫結合消化雜志,2015,23(4):295-298．