宮頸癌前病變或HPV陽性危險因素流行病學調查研究

張珊珊 丁妹

[摘要]目的 觀察HPV在宮頸癌前病變組與宮頸癌組中的感染情況，探討不同HPV亞型與宮頸癌前病變及宮頸癌的相關性。方法 選取2015年1月～2016年11月我院救治的101 134例患者，依據病理結果將篩選的患者分成三組：宮頸癌組（n=19 368例）、宮頸癌前病變組（n=36 361例）和宮頸炎組（n=45 405例）。經HPV陽性情況檢測、HPV-DNA 亞型檢測，計算各組患者的HPV陽性感染率。結果 在HPV陽性感染病例中，宮頸炎組的HPV 檢測陽性率顯著低于宮頸癌前病變組（χ2=43.21，P<0.05），宮頸癌前病變組的HPV陽性感染率顯著高于宮頸癌組（χ2=53.21，P<0.05），在統計學上有顯著性差異。宮頸癌組以HPV16型、HPV18型感染（分別為49.97%、41.12%）為主要亞型。宮頸癌前病變組中的CINⅠ患者中的HPV52型、HPV33型及HPV16型感染（分別為35.33%、12.50%及19.63%）為主要亞型；CINⅡ患者中的HPV58型、HPV18型及HPV16型感染（分別為25.64%、23.14%及16.25%）為主要亞型；CINⅢ患者中的HPV58型、HPV52型及HPV16型感染（分別為18.82%、18.59%及36.90%）為主要亞型。宮頸癌組均是單一感染，無二重感染、三重及多重感染；宮頸癌前病變組CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ二重感染發生率顯著高于三重及多重感染率。結論 宮頸癌前病變組中感染率的主要HPV亞型有HPV16、18、52及58型，其中宮頸癌組中感染的兩種HPV亞型是：HPV18、HPV16，并且就多重感染率而言，宮頸癌前病變組比宮頸癌組高。HPV檢測對宮頸疾病的防治具有較高的有效性，可以幫助患者了解和提前預防宮頸病變，對于疾病的預防，控制以及預后評價具有重大意義。

[關鍵詞]宮頸癌前病變；HPV；流行病學

[中圖分類號] R737 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）4（a）-0101-04

Epidemiological research on the risk factors of cervical precancerous lesions or HPV positivity

ZHANG Shan-shan DING Mei

Center of Physical Examination，Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Hospital in Guangzhou City of Guangdong Province，Guangzhou 510800， China

[Abstract]Objective To observe the infection of HPV in cervical precancerous lesion group and cervical cancer group in order to explore the correlation between different subtypes of HPV and cervical precancerous lesions as well as cervical cancer.Methods A total of 101 134 patients treated in our hospital from January 2015 to November 2016 were selected as research objects.According to the pathological results，they were divided into three groups：cervical cancer group（n=19 368），cervical precancerous lesion group（n=36 361）， and cervicitis group（n=45 405）.The positivity rate of HPV was calculated after HPV test and HPV-DNA subtype detection.Results Among HPV positive infection cases，the positivity rate of HPV in the cervicitis group was significantly lower than that of the cervical precancerous group（χ2=43.21，P<0.05），and the positivity rate of HPV in the cervical precancerous lesion group was greatly higher compared with that in the cervical cancer group（χ2=53.21，P<0.05）， which were displayed statisticaldifferences.The main subtypes in the cervical cancer group were infection of HPV16 and HPV18 accounting for 49.97% and 41.12%， respectively.For CINⅠpatients in the cervical precancerous lesion group，the infection of HPV52，HPV33，and HPV16 were the main subtypes accounting for 35.33%，12.50%， and 19.63%，accordingly.For CINⅡ patients in the cervical precancerous lesion group，the infection of HPV58，HPV18，and HPV16 were the main subtypes，25.64%，23.14%，and 16.25% accordingly.For patients with CINⅢ in the cervical precancerous lesion group， the infection of HPV58，HPV52，and HPV16 were the main subtypes accounting for 18.82%，18.59%，and 36.90%.In the cervical cancer group，participants were only presented with single infection，withoutdouble，triple or multiple infection.In the cervical precancerous lesion group，double infection rates in CIN，CIN，and CINⅢ patients were significantly higher than those in triple and multiple infection.Conclusion In the cervical precancerous lesion group， the main subtypes of HPV infection are HPV 16，HPV 18，HPV 52，and HPV 58.In the cervical cancer group， the two main subtypes of HPV infection are HPV 18 and HPV 16.On multiple infection rate，the cervical precancerous lesion group was higher compared with that in the cervical cancer group.HPV detection has a higher effectiveness in the prevention and treatment of cervical diseases，which can help patients understand and prevent cervical lesions in advance.It is of great significance on the disease prevention， control and prognosis evaluation.

