HPLC法測定富馬酸喹硫平緩釋片有關物質

（上海交通大學藥學院 上海 200240）

胡小雪 郭圣榮（通訊作者）

1.儀器與試藥

Waters 2695 HPLC system/ Empower 3 software；

甲醇、乙腈、磷酸氫二鉀均為色譜純，磷酸、鹽酸、氫氧化鈉、過氧化氫均為分析純；

富馬酸喹硫平系統適應性對照品；富馬酸喹硫平對照品；富馬酸喹硫平API；富馬酸喹硫平緩釋片。

2.方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱 Inertsil ODS-2 C8-3（4.6mm×150mm，5μm）；以甲醇-乙腈（33∶67）為流動相A，以0.01mol·L-1磷酸氫二鉀溶液（用磷酸調節pH值至6.5）-流動相A（90∶10）為流動相B，流速為1.0mL·min-1，線性梯度洗脫程序見表1；檢測波長為225nm；柱溫為40℃；進樣體積為20μL。

表1 HPLC法測定富馬酸喹硫平緩釋片有關物質線性洗脫程序

2.2 溶液的制備

2.2.1 稀釋液：流動相A-流動相B（50∶50）。

2.2.2 供試品溶液：精密稱取富馬酸喹硫平緩釋片研磨的細粉適量（相當于喹硫平25mg）于100mL量瓶，加入稀釋液超聲10分鐘，再加入稀釋液至刻度，混勻后過濾即可。

2.2.3 對照品溶液：精密稱取富馬酸喹硫平對照品適量（相當于喹硫平25mg）于100mL量瓶中，加稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密移取5.0mL于100mL量瓶中，加稀釋液至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密移取該儲備液2.0mL于50mL量瓶中，加稀釋液至刻度，搖勻即可。

2.2.4 系統適用性溶液：精密稱取富馬酸喹硫平系統適用性對照品約10mg于50mL量瓶中，加稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

2.3 系統適用性試驗與方法專屬性考察

2.3.1 系統適用性試驗 取稀釋液、空白輔料溶液、系統適用性溶液、對照品溶液及樣品溶液注入液相色譜儀進行測定。結果表明，稀釋液和空白輔料溶液在喹硫平及已知雜質保留時間處無色譜峰檢出，系統適應性溶液中喹硫平峰的拖尾因子小于1.5，喹硫平與相鄰雜質的分離度為大于2，系統適應性符合要求。

2.3.2 強制破壞試驗 取富馬酸喹硫平緩釋片、制備該片劑的原料藥及其空白輔料，分別進行如下處理：（1）加入稀釋液適量，超聲，加入1N鹽酸溶液5mL，于80℃條件下放置24小時，堿中和；（2）加入稀釋液適量，超聲，加入2N氫氧化鈉溶液5mL，于80℃條件下放置24小時，酸中和；（3）加入5mL3% H2O2溶液，于室溫下放置0.5小時；（4）高溫破壞（105℃，24小時）；（5）高濕破壞（92.5%RH，10天）；（6）光照破壞（4500±500 Lux，10天）。按照“2.2.2”項下供試品溶液的配制方法配制溶液并進行測定。

結果顯示，空白輔料經酸、堿、氧化、高溫、高濕及光照破壞后均未產生對主成分及其雜質測定有影響的色譜峰；原料藥及制劑破壞實驗結果基本一致，經堿、高濕和光照破壞后未產生雜質，但經酸、氧化及高溫破壞后，均產生少量降解產物，說明本品對酸、氧化及高溫均不穩定，對堿、高濕和光照穩定。降解后的產物與主成分峰均能達到有效分離，且各雜質之間分離情況良好，主峰純度均達到1.000。

以上實驗結果證明，該色譜條件專屬性強，適合本品有關物質的檢查。

2.4 方法精密度

取本品的細粉適量（約相當于喹硫平25mg），照“2.2.2”項下供試品溶液制備方法，平行制備6份。精密量取10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算6份樣品中喹硫平的含量的相對標準偏差（RSD）。

結果6份樣品中喹硫平含量的RSD為2.7%，由此表明該方法精密度良好。

2.5 溶液穩定性

將富馬酸喹硫平對照品溶液和樣品溶液在室溫條件下放置，并在第0d、1d、2d、4d分別取樣進行測定，記錄色譜圖，結果見表2和表3。

表2 樣品溶液穩定性試驗結果

表3 對照品溶液穩定性試驗結果

由上述結果可見，對照品溶液和樣品溶液在放置4天內測得的主峰峰面積無明顯變化，樣品溶液中最大單雜及總雜量也無明顯變化，表明該對照品溶液和樣品溶液穩定性良好。

3.討論

對USP monograph[3]的流動相進行調整，將有機相的乙腈換為乙腈與甲醇的混合，這樣可降低流體的粘度，減輕柱壓對柱子的損耗，同時調整了緩沖鹽的pH值，優化梯度，最終使各雜質均達到了理想的分離效果。

4.結論

富馬酸喹硫平緩釋片在新版藥典（2015版）中無有關物質檢查方法，經驗證，本測定方法簡便、準確、專屬性強、重現性好，可用于富馬酸喹硫平緩釋片中有關物質的測定。

[1]戴婕,李芳芳.富馬酸喹硫平片人體生物等效性研究[J].中國現代應用藥學,2013,30（6）：641.

[2]中國藥典2015年版.正文：富馬酸喹硫平.