遺傳性耳聾相關基因在突發(fā)性耳聾發(fā)病中的作用

常方悅　任俊宏　常新劍

【摘 要】目的：探討分析遺傳性耳聾相關基因在突發(fā)性耳聾發(fā)病中的作用。方法：選取我院2017年1月至2018年3月收治的突發(fā)性耳聾患者50例為觀察組，同期選擇健康無聽力損傷者50例為對照組。兩組均采集外周靜脈血進行DNA測序，并采用多聚酶鏈反應（PCR）擴增相關基因目片段。比較兩組基因突變率。結(jié)果：兩組GJB2、GJB3基因突變率對比差異不顯著，且P>0.05；兩組均為檢測出有意義的GJB6基因突變。結(jié)論：遺傳性耳聾相關基因在突發(fā)性耳聾發(fā)病中任何作用，即GJB2、GJB3、GJB6等基因突變與患者發(fā)病無相關性。

【關鍵詞】突發(fā)性耳聾；遺傳性；耳聾相關基因；發(fā)病作用

【中圖分類號】R47.12 【文獻標識碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）04--01

在臨床上，突發(fā)性耳聾（sudden hearing loss）是一種感音神經(jīng)性耳聾，其特點為原因不明、發(fā)生突然[1]。有的患者還會伴有惡心、嘔吐、眩暈、耳鳴，但這些癥狀不會反復發(fā)作，多數(shù)患者為單側(cè)發(fā)病，但偶有先后發(fā)生或雙側(cè)同時發(fā)生[2]。有關學者認為，遺傳因素可能與突發(fā)性耳聾發(fā)病有一定相關性，而已經(jīng)提出的基因主要包括GJB2、GJB3、GJB6等[3]。因此本文即對遺傳性耳聾相關基因在突發(fā)性耳聾發(fā)病中的作用進行了探討分析，現(xiàn)具體報道如下：

1 一般資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2017年1月至2018年3月收治的突發(fā)性耳聾患者50例為觀察組，同期選擇健康無聽力損傷者50例為對照組。本次研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準同意，所有患者均知曉同意。其中，對照組男31例，女19例，年齡為23-54歲，平均年齡為（38.5±10.2）歲。觀察組男29例，女21例，年齡為24-56歲，平均年齡為（37.9±11.3）歲。兩組基礎臨床資料比較差異不顯著，且P>0.05無統(tǒng)計學意義。

1.2 方法 兩組均采取3-5mL靜脈血，采用EDTA抗凝，采用試劑盒法提取DNA，即根據(jù)TAKERA DNA EXTRACTION KIT （50）的說明書進行嚴格炒作。然后對DNA溶液的A260以及A260/A280值采用超微量分光光度計進行測定，以衡量其純度和濃度，然后在-30攝氏度下保存所提取的DNA。由大連寶生物公司合成的引物，對GJB-2F，GJB2-2R；GJB-3F，GJB-3R；GJB-6F，GJB-6R等設計引物。取全血樣品2μLDNA，在30.2μL反應體積中，由10μmol/L引物正反向各0.2μL，14μLddH2O ，0.3μ5U/μL Tap 酶L，4.5μL 25μmol/L Mg2+Cl ，3μL 10×PCR緩沖液，6μL 0.2μmol/L d-NTP。在PCR儀上，4min 94攝氏度熱變性后，循環(huán)94攝氏度 30s—59攝氏度 30s—72攝氏度 30s，將72攝氏度延長10min，采用1.5%瓊脂糖凝膠電泳，然后對結(jié)果進行觀察。經(jīng)純化PCR產(chǎn)物后，采用DNA Star 軟件包中的Seqman軟件比對分析測序結(jié)果序列，并與標準序列進行對比，然后對結(jié)果峰圖文件采用Chromas2.0軟件進行讀取，以確認或者排除突變基因。

1.3 觀察指標 比較兩組基因突變率。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用統(tǒng)計學軟件spss22.0進行數(shù)據(jù)處理。卡方用以檢驗計數(shù)資料，t值用以檢驗計量資料，組間差異以P<0.05具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

兩組GJB2、GJB3基因突變率對比差異不顯著，且P>0.05；兩組均為檢測出有意義的GJB6基因突變。

3 討論

近幾年，臨床上突發(fā)性耳聾呈現(xiàn)為發(fā)病率逐漸提高的趨勢，而其發(fā)病原因目前尚未弄清。針對此類病癥，臨床治療存在一定難度，而治療的關鍵則在于明確其發(fā)病原因。有關研究顯示，與突發(fā)性耳聾發(fā)病有關的基因最可能為遺傳性耳聾相關基因和凝血因子基因。前者主要包括凝血酶原（G20210A）＼凝血因子V萊頓（G1691A）、5，10-亞甲基四氫葉酸還原（MTHFRC677）等，而后者主要包括GJB2、GJB3、GJB6等基因。目前有關報道對遺傳性耳聾相關基因?qū)ν话l(fā)性耳聾發(fā)病的作用進行了研究，但均未發(fā)現(xiàn)有意義的突變位點[4]。而本文的研究中，兩組GJB2、GJB3基因突變率對比差異不顯著，且P>0.05；兩組均為檢測出有意義的GJB6基因突變。該研究結(jié)果與上述研究報道一致，這表明造成突發(fā)性耳聾發(fā)病的病理基礎分子可能不是遺傳性耳聾相關基因，而未來還需對該病癥的相關基因加大、加深研究，即加大樣本量，以獲取準確的突變基因，從而為臨床治療提供可靠依據(jù)[5]。

綜上所述，遺傳性耳聾相關基因在突發(fā)性耳聾發(fā)病中無任何作用，即GJB2、GJB3、GJB6等基因突變與患者發(fā)病無相關性。

參考文獻

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曹昱. 云南地區(qū)非綜合征型耳聾患者常見耳聾基因篩查分析[D].昆明醫(yī)科大學，2017.

王欣. 尿酸與突發(fā)性耳聾關系研究及影響突發(fā)性耳聾預后的相關因素初步探討[D].河北醫(yī)科大學，2016.

金磊. 質(zhì)膜Ca～（2+）-ATP酶異構(gòu)體2基因的多態(tài)性與突發(fā)性耳聾關系[D].昆明理工大學，2014.

宋攀攀，張瓊敏，王延藏，陳曉云，朱翌.遺傳性耳聾相關基因在突發(fā)性耳聾發(fā)病中的作用[J].溫州醫(yī)學院學報，2013，43（04）：211-214.