肥胖兒童青少年血清指標表達的影響因素分析

李恒濤，王根在，朱洪慶，林束珠，王春艷，平獻紅，喬玉蘭，冉貴萍，杜金龍

(1.上海市奉賢區奉城醫院兒科；2.檢驗科，上海 201411)

隨著生活水平的提高及生活模式的改變，兒童青少年肥胖的發病率迅速上升，且發病年齡呈明顯的低齡趨勢[1]。國內諸多研究表明，中國青少年肥胖發展速度快于歐美發達國家[2-3]。因此闡明兒童青少年肥胖的發病機制，對減少2型糖尿病、動脈硬化、高脂血癥等多種能縮短預期壽命的疾病的發生，改善人群生活質量意義重大。鋅-α2-糖蛋白(Zinc-alpha2-glycoprotein,ZAG)是一種新型的脂肪細胞因子，可加速體內脂肪分解，減少脂肪堆積，具有改善肥胖的作用，在預防和治療肥胖及代謝性疾病方面日益受到關注。血漿攝食抑制因子(NUCB2/Nesfatin-1)是一種強有力的厭食分子，有報道顯示其抑制攝食的作用具有劑量和時間依賴的特點[4]。新近發現的肥胖抑制素(obestatin)具有促進脂肪細胞分化的作用。由于ZAG、Obestatin及NUCB2/Nesfatin-1都和肥胖的發生發展具有相關性，而三者在肥胖兒童青少年血清的表達水平及其影響因素至今未見全面報道，本文旨在探討ZAG、NUCB2/Nesfatin-1及Obestatin在肥胖兒童青少年血清中表達水平的相關影響因素，為更好的理解兒童青少年肥胖的發病機制提供參考依據。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2015年2月—2017年1月在上海市奉賢區奉城醫院門診就診及奉城鎮中小學生體檢的單純性肥胖兒童青少年共125例作為肥胖組，年齡7～15歲，男性68例，女性57例，平均身高(145±26)cm。選擇同一時期體檢的身體質量指數(body mass index,BMI)正常的兒童、青少年共90例作為對照組，年齡7～15歲，男性48例，女性42例，平均身高(143±24)cm。兩組入選者年齡、性別、身高比較沒有統計學差異，具有可比性。

肥胖組入選標準[5]：年齡7～15歲，BMI大于同年齡同性別2個標準差，排除因甲狀腺功能降低、腎上腺皮質增生癥等引起的繼發性肥胖。無心、肝、肺、腎等重要臟器疾病，無血糖、血壓、血脂異常。檢測前1個月未服用任何藥物，無糖尿病家族史，無手術史，無外傷史。排除標準：自身免疫性疾病、甲狀腺疾病、內分泌系統及代謝性疾病。所有入選對象均告知其本人及監護人本次研究的目的，在自愿的基礎上書面簽署知情同意書。本研究經我院醫學倫理委員會審核通過。

1.2研究方法

人體參數測定：所有受試者的人體參數由專門人員測定并詳細記錄，內容項包括：身高、體重、腰圍、臀圍、血壓、體內脂肪百分比(Fat%，由TBF-410體脂分析儀測量)，計算得出BMI[BMI=體重(kg)/身高(m)2]、腰臀比(WHR，WHR=腰圍/臀圍)。

生化指標測定：要求患者空腹10h于次日清晨采集靜脈血8mL，靜脈血分成兩份，一份測量空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)，均由日立7600自動生化分析儀檢測，采用穩態模型計算胰島素抵抗指數(HOMA-IR，HOMA-IR=FPG×FINS/22.5)。另一份經常溫離心5min(3 000r/min)，分離血漿后于-80℃冰箱內保存待測ZAG、NUCB2/Nesfatin-1、Obes￣tatin、空腹胰島素(FINS)。

采用酶聯免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)測量血清ZAG (Raybiotech公司，檢測范圍：0.1～1 000ng/mL，最低檢測限21pg/mL，批內變異系數3.0%～4.7%，批間變異系數6.5%～6.6%)、NUCB2/Nesfatin-1(美國Phoenix Pharmaceuticals，檢測范圍：0.78～50μg/L，批內變異系數<15%、批間變異系數<10%)、Obestatin(美國Uscnlife)、FINS(美國Thermo)，檢測方法嚴格按照試劑盒的說明書進行。

