補腎強督祛濕法治療腎虛督寒型強直性脊柱炎療效及對MMP-9、TIMP-1水平的影響

李遠峰，宋寒冰，徐煒明，張大鵬，姜益常

(黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院，黑龍江 哈爾濱 150040)

強直性脊柱炎(AS)又名Marie-strümpell病、Von Bechterew病，是一種自身免疫系統疾病，多發于青少年男性，在中國的發病率約為0.25%[1]。該病屬于西醫風濕疾病范疇，首先侵犯骶髂關節，而后逐漸沿脊柱上行并可發展到頸椎，早期癥狀可有骶髂關節酸痛感、僵硬，活動后可改善，病情逐漸發展，可出現脊柱骨質破壞，引起脊柱段活動受限和畸形，導致脊柱強直僵硬，嚴重影響患者的生活質量[2-3]。目前西醫臨床上多采用非甾體抗炎藥、糖皮質激素及生物制劑等治療本病，但長期應用這些藥物產生的不良反應和生物制劑昂貴的價格往往令患者難以接受。尋求中醫中藥治療AS一直是人們研究的熱點且深受患者青睞。本研究觀察比較了補腎強督法治療方案與洛索洛芬鈉片治療AS的療效及對血清基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)、組織金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)水平的影響，旨在探討補腎強督法治療AS的相關作用機制。

1 臨床資料

1.1一般資料 選擇2016年1月—2017年1月在黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院骨三科門診確診為腎虛督寒型AS患者80例，中醫診斷標準參照《中藥新藥治療強直性脊柱炎的臨床研究指導原則》[4]。排除哺乳期婦女及妊娠者，其他血清陰性脊柱關節病者，嚴重脊柱關節畸形者，發病前2個月使用過非甾體抗炎藥物者，酗酒或精神障礙者。將患者隨機分為2組：中藥組40例，男32例,女6例；年齡15～37(26.61±10.3)歲。西藥組40例，男31例，女9例；年齡14～38(25.61±10.2)歲。2組性別、年齡比較差異均無統計學意義(P均>0.05) 。

1.2治療方法 中藥組:采用自擬補腎強督祛濕湯治療。藥物組成:鹿角膠10 g、附子10 g(先煎)、金毛狗脊30 g、桑寄生30 g、葛根30 g、白芍30 g、茯苓25 g、生甘草10 g、青風藤30 g、威靈仙15 g，以上藥由本院統一煎制，每日1劑，每煎取汁150 mL，早、晚2次分服。西藥組:洛索洛芬鈉片(商品名：樂松，上海第一三共制藥有限公司生產，國藥準字H20030769，60 mg/片)口服，每次1片，每日3次。2組均以3個月為1個療程,均治療觀察1個療程。

1.3觀察項目

1.3.1血清及上清中MMP-9 、TIMP-1水平 分別于治療前及治療3個月末采集2組患者晨空腹外周肘靜脈血10 mL，在3 000 r/min下離心25 min，分離血清及上清，保存在1mL Eppendorf 管內，超低溫(-80 ℃)冷凍。采用雙抗體夾心ELISA法檢測，人MMP-9 ELISA試劑盒購自大連泛邦化工技術開發有限公司；人TIMP-1 ELISA試劑盒購自北京冬歌博業生物科技有限公司按照說明書進行操作。

1.3.2血清C反應蛋白(CRP)水平及血沉(ESR)分別于治療前及治療3個月末采集2組患者晨空腹外周肘靜脈血，采用ELISA法檢測CRP水平，采用魏氏法檢測ESR。

1.3.3中醫證候評分 分別于治療前及治療3個月末對2組患者主癥(腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛、四肢關節冷痛)和次癥(四末不溫、口不渴、大便溏泄)進行評分，其中主癥按照輕重程度分級量化給予0分、2分、4分、6分，次癥按照輕重程度分級量化給予0分、1分、2分、3分，評分越高提示癥狀越重[5]。

1.3.4臨床療效 參照《中藥新藥治療強直性脊柱炎的臨床研究指導原則》[4]擬定療效評價標準。近期控制：治療3個月主癥、次癥消失，病情控制；顯效：治療3個月主癥、次癥改善≥2/3，病情穩定；有效：治療3個月主癥、次癥改善≥1/3；無效：治療3個月主癥、次癥改善<1/3，且不穩定。

1.3.5不良反應 治療過程中觀察2組不良反應發生情況。

2 結 果

2.12組治療前后血清MMP-9、TIMP-1水平比較 治療前2組血清MMP-9、TIMP-1水平比較差異均無統計學意義(P均>0.05)；治療后2組血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯降低(P均<0.05)，且中藥組血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯低于西藥組(P均<0.05)。見表1。

