馬蓮種皮有效成分的提取及黃酮含量的測定

馬小虎，丁潤梅

（寧夏醫科大學基礎醫學院，寧夏銀川 750004）

馬蓮又名馬藺，是鳶尾科鳶尾屬多年生草本植物，生長于荒地、路旁、天然草地，尤以過度放牧的鹽堿化草場上較多，分布于中國內蒙古、寧夏、青海、西藏等20多個省區[1]。由于其耐旱、耐鹽堿等特點，在綠化、水土保持、醫藥等方面具有一定的開發潛力[2]。馬蓮的根、花和種子均可入藥[3，4]。其中馬蓮種子呈不規則卵形的多面體，種子入藥稱馬藺子，有抑癌作用。馬藺子甲素是從馬藺種皮分離得到的化合物，能涼血、止血、清熱利濕，主治骨結核、淋巴結核，還可作口服避孕藥[5-7]。

馬蓮根系發達，綠期長，花色高貴幽雅，綠地建植景觀效果良好，近年來逐漸被用作缺水城市綠化、護坡固沙、鹽堿地改良、園林綠化和西部植被恢復，馬蓮全株都具有藥用價值。本文采用索氏提取法對馬蓮種皮總黃酮進行提取并測定，旨在為馬蓮子的藥用價值和保健功能的研究及資源開發上提供理論依據及檢測手段。

1 材料與方法

多余的醇液，轉100 mL容量瓶中，以同濃度的乙醇定容，搖勻，提取3次，溶液待用。

1.2.4 樣品的測定 精密吸取1.00 mL樣品提取液至50 mL容量瓶中，按照1.2.2中NaNO2-Al（NO）3-NaOH比色法，用同濃度乙醇定容至刻度，搖勻，用紫外分光光度計在510 nm處，以0 mL管為對照，測定吸光度，平行3次，取其平均值。計算公式如下：

1.1 試驗儀器與試劑

電熱恒溫鼓風干燥箱（101-4-S，上海躍進醫療器械廠）；紫外分光光度計（UV-1600，上海美譜達儀器有限公司）；KDM型調溫電熱套（山東省鄄城匯鑫科技有限公司）；萬分之一電子分析天平（AEU-210，日本島津）；索氏提取儀（瑞爾）。

馬蓮種皮；蘆丁標準品（92.5%）（中國藥品生物制品檢定所）；無水乙醇、NaNO2、Al（NO）3、NaOH均為分析純（天津市科密歐化學試劑有限公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 試劑的配制

（1）蘆丁標準品溶液的配制：精密稱取蘆丁標準品10.00 mg，用60%乙醇溶解，完全轉入50 mL容量瓶中，用同濃度的乙醇定容至刻度，搖勻，配制成濃度為0.2 mg/mL的蘆丁標準儲備液。

（2）5%NaNO2溶液的配制：精密稱取2.50 g NaNO2置于500 mL容量瓶中，用蒸餾水定容，配制成5%NaNO2溶液。

（3）10%Al（NO）3溶液的配制：精密稱取5.00 g Al（NO）3置于500 mL容量瓶中，用蒸餾水定容，配制成10%Al（NO）3溶液。

（4）4%NaOH溶液的配制：精密稱取2.00 gNaOH置于50 mL容量瓶中，用蒸餾水定容，配制成4%NaOH溶液。

1.2.2 蘆丁標準曲線的繪制 精密吸取上述蘆丁標準儲備液 0 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，分別置于25 mL容量瓶中，依次5%NaNO21.25 mL，混勻放置5 min，加入10%Al（NO）3125 mL，搖勻放置6 min，加入4%NaOH 7.5 mL，加同濃度乙醇定容至刻度，搖勻，靜置10 min后，用紫外分光光度計在510 nm波長處，以未加蘆丁儲備液的顯色試劑乙醇溶液作為空白，在510 nm處測定其吸光度值。

1.2.3 樣品的提取 取馬蓮種皮洗凈烘干，研磨粉碎，過40目篩，各稱取5.0 g置于索氏提取裝置中，以不同濃度的乙醇為溶劑，回流。所得提取液減壓蒸餾，除去

式中：C-由標準曲線計算出的稀釋后提取液中總黃酮濃度；50-稀釋倍數；0.1-樣品提取液體積，L；5-樣品粉末質量，g。

2 結果與分析

2.1 蘆丁標準曲線

以蘆丁質量濃度（mg/mL）為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線（見圖1），所得的回歸方程為y=11.745x-0.018 3，R2=0.999 8。

圖1 蘆丁標準曲線Fig.1 Rutin standard curve

2.2 黃酮含量

采用 L9（34）正交試驗設計，考查料液比、提取時間、濃度3個因素對馬蓮種皮提取物的黃酮提取效果。正交試驗因素與水平（見表1、表2）。

表1 正交試驗因素與水平Tab.1 Factors and levels of orthogonal experiment

由表2可知，正交試驗不同條件下提取黃酮含量有一定的差別。最佳提取條件組合為A1+B3+C3，即提取馬蓮種皮中的最佳工藝條件為料液比1∶15，提取時間5 h，乙醇濃度70%。

表2 馬蓮種皮提取物正交試驗結果Tab.2 Orthogonal experimental results of Marlene seed coat

3 結論

黃酮類物質具有很多有益的藥理作用和生理功能，對于提高免疫力、降脂、降壓、抗衰老、治療心腦血管疾病都有一定的作用。本試驗采用索氏提取法以乙醇為提取劑提取馬蓮種皮中的總黃酮，并以蘆丁為標準品，通過分光光度法在510 nm處測定提取液中黃酮的含量并利用正交試驗優化馬蓮種皮中的有效成分提取。結果表明最優工藝條件為：提取劑70%乙醇，提取時間5 h，料液比1:15，此時馬蓮種皮中黃酮的含量最高。

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