[Key words]Cervical precancerous lesion；HPV；Epidemiology

在常見的女性惡性腫瘤之中，宮頸癌是導致女性癌癥中高死亡率的重要因素之一[1-2]。近年來，在全球不同發展水平的國家中，宮頸癌死亡率都有回彈上升的趨勢。大量的流行病學研究也表明[3-5]，宮頸癌及癌前病變的主要發病原因之一是HPV感染。并且目前也已經證實，HPV存在有多種亞型。據報道，并非感染了HPV就一定會有相應癥狀，只有持續性的感染HPV，才能最終導致宮頸癌的發生，通過HPV的檢測可以提前對早期宮頸疾病進行篩查。本課題研究對象是在我院治療的宮頸病變患者，從他們中篩選符合條件的進行檢測。根據檢測結果不同采取相應的治療措施，之后再對其預后情況跟蹤。目的是觀察宮頸癌前病變與人乳頭瘤病毒陽性感染之間的相關性，為預測宮頸癌提供一些參考價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月～2016年11月我院宮頸病變門診收治的101134病例患者，年齡30～65歲，平均 （46.25±5.62）歲。以最終病理檢查結果為依據，并符合國際癌癥協會修訂的《TBS分類法》診斷標準[6]。依據病理結果將篩選的患者分成三組：宮頸癌組（n=19 368例）、宮頸癌前病變組（n=36 361例）和宮頸炎組（n=45 405例）。宮頸癌組：平均年齡（45.13±5.21）歲；病程1～4年，平均（3.05±0.27）年。宮頸癌前病變組：平均年齡（41.12±4.65）歲；病程1～3 年，平均（2.61±0.42）年。宮頸炎組：平均年齡（42.06±5.68）歲；病程1～4年，平均（2.66±0.56）年。三組患者的一般資料差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

入組患者的篩選條件如下：無血緣關系；只有單一性伴侶；非煙民；未做過宮頸方面手術；每個患者簽署知情同意書；非孕婦；且1周內無性生活；最近沒做過陰道用藥（含陰道沖洗）；無其他合并性疾病，如肝腎臟器功能不全；之前未患過免疫系統方面的疾病；無器官移植手術史，無慢性消耗性疾病；如果是宮頸癌患者，之前未采用免疫治療、放化療；篩選患者的常見癥狀：白帶增多、瘙癢、性交后出血、陰道出血等。

1.2 HPV-DNA樣品的采集與檢測方法

醫生以截石位取樣，對外陰及宮頸外口進行相應消毒處理，由固定醫師將宮頸取樣器輕輕插入宮頸管，抵達宮頸內口后停留10 s，逆時針或者順時針旋轉 5圈后取出取樣器，然后立即放于小試管中，試管內含專利保護劑。之后封蓋處理，將樣品馬上低溫保存，需在15 d之內檢測，在取樣過程中一定注意樣品標本的取樣量足夠。

1.2.1 HPV 陽性情況檢測 取宮頸組織，采用甲醛固定，常規石蠟包埋。之后常規脫蠟至水、微波抗原修復；加1∶100 HPV第一抗體，并用預吸收的HPV 抗體以及正常羊血清作為陰性對照組，37℃孵育過夜，采用PBS洗5 min×3次；而后加入HRP 標記的抗山羊第二抗體，37℃孵育1～2 h；PBS洗10 min×3次。

