犬貓弓形蟲病的流行病學調查與防控

許鳳娟 楊 榮 張海云 唐艷榮

（北京市朝陽區動物疫病預防控制中心，北京 100018）

弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起的一種人畜共患病，宿主種類十分廣泛，人和動物感染率都很高。犬貓弓形蟲病真球蟲目，弓形蟲科，弓形蟲屬的龔地弓形蟲引起的一種原蟲病，多數為隱性感染，但也有出現臨床癥狀甚至死亡的。

1 病原體

龔地弓形蟲，根據不同發育階段，其形態各異，滋養體和包囊出現在中間宿主體內，例如犬；裂殖體、配子體和卵囊只出現在終末宿主體內，例如貓。

1.1 滋養體（又稱速殖子）

呈弓形、月牙形或香蕉型，一端偏尖，一端偏頓圓，平均大小為長4～7μm，寬2～4μm，經姬姆薩氏液染色或瑞氏染色后，主要見于急性病例的腹水中，常可見到游離的（細胞外的）單個蟲體在有核細胞（單核細胞、內皮細胞、淋巴細胞等）內可見到正在進行內雙芽增殖的蟲體；有時在宿主細胞的細胞漿里，許多滋養體簇集在一個囊內形成“假囊”。

1.2 包囊（又稱組織囊）

見于慢性病例的腦、骨骼肌、心肌和視網膜等處。包囊呈卵圓形，有較厚的囊膜，囊中的蟲體稱為慢殖子，數目可由數十個至數千個；包囊的直徑為50～60μm，可在患者體內長期存在，并隨蟲體的繁殖而逐漸增大，可大至100μm，慢殖子的形態與速殖子形態相似，僅是前者的細胞核的位置稍偏后。

卵囊見于貓糞內，呈圓形或橢圓形，卵壁兩層，無色，無微孔。大小為長8～10μm，寬1～14μm，平均為10μm ×12μm。

2 生活史

弓形蟲的整個發育過程需要兩個宿主；在終末宿主（貓科中的貓屬和山貓屬）腸內進行球蟲型發育，在中間宿主（哺乳類、鳥類）體內進行腸外期發育。

貓吞食了弓形蟲的包囊或卵囊，子孢子或速殖子和慢殖子侵入小腸的上皮細胞，進行類似球蟲發育的裂殖生殖和配子生殖，最后產生蟲卵，隨糞便排出體外，在外界適宜條件下，經2～4d，孢子發育完成，形成感染性卵囊（內含兩個孢子囊，每個孢子囊內有4個子孢子）。弓形蟲也可在貓體內進行弓形蟲相發育，即被貓吞食的子孢子、慢殖子偶速殖子有一些可以進入淋巴、血液循環，被帶到全身各臟器和組織中，侵入有核細胞，以內出芽增殖進行無性繁殖，最后生成包囊（內含許多滋養體，也稱之為假包囊），包囊破裂釋放出滋養體。每個滋養體又能侵入新的細胞內重新進行內出芽增殖。弓形蟲不僅可以在細胞漿內繁殖，有時也能侵入細胞核內繁殖。經一段時間的繁殖之后，由于宿主產生免疫力，或者其他因素，使其繁殖變慢，一部分滋養體被消滅，一部分滋養體在宿主的腦和骨骼肌等處形成包囊，內含慢殖子，包囊有較強的抵抗力，在宿主體內可存活數年之久。

在外界成熟的孢子化卵囊污染食物和水源而被中間宿主（包括人和多種動物）食入或飲入后釋放出的子孢子，和通過口、鼻、咽、呼吸道黏膜、眼結膜和皮膚侵入中間宿主體內的滋養體，均將通過淋巴血液循環侵入有核細胞在胞漿中以內出芽的方式進行繁殖。如果感染的蟲株毒力很強，而且宿主又未能產生足夠的免疫力，或者還由于其他因素的作用，即可引起弓形蟲病的急性發作；反之，如果蟲株的毒力弱，宿主又能很快產生免疫力，則弓形蟲的繁殖受阻，疾病發作得較緩慢，或者成為無癥狀的隱性感染，這樣，存留的蟲體就會在宿主的一些臟器組織（尤其是腦組織）中形成包囊型蟲體。

犬吞食了弓形蟲感染性卵囊或包囊后，子孢子或慢殖子在其體內進行弓形蟲相發育，最后形成包囊，存留在犬的一些臟器和組織中。

3 癥狀

犬和貓患弓形蟲病的癥狀，大都與中樞神經系統、視覺、呼吸、胃腸系統有關。據觀察，犬的癥狀類似犬瘟熱，包括發熱，厭食，精神委頓，呼吸困難，咳嗽，貧血，下痢，妊娠早產或流產，運動共濟失調等。

貓的癥狀包括發熱黃疸，呼吸急促，咳嗽，貧血，運動失調，后肢麻痹，腸梗阻等。也有出現腦炎癥狀和早產或流產的病例。

4 流行病學調查

弓形蟲病的臨床表現、病理變化和流行病學雖有一定的特點，但仍不足以作為診斷的依據，而必須在實驗室診斷中查出病原體或特異性抗原抗體，方可做出結論。目前筆者在臨床對于弓形蟲的診斷有以下四個方面進行綜合判斷：

