原子吸收分光光度法分析注射用頭孢替安中鈉的含量

楊紅濤，陳真文，肖中元，彭亦新，周　玲

(1.太極集團西南藥業股份有限公司,重慶　400038；2.陸軍軍醫大學第三附屬醫院藥劑科,重慶　400038)

鹽酸頭孢替安是日本武田公司首先研發上市的第二代頭孢類抗生素[1]。該藥具有光譜而強力的抗菌活性，臨床療效顯著，安全性較好。其制劑主要是注射用鹽酸頭孢替安，由于鹽酸頭孢替安的水溶性并不是很好，因此在制劑中加入了一定量的碳酸鈉來該善其水溶性。碳酸鈉的量對于臨床應用較為重要：如果太低，不利于樣品的溶解；如果太高，在溶解時，其產生的二氧化碳會沖破容器，不利于臨床操作。因此，測定樣品中的碳酸鈉含量意義重大。本文采用原子吸收分光光度法(火焰法)進行測定，對其中影響結果的因素進行了分析，對方法學進行了研究。

1　材料與方法

1.1　主要儀器與試劑

原子吸收分光光度計(TAS-990、北京普析通用儀器有限公司)，真空恒溫干燥器(HZK60、重慶永生儀器有限公司)，注射用頭孢替安樣品(西南藥業股份有限公司)，NaCl，KCl均為基準級。

1.2　實驗方法

氯化鉀溶液的制備 稱取氯化鉀19.07g，加水溶解并稀釋至1000mL。

對照品溶液的制備 精密稱取經105℃干燥2h的氯化鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1mL中約含14μg的溶液。精密量取此溶液10mL，置100mL量瓶中，精密加入氯化鉀溶液10mL，加水稀釋至刻度，搖勻。

供試品溶液的制備 精密稱取本品適量，加水溶解并稀釋制成每1mL中約含碳酸鈉12.5μg的溶液。精密量取此溶液10mL，置100mL量瓶中，精密加入氯化鉀溶液10mL，加水稀釋至刻度，搖勻。

空白溶液的制備 精密量取氯化鉀溶液10mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。測定法 測定對照品溶液和供試品溶液的吸光度，用空白溶液作空白。

原子吸收分光光度發條件 火焰離子化器，燈電流：12mA，檢測器波長：589.0nm，狹縫0.2nm，空氣流量：5.0L /min ，乙炔氣流量：1.8L/min。

1.2.1水對測定的影響

按上述方法，分別用自來水、純水、超純水配制空白溶液，測定其吸光值。

1.2.2氯化鉀對測定的影響

分別用化學純、分析純、基準級的氯化鉀配制氯化鉀溶液；按上述方法，用基準級的氯化鈉配制對照品溶液，并測定其吸光值。

1.2.3氯化鈉對測定的影響

用基準級的氯化鉀配制溶液；分別用化學純、分析純、基準級的氯化鈉配制對照品溶液，并測定其吸光值。

1.2.4方法學研究

1.2.4.1線性

精密稱取105℃干燥2h的氯化鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1mL約含14μg的溶液，精密量取此溶液6,7,8,9,10,11,12mL,置100mL容量瓶中，精密加入氯化鉀溶液10mL，加水稀釋至刻度，搖勻，作為系列濃度的對照品溶液.照原子吸收分光光度法在589.0nm的波長處測定吸光度，以氯化鈉的濃度(c)為橫坐標，吸光度(A)為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程。

1.2.4.2準確度

精密稱取已知含量的樣品適量(約相當于碳酸鈉12.5μg)9份，分別置100mL量瓶中，分別加入氯化鈉儲備液3.2,4.93,6.8mL，各濃度3份，加入氯化鉀溶液10mL，用水稀釋至刻度。(按照處方分別配置含碳酸鈉為標示量80%、100%、120%的3種不同濃度的供試品溶液，按照擬定方法測定供試品溶液中的碳酸鈉含量，每個濃度測定3次)，計算回收率。

1.2.4.3重復性

取樣品6瓶，在裝量差異項下的內容物，混勻，精密稱取頭孢替安樣品6份。由一個分析人員，同一天內采用擬定方法連續測定樣品中碳酸鈉含量，計算平均含量及RSD。

1.2.4.4檢出限

取空白溶液連續測定11次，按公式計算出檢出限DLq=kσ/Sq，式中；K為置信因子(通常取3)；σ為測定精密度(標準偏差)；Sq為以絕對量為單位的靈敏度(即標準曲線的斜率)。

1.2.4.5供試品溶液穩定性

為了考察供試品溶液在測定過程中的穩定性，試驗中，稱取樣品適量，分別于0，2，4，6，8，10h取樣，按擬定標準方法測定樣品中碳酸鈉含量，計算平均含量及RSD。

2　結果

2.1　水對結果的影響

表1　不同水的吸收值

2.2　氯化鈉、氯化鉀對結果的影響

表2　不同氯化鉀的吸收值

表3　不同氯化鈉的吸收值

2.3　方法學研究結果

2.3.1線性結果

具體結果見表4。

表4　對照溶液線性

表4結果表明鈉離子檢測濃度在0.34～0.68μg/mL范圍內線性關系良好。

2.3.2準確度結果

平均回收率為100.29%，RSD為0.58%。詳細試驗結果見表5。

表5　回收率試驗結果

表5結果說明該方法準確度符合含量測定要求，可用于產品中碳酸鈉的含量測定。

2.3.3重復性

結果見表6。

表6　碳酸鈉測定方法重復性

表6結果表明：該方法測定6份樣品平均含量為16.41%，RSD為1.165%，說明有良好的重復性，本方法具有良好的日內精密度。

2.3.4檢出限

取空白溶液連續測定11次，按公式計算出檢出限DLq=kσ/Sq，結果檢出限為0.0237μg/mL。

2.3.5供試品溶液穩定性結果

具體結果見表7。

表7　溶液穩定性試驗結果

表7結果顯示，供試品溶液在10h內RSD為0.56%，碳酸鈉含量基本無變化，表明供試品溶液的鈉離子在10h內穩定，頭孢替安隨時間的變化對鈉離子的含量無影響。

3　討論

從光源發出的待測元素的特征輻射時，基態原子吸收能從輻射中吸收能量，產生共振吸收，從而產生吸收光譜，原子吸收分析就是利用上述原理，使用最強吸收線作為分析線[2]。由于不同來源的物質，其含的雜質不一致，這些雜質中的基態原子也不一致，會導致測定結果的不一致。比如自來水和純水中含有的大量的鈉離子，若用其作空白對照，會掩蓋樣品本身的鈉離子而使結果不準確。化學純和分析純的氯化鈉和氯化鉀，由于其含有大量的其他金屬離子或不穩定的基態原子，因此會造成檢檢測結果不準確。

4　結論

采用原子吸收分光光度法分析注射用鹽酸頭孢替安樣品中鈉的含量，方法簡便、準確、重現性好，回收率高，用該方法可控制樣品中的碳酸鈉含量，從而保證臨床用藥的安全。