1.2.2 HPV亞型情況檢測 取宮頸組織標本，用液氮（4℃）保存；檢測的時候取出50 mg組織，參考試劑盒上的說明書操作：①提取宮頸組織的DNA；②采用加熱法將其分解為單鏈核苷酸即擴增PCR；③RNA與DNA的一條單鏈的雜交。

1.3 觀察指標及評價標準

以顯色反應作為判定方法，有清楚藍紫色圓點說明是陽性，反之為陰性。檢測的HPV亞型（包括16、18、31、33、35、39、51、52、53、56、58、59、66、68）。

1.4統計學方法

試驗中的數據采用SPSS17.0軟件分析，以χ2進行檢驗，以四分位和中位數間距（Q75～Q25）計量資料表示HPV陽性感染率的分布情況，以P<0.05表示差異上有統計學意義。

2結果

2.1 三組患者的HPV檢出情況

宮頸炎組的HPV檢測陽性率為14.12%，顯著低于宮頸癌前病變組陽性率為55.46%（χ2=43.21，P<0.05），此外，宮頸癌前病變組陽性率，宮頸癌前病變組的HPV陽性感染率（55.46%）顯著高于宮頸癌組（88.32%），差異有統計學意義（χ2=53.21，P<0.05）。

2.2宮頸癌及宮頸癌前病變組的HPV亞型分布情況

在宮頸癌前病變組中，CINⅠ患者感染的主要亞型是HPV52、HPV33、HPV16；CINⅡ患者感染率的主要亞型是HPV58、HPV18、HPV16；CINⅢ患者中感染的主要亞型是HPV58、HPV52、HPV16。在宮頸癌患者中，感染的主要亞型是HPV18和HPV16（表1）。

2.3宮頸癌前病變組與宮頸癌組HPV多重感染情況

宮頸癌組中無二重感染、三重感染及多重感染，宮頸癌組均是單一感染；宮頸癌前病變組二重感染發生率顯著高于三重及多重感染率（P<0.05）（表2）。

3討論

宮頸癌的病程發展比較緩慢，該病是常見的一種女性惡性腫瘤，在全世界各類發展水平的國家都如此，死亡率>50%[7-8]。該病的發病機制，主要是宮頸內的上皮發生了瘤變。根據瘤變的程度不同分為三級：CINⅢ、CINⅡ、CINⅠ，這三種級別宮頸癌前病變都有可能發展成宮頸癌。級別越大，致癌率也越大[9-12]。

國內外研究表明[13-16]，持續性的HPV感染是該病的致病因素之一，尤其是高危型HPV感染，和癌變密切相關。HPV是一種閉環DNA病毒，有特異雙鏈[17]。人體容易收到侵襲的部位是：皮膚、口腔黏膜、外陰生殖道等。在臨床調查上，關于HPV感染的資料很多，均能證明HPV感染與宮頸病變有密切的關系。根據序列不同[19-20]，HPV可以分為200多種，對人致病的有40多種，30多種和生殖道癌變密切相關。HPV感染在宮頸癌病變上以單一感染為主，最常見的是HPV16和HPV31，但是并非都是單一感染，部分患者有多重感染情況。在宮頸癌患者中，更多是單一感染情形。本研究結果證明，宮頸癌變可能性和HPV 感染呈正相關，本課題研究結果也和所檢索的文獻中試驗結果一致。有研究證實，在該病的發病方面，HPV感染是必要致病因子。不過近年較新的研究證實，并不是所有的感染了HPV 的患者都會發展成宮頸癌。對多數的婦女來說，即使感染了HPV，可能也會自行消失。這其中，只有7%左右的患者發現成為持續感染，最終可能為宮頸癌變的比例是25%左右[21]。

宮頸癌前病變并不是一定會發展為宮頸癌，部分患者即使不進行治療也會自動痊愈，但是發展為宮頸癌的可能還是存在的，所以在宮頸癌前病變早期進行干預，對于防治宮頸癌的發生和發展有一定價值。一方面，保持良好心態，積極和醫生配合，進行HPV感染治療，這對于宮頸癌前病變的防治有重要意義。另外，藥物干預方面，美國已研制出宮頸癌預防性疫苗，可以對癌前病變進行針對性的干預。因此，通過HPV檢測的方法對廣大婦女人群進行宮頸疾病的檢驗，對宮頸疾病方面的預防、控制及隨訪、預后評價有重要意義。

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（收稿日期：2017-10-11 本文編輯：白 婧）