血清EB病毒Rta-IgG抗體檢測在鼻咽癌診斷中的應用價值研究

曾澤勇 區葉明

鼻咽癌指發生于鼻咽黏膜上皮的惡性腫瘤, 常發生于鼻咽頂后壁的頂部, 其次為側壁, 發生于前壁及底壁者極為少見, 發病人群大多為中年人, 亦有青少年患病者。該病是我國高發惡性腫瘤之一, 發病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首, 其常見的臨床癥狀為鼻塞、涕中帶血、耳悶堵感、聽力下降、復視及頭痛等［1-3］。鼻咽癌病變隱蔽, 易漏診、誤診, 不易早期診斷, 以上單個指標的檢測對鼻咽癌血清學診斷的敏感度和準確度均不甚理想, 因而國內外都在尋找一種有效的血清學診斷方法。EB 病毒 (epstein-barr virus, EBV)屬于潛伏于機體細胞內的一種γ皰疹病毒。目前許多研究均認為EB病毒與鼻咽癌疾病的發生、發展存在密切的關系［4,5］。目前越來越多的EB病毒相關指標被用作鼻咽癌的標志物, 如病毒殼蛋白抗原-免疫球蛋白A(VCA-IgA)、EB病毒早期抗原免疫球蛋白A(EA-IgA)等對于本病的診斷具有重要意義［6-8］。近年來有研究報道［9,10］, 血清 EB 病毒 Rta-IgG 抗體檢測可用于鼻咽癌診斷中, 為進一步檢驗其精確性, 本研究以佛山市高明區中醫院收治的各期鼻咽癌患者作為觀察研究對象, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取佛山市高明區中醫院2016年6月～2017年5月收治的82例鼻咽癌患者作為研究組, 所有患者均經病理學檢查確診, 并排除嚴重疾病患者；另選同期80例健康體檢者作為對照組。對照組志愿者中男58例,女 22例。年齡 23～81歲 , 平均年齡 (54.85±10.26)歲；研究組患者中男 61 例 , 女 21 例 , 年齡 22～82 歲 , 平均年齡(54.79±10.18)歲, Ⅰ期18例、Ⅱ期22例、Ⅲ期20例、Ⅳ期22例兩組研究對象性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。本研究已獲得醫院倫理學委員會批準, 并且于試驗前自愿簽訂知情同意書參與研究。

1.2 方法 所有研究對象均為清晨空腹化驗, 抽肘靜脈血5 ml, 血液樣本抽取完畢立刻送往進行離心處理, 離心機中12000 r/min離心3 min得到血清。其血清Rta-IgG抗體水平檢測采用ELX800酶標儀以酶聯免疫吸附法(ELISA法)進行,血清Rta-IgG檢測試劑盒購于同昕生物技術(北京)有限公司, 所有操作及處理均嚴格按照說明書以及酶聯免疫吸附法指南進行。在微孔條上預包被高純度基因重組Rta 蛋白, 與血清樣品中Rta 抗體結合, 再加入HRP 標記的羊抗人IgG 與之結合, 加入TMB底物顯色, 終止液終止反應。酶標儀檢測吸光度并經線性回歸方程計算得出EB病毒Rta-IgG抗體水平。且每份血樣均進行3個平行試驗并取平均值。

1.3 觀察指標 統計對照組志愿者、研究組以及研究組四個時期各組患者Rta-IgG抗體水平。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差()表示, 采用t檢驗；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清Rta-IgG抗體水平比較 研究組患者血清Rta-IgG抗體含量為(73.28±8.26)U/ml, 顯著高于對照組的(1.38±0.82)U/ml, 差異具有統計學意義 (P＜0.05)。見表 1。

表1 兩組血清 Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

表1 兩組血清 Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

注：與對照組比較, aP＜0.05

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2.2 研究組不同時期血清Rt-IgG抗體水平比較 鼻咽癌患者血清EB病毒Rta-IgG抗體水平, Ⅰ期患者＜Ⅱ期患者＜Ⅲ期患者＜Ⅳ期患者, 差異均具有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 研究組不同時期血清Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

表2 研究組不同時期血清Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

注 ：與Ⅰ期比較 , aP＜0.05 ；與Ⅱ期比較 , bP＜0.05 ；與Ⅲ期比較 ,cP＜0.05

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3 討論

世界衛生組織調查報道, 全球有80%的鼻咽癌患者在中國, 其發病率以中國的南方較高, 發病年齡由20多歲開始,逐漸上升, 45～60歲為最高峰, 男性高于女性。嚴重影響患者的生活質量, 威脅其生命安全［11-13］。近年來隨著癌癥診斷技術的飛速發展, Rta蛋白由EB病毒BRLF1基因編碼, 是一種EB病毒反式激活蛋白, 一般在EB病毒裂解早期就可表達, 可促進EB病毒其他產物的表達, 這提示Rta蛋白可能具有用于鼻咽癌早期診斷的潛力［14,15］。近年來有研究也發現Rta-IgG抗體用于鼻咽癌診的準確性較高, 特別是用于鼻咽癌篩查具有很高的特異性［16］。

本研究結果顯示, 鼻竇癌患者血清中EB病毒Rt-IgG抗體水平顯著高于健康志愿者, 且隨著病情加重, EB病毒Rta-IgG抗體水平逐漸增加, 這與蔡永林等研究報道相一致［17］。說明EB病毒Rta-IgG抗體水平與鼻咽癌病情嚴重程度相關。

綜上所述, EB 病毒Rta-IgG 定量檢測對于鼻咽癌的診斷具有較高臨床價值, 為下一步進行鼻咽癌臨床治療效果的監測奠定了基礎。因此對于鼻咽癌高發地區、高發人群應該加強EB 病毒Rta-IgG抗體的檢測, 做到早診斷早治療。