2.22組治療前后上清中MMP-9、TIMP-1水平比較 治療前2組上清中MMP-9、TIMP-1水平比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。治療后中藥組上清中MMP-9水平明顯低于治療前及西藥組(P均<0.05)， TIMP-1水平有下降趨勢，但與治療前比較差異無統計學意義(P>0.05)；西藥組上清中MMP-9、TIMP-1水平與治療前比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。見表2。

表1 2組治療前后血清MMP-9、TIMP-1水平比較

注：①與治療前比較，P<0.05；②與西藥組比較，P<0.05。

表2 2組治療前后上清中MMP-9、TIMP-1水平比較

注：①與治療前比較，P<0.05；②與西藥組比較，P<0.05。

2.32組治療前后血清CRP水平及ESR比較 治療后2組血清CRP水平及ESR均明顯降低(P均<0.05)，但2組間比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。見表3。

表3 2組治療前后血清CRP水平及ESR比較

注：①與治療前比較，P<0.05。

2.42組治療前后中醫證候評分比較 治療后中藥組腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛、四肢關節冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯降低(P均<0.05)，西藥組僅腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛評分明顯降低(P均<0.05)，且中藥組四肢關節冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯低于西藥組(P均<0.05)。見表4。

表4 2組治療前后中醫證候評分比較分)

注：①與治療前比較，P<0.05；②與西藥組比較，P<0.05。

2.52組臨床療效比較 中藥組控顯率明顯高于西藥組(P<0.05)，2組總有效率比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表5。

表5 2組臨床療效比較

注：①與西藥組比較，P<0.05。

2.62組不良反應發生情況 中藥組有8例服藥后出現輕微腹瀉不適感，囑其飯后服用，不良反應消失，不良反應發生率為20.0%；西藥組出現惡心13例，腹瀉3例，肝功能異常1例，采取停藥及對癥處理后消失，不良反應發生率為42.5%。中藥組不良反應發生率明顯低于西藥組(P<0.05)。

3 討 論

AS是一種慢性炎性疾病，其發病機制復雜，與遺傳、感染、免疫、理化等因素有關[6]。中醫學認為該病屬“痹證”范疇，屬于“脊痹”，癥狀為兩胯活動受限， 嚴重者脊柱彎曲變形，甚至強直僵硬；或背部酸痛、肌肉僵硬沉重感， 陰雨天及勞累加劇[7-8]。治療法則為補腎強督、扶正祛邪[9]。補腎強督祛濕法組方是本院經驗方，方中金毛狗脊補腎通督強腰，附子、桑寄生祛風除濕,補腎強筋；葛根發散風寒；白芍緩急柔肝止痛；青風藤、威靈仙、茯苓祛風除濕，通絡止痛；鹿角膠引諸藥入督脈；生甘草緩急止痛，調和諸藥。全方共奏散寒除濕、補腎強督之功。

現代研究發現，基質金屬蛋白酶(MMPs)是體內主要的蛋白水解酶家族之一，對組織重構起著重要作用[10]。MMPs介導的基質降解涉及多種疾病過程，例如動脈硬化、血管重構、腫瘤轉移及免疫炎癥引起的關節和軟骨的破壞。以往研究認為MMP-9與AS疾病活動度有關，可能是由于AS患者體內炎癥刺激產生大量MMP-9，進而可降解明膠及存在于軟骨中的其他膠原，從而破壞滑膜組織中破骨細胞進而造成軟骨損傷，為疾病活動的有用標記物，可能是參與AS疾病活動和炎性骨破壞的重要因素[11]。組織金屬蛋白酶抑制劑(TIMPs)是一組低分子量蛋白，在體內分布廣泛，正常情況下，MMPs與TIMPs保持相對平衡，這種平衡在組織修復中發揮著重要意義[12]。AS活動期時MMPs與 TIMPs 表達均上調，二者之間平衡被打破，導致細胞外基質(ECM)過度降解，促進其侵襲擴散，影響患者預后[13]。

本研究結果顯示，治療后中藥組血清MMP-9、TIMP-1水平均明顯低于西藥組；中藥組上清中MMP-9水平和腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛、四肢關節冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯降低，西藥組僅腰骶臀胯僵痛、頸項脊背僵緊疼痛評分明顯降低，且中藥組上清中MMP-9水平和四肢關節冷痛、四末不溫、口不渴、大便溏泄評分均明顯低于西藥組；中藥組控顯率明顯高于西藥組，不良反應發生率明顯低于西藥組。提示補腎強督祛濕法治療AS療效更好，可明顯改善患者相關癥狀，可能與明顯下調MMP-9、TIMP-1水平有關。

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