1.3統計學方法

2結果

2.1肥胖組與對照組一般臨床指標比較

肥胖組與對照組人群一般臨床指標比較結果顯示，兩組在年齡、性別比例、FINS、HOMA-IR方面無明顯差異，不具有統計學意義(均P>0.05)，具有可比性。但兩組人群在BMI、Fat%、WHR、FBG、HbA1c、HDL-C、 LDL-C、TC、TG方面肥胖組明顯高于對照組，差異均有統計學意義(χ2/t值分別為5.37、7.11、9.10、7.02、5.00、4.60、4.82、3.99、8.21，均P<0.05)，而肥胖組ZAG、NUCB2/Nesfatin-1、obestatin明顯低于對照組，差異均有統計學意義(t值分別為8.00、6.68、7.19，均P<0.05)，見表1。

表1 兩組人群一般臨床指標比較

(續表1)

2.2 ZAG、obestatin及NUCB2/Nesfatin-1對兒童青少年肥胖的診斷價值

繪制ROC曲線顯示，ZAG對兒童青少年肥胖診斷的靈敏度、特異度分別為79.21%、82.48%，診斷的曲線下面積為0.779(95%CI：0.671～0.862)；obestatin對兒童青少年肥胖診斷的靈敏度、特異度分別為80.32%、84.62%，診斷的曲線下面積為0.792(95%CI：0.687～0.882)；NUCB2/Nesfatin-1對兒童青少年肥胖診斷的靈敏度、特異度分別為83.56%、87.82%，診斷的曲線下面積為0.814(95%CI:0.701～0.911)。說明ZAG、obestatin及NUCB2/Nesfatin-1對兒童青少年肥胖具有較高的診斷價值，見圖1。

圖1 ZAG、obestatin及NUCB2/Nesfatin-1對兒童青少年肥胖診斷的ROC曲線

2.3肥胖兒童青少年血清ZAG水平影響因素的Logistic回歸分析

為研究肥胖兒童青少年血清中ZAG與各研究指標的相關性，對肥胖組血液中ZAG水平進行Spearman相關分析結果表明，ZAG與BMI、Fat%、FBG、LDL-C、TC、WHR呈正相關(r值分別為0.343、0.275、0.514、0.428、0.265、0.417， 均P<0.05)，與FINS、HOMA-IR呈負相關(r值分別為-0.267、-0.372，均P<0.05)，與TG、HDL-C、LDL-C相關性不顯著，進一步以ZAG為因變量，以BMI、Fat%、FBG、LDL-C、TC、WHR為自變量進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示BMI、WHR是肥胖兒童青少年血清ZAG水平的獨立影響因素，見表2。

表2 肥胖兒童青少年血清ZAG水平影響因素的Logistic回歸分析

2.4肥胖兒童青少年血清obestatin水平影響因素的Logistic回歸分析

經Spearman相關分析結果表明，血清obestatin的水平與BMI、Fat%、WHR、TG、FINS、HOMA-IR、HDL-C呈正相關(r值分別為0.214、0.326、0.311、0.251、0.142、0.263、0.306，均P<0.05)，與HbA1c、LDL-C、TC呈負相關(r值分別為-0.205、-0.362、-0.257，均P<0.05)，與FBG相關性不顯著。多因素Logistic回歸分析結果顯示，BMI、HDL-C是肥胖兒童青少年血清obestatin水平的獨立危險因素，見表3。

表3 肥胖兒童青少年血清obestatin水平影響因素的Logistic回歸分析

2.5肥胖兒童青少年血清NUCB2/Nesfatin-1水平影響因素的Logistic回歸分析

線性相關分析發現，血清NUCB2/Nesfatin-1的水平與BMI、WHR、FBG、HbA1c、FINS、HOMA-IR呈明顯正相關(r值分別為0.202、0.275、0.313、0.355、0.237、0.379，均P<0.05)，經Logistic回歸分析結果表明BMI和HOMA-IR是影響肥胖兒童青少年血清NUCB2/Nesfatin-1水平的獨立危險因素，見表4。

