HPV-DNA聯合腫瘤標志物檢測合并陰道鏡檢查對宮頸癌的診斷價值

牛志瑩　岳　磊

宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤，在我國的發病率和死亡率較高，每年約有3萬以上(約占世界30%)女性死于該病[1]。宮頸癌的發病過程較為漫長，從子宮頸上皮瘤變到出現原位癌、早期癌和浸潤癌需要10～20年時間。因此，盡早發現病變則可以有效預防宮頸癌[2]。但宮頸癌的早期臨床癥狀并不明顯，檢查時易發生漏診、誤診。目前，用于宮頸癌的診斷方法有腫瘤標志物檢測、HPV-DNA檢測和陰道鏡檢查等[3]。為提高早期宮頸癌的早期篩查率，本研究探討了HPV-DNA檢測聯合腫瘤標志物并陰道鏡檢查在宮頸癌診斷中的價值。具體報告如下。

1　資料與方法

1.1　一般資料

以2012年7月至2017年6月于我院就診的180例疑似宮頸癌患者為研究對象。年齡26～65歲，平均(38.2±8.4)歲。排除免疫系統疾病或內科慢性疾病并發癥者。研究經患者及其家屬知情并簽署同意書，并獲醫院醫學倫理委員會批準。

1.2　檢測方法

所有患者均行腫瘤標志物檢查、HPV-DNA基因分型檢查、陰道鏡檢查及病理學檢查。聯合檢查以其中一種達到陽性標準則判定為陽性。以病理檢查為金標準。

腫瘤標志物檢測：抽取患者空腹靜脈血3 ml，4 000 r/min離心3 min，取上清液，于-30 ℃下保存待測。采用電化學發光法檢測鱗狀細胞癌抗原(SCC)、糖類抗原125(CA125)、糖類抗原19-9(CA19-9)和細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)。陽性判定標準為：SCC≥1.5 ng/ml，CA125≥35 mU/ml，CA19-9≥37 mU/ml，CYFRA21-1≥3.3 ng/ml。其中一種達到陽性標準則判定為陽性。

HPV-DNA分型檢查：于患者月經干凈后3～7 d，采樣前24 h內，無性生活，未沖洗陰道，未行陰道檢查和未經陰道用藥等的情況下進行宮頸樣本采集。于無菌條件下采集樣本保本并于標本液中保存。采用PCR-反向點雜交法進行檢測HPV16等高位HPV亞型，包括HPV-DNA提取、PCR擴增、雜交、洗膜和顯色等步驟。通過與HPV陽性和陰性對照進行陽性和陰性的判定。

陰道鏡檢查及改良Reid電子陰道鏡評分(RCI評分)和陰道鏡下宮頸活組織檢查：于陰道鏡下在宮頸表面涂抹碘液顯示病灶，觀察病灶的顏色、邊界、形態、血管結構和碘反應。用RCI評分進行診斷[4]：0分為正?；蚵詫m頸炎，1～2分為輕度不典型增生(CINⅠ)，3～4分為中度不典型增生(CINⅡ)，≥5分為重度不典型增生(CINⅢ)。碘反應于陽性部位取包括宮頸基底層的活組織，用4%甲醛溶液固定送檢。活檢異常結果分為CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宮頸癌。

1.3　統計學方法

應用SPSS 18.0分析數據。計數資料以率表示，用卡方檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2　結果

2.1　聯合檢查方法陽性結果比較

對于CIN，聯合檢查的陽性率均略高于各單項檢查，腫瘤標志物、HPV-DNA和陰道鏡聯合檢查的陽性率均高于各單項檢查和兩兩聯合檢查，且與腫瘤標志物檢測陽性率差異具有統計學意義(P<0.05)；對于宮頸癌，各種方法的陽性率未見差異(P>0.05)；腫瘤標志物、HPV-DNA和陰道鏡聯合檢查的總陽性率高于各單項檢查和兩兩聯合檢查，且與各單項檢查、腫瘤標志物聯合HPV-DNA檢查和腫瘤標志物聯合陰道鏡檢查結果差異具有統計學意義 (P<0.05)，見表1。

表1　各檢查方法陽性結果比較(例，%)

注：與腫瘤標志物+HPV-DNA+陰道鏡比較，*為P<0.05。

2.2　不同檢測方法的檢查結果評價比較

腫瘤標志物、HPV-DNA和陰道鏡聯合檢測的靈敏度、特異度和準確度高于各單項檢查和兩兩聯合檢查(P<0.05)，見表2。

表2　不同檢測方法診斷宮頸癌病變的價值比較/%

注：與腫瘤標志物+HPV-DNA+陰道鏡比較，*為P<0.05。

3　討論

宮頸癌既是嚴重威脅女性健康和生命的惡性腫瘤，也是可以通過早發現、早診斷和早治療的1種可預防和可治愈的疾病[5]。HPV的感染與宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌具有密切的關系。但相關研究顯示，HPV陽性的例數和含量表現為宮頸炎<宮頸癌前病變<宮頸癌[6]。檢測血清腫瘤標志物以檢查宮頸異常細胞的敏感性較高，與其它檢查方法結合可以顯著提高宮頸癌的檢出率[7]。有文獻報道宮頸癌患者血清中的SCC、CA125、CA19-9和CYFRA21-1會有不同程度的陽性表達，并且陽性率會隨著病情的發展而升高[8]。陰道鏡檢查高靈敏度和準確度以及重復性好等優點，可作為大規模宮頸癌篩查的1種新方法，常與細胞學和組織學檢查相結合以提高診斷的準確度[9]。

本研究采用腫瘤標志物檢測、HPV-DNA檢測和陰道鏡檢查聯合檢查進行宮頸癌的診斷。結果顯示，對于CIN，聯合檢查的陽性率均略高于各單項檢查，并且腫瘤標志物、HPV-DNA和陰道鏡聯合檢查的陽性率均高于各單項檢查和兩兩聯合檢查，提示聯合檢查可以提高宮頸癌前病變的陽性檢出率[10]。對于宮頸癌，各種方法的陽性率未見差異，可能是因為研究納入的病例數量較少所致。腫瘤標志物檢測、HPV-DNA檢測和陰道鏡檢查聯合檢查的靈敏度、特異度和準確度高于各單項檢查和兩兩聯合檢查。報道指出，宮頸癌患者血清中腫瘤標記物如SCC、CA125、CA19-9和CYFRA21-1陽性率會隨著病期的發展的增加[11]，正常宮頸和宮頸炎癥婦女亦存在HPV感染[12]，雖然在陰道鏡下活檢診斷在多數情況下可視為“金標準”，但也會受檢查對象和檢查者的技術等影響，并且由于CIN的多中心源性的特點也使得陰道鏡的準確度大大降低[13]。諸多原因引起各單項檢查易檢查出現誤斷和漏診。因此，聯合檢查可以充分利用各單項檢查的優點并彌補不足，以提高診斷準確度[14]。

綜上，腫瘤標志物檢測、HPV-DNA檢測和陰道鏡檢查聯合檢查較單項和兩量聯合檢查診斷宮頸癌能顯著提高檢查準確度，對宮頸癌前病變篩查的優勢明顯，但有必要擴大樣本量以探討對宮頸癌的篩查優勢。