表4 肥胖兒童青少年血清NUCB2/Nesfatin-1水平影響因素的Logistic回歸分析

3討論

3.1兒童青少年肥胖的危害及其預防的重要性

兒童青少年肥胖可引發脂質代謝紊亂、胰島素抵抗、非酒精性脂肪肝等，如果不控制，可發展為成年心血管疾病。研究表明，中重度肥胖兒童頸內動脈中層厚度明顯增加，已存在早期血管病變，單純性肥胖兒童不僅與高血流動力學狀態有關，而且可增強腎素-血管緊張素-醛固酮(RAAS)系統，促進心臟肥厚和血壓升高[6-7]，因此預防兒童青少年肥胖對于提高兒童青少年健康意義重大。

3.2 ZAG、obestatin及NUCB2/Nesfatin-1表達水平的影響因素分析

ZAG是一種新型脂肪細胞因子，它能激活解耦聯蛋白，增加產熱，促進脂肪利用，其表達下調可增加肥胖個體脂肪組織的易感性，在肥胖小鼠中的研究表明ZAG表達與BMI呈負相關[8]。其在2型糖尿病患者血液中水平明顯升高，其水平與BMI、腰圍呈明顯正相關[9]。本次研究發現，ZAG在肥胖兒童青少年血清中的表達水平低于對照組，經Logistic回歸分析得到 BMI、WHR是影響肥胖兒童青少年血清ZAG表達水平的獨立危險因素，說明肥胖兒童青少年的BMI、WHR影響血清ZAG的水平，患者越肥胖，BMI越高，則血清ZAG水平相對正常值可能越低，對脂肪的分解和利用會進一步降低，則會導致肥胖的進一步加重。

Obestatin是一種多肽分子，可促進脂肪細胞分化，在肥胖患者中起重要作用，有研究顯示obestatin在肥胖的糖尿病患者中水平比正常組和單純肥胖組均更低，在成人單純性肥胖者體內，BMI、HOMA-IR與obestatin呈負相關，多元回歸分析表明BMI、HOMA-IR是影響obestatin水平的獨立相關因素[10]。本次研究結果顯示obestatin水平在肥胖兒童青少年中比對照組水平明顯下降，差異具有統計學意義，經Logistic回歸分析得到BMI、HDL-C是影響血清obestatin表達水平的獨立危險因素。Obestatin在肥胖者體內水平低于正常者水平，本次研究結果得到obestatin在肥胖組體內表達水平同樣低于對照組，obestatin在肥胖者體中低水平表達可能是對身體能量正平衡的反應，其表達低水平則抑制脂肪細胞的分解，可能參與兒童青少年肥胖的發生發展。

NUCB2/Nesfatin-1是一種飽食分子，在機體能量平衡中發揮重要作用，動物實驗表明大劑量的NUCB2/Nesfatin-1能抑制攝食，從而減輕體重改善肥胖，但目前在2型糖尿病患者血漿NUCB2/Nesfatin-1的水平報道不一致，有明顯高于正常人也有低于正常人[11-12]，另有報道在成人肥胖人群中，血漿NUCB2/Nesfatin-1的水平較正常人群具有升高趨勢，但差異無統計學意義[13]。本次研究結果顯示，在肥胖兒童青少年中NUCB2/Nesfatin-1的水平明顯低于對照組。本次研究結果與成人肥胖研究結果不一致的原因可能與受試對象不同有關， NUCB2/Nesfatin-1在肥胖兒童青少年中表達水平下降，則抑制攝食的作用下調，導致患者更易肥胖，但目前關于其抑制攝食的調節機制尚未明確，仍有待進一步研究。

3.3小結

綜上所述，肥胖兒童青少年血清存在ZAG、obestatin及NUCB2/Nesfatin-1的表達水平降低，并且BMI是影響三者表達水平變化的獨立危險因素，提示血清ZAG、obestatin及NUCB2/Nesfatin-1可能參與了兒童青少年肥胖的發生發展，但是其具體的調節機制還需進一步研究。