4.1 間接血凝試驗材料與方法

4.1.1 試劑及儀器：弓形蟲抗體的間接血凝檢測試劑：IHA凍干抗原（試劑批號：20111108），稀釋液（試劑批號：20111108），陽性對照血清（試劑批號：20110421），陰性對照血清（試劑批號：20110911），均購自中科院蘭州獸醫研究所。96（12×8）孔血凝反應板，振蕩器，離心機等。

4.1.2 間接血凝試驗方法：按照蘭州獸醫研究所提供的弓形蟲抗體正向間接血凝試驗操作說明進行。a.血清檢測法反應在96 孔V型微量有機玻璃板上進行，每塊血凝板設陰性血清、陽性血清、空白和稀釋液對照孔。b.加稀釋液：每孔加75μl。c.加樣品：陽性、陰性對照血清 第1孔加相應血清25μl。d.稀釋：陰、陽性對照血清稀釋至第7孔，樣品稀釋至第3孔。陰、陽性對照血清的第8孔和樣品的第4孔為稀釋液對照。e.加抗原：凍干抗原，按說明書要求稀釋，1500 r/ min～2 000 r/ min 離心5～10 min，棄去上清液，加等量稀釋液搖勻，置4℃冰箱24 h 后使用，每孔加25μl，加完后將反應板置于微量振蕩器上振蕩1～2 min，蓋上一塊與反應板大小相等的玻璃板以防灰塵落入和水分蒸發，置37℃下作用3 h 后，判定結果。f.結果判定方法：結果判定：在陽性對照血清滴度不低于1：1 024（第5 孔）；陰性對照血清除第1 孔允許存在前滯現象“+”外，其余各孔均為“－”；稀釋液對照為“－”的前提下，對被檢血清進行判定。血清抗體效價達到或超過1：64者判為陽性，“++”為陽性終點。效價低于1：64 者判為陰性。

2011年對北京市朝陽區動物疫病預防控制中心對朝陽區范圍內50家寵物醫院（診所）弓形蟲病檢測結果見表1、表2

表1 不同季節貓血清弓形蟲lgG陽性率

表2 不同季節犬血清弓形蟲lgG陽性率

4.2 膠體金快速檢測技術

4.2.1 檢測設備：弓形蟲（TOX-IgG）金標檢測卡；弓形蟲（TOX-IgM）金標檢測卡

4.2.2 實驗過程：加入150μl血清樣品于加樣孔中；15min內于光線明亮處觀察結果。血清樣品應注意以下方面：遇熱失活的樣品可導致溶血和蛋白變性，因此應該避免；渾濁的血清應在大約1000ref的離心機上離心15min；樣品如需儲存，需去掉紅細胞，在2℃～8℃儲存72h，如實驗前將檢測板和樣品平衡至室溫。

4.2.3 結果觀察：

有效：在對照區（C）出現一條色線，表明實驗有效，且操作正常。

無效：對照區（C）沒有線條出現，無論試驗區（T）線是否顯示紅色色帶，此檢測均無效，需要重新做一遍。

陽性：對照區（C），在對照區出現一條色線，在試驗區（T），出現一條色線表明試驗呈陽性。

陰性：對照區（C），在對照區出現一條色線，在試驗區（T），沒有出現色線表明試驗呈陰性。

表4 抗體檢測結果科學判讀

IgM IgG 說明陰性 陽性 過去的感染陰性 陰性 沒有感染或剛剛被感染陽性 陰性 早期感染或者先天性感染陽性 陽性 目前正在感染，慢性感染，再次感染，或感染后數月可能IgM陽性

4.3 V8實時快速熒光PCR檢測體系

V8實時熒光PCR檢測體系”是由北京世紀元亨公司研制，可用于多種人畜共患病的快速檢測，如犬貓流感、犬棘球蚴病、布魯氏菌病、弓形體病、鉤端螺旋體病等。

該技術根據寵物臨床檢測“病例零散、臨時加樣、檢測項目交叉繁雜，結果及時”等特點，具有先進的個體設計1拖8專利設計，可同時分別控制8個檢測孔，每個檢測孔自帶獨立微電腦運行模塊，隨時添加樣品，檢測不同疾病。同時，檢測試劑單份裝配、操作簡便、靈敏度高、特異性強、抗PCR污染能力強、另一方面，該專利技術著眼于提高反應的升溫降溫速度，提高儀器對樣品的識別能力。檢測時間短（僅30min，而普通熒光PCR檢測需要60～90min），更加符合寵物臨床診斷的時限要求，便于基層診療機構及實驗室操作及使用，使該技術有更廣的應用范圍

4.4 直接檢查法

對其中狀態較差的23只流浪貓實施安樂死，采集直腸內糞便及心、肝、脾、肺、腎、腦、舌等用于蟲體分離，飽和蔗糖漂浮法檢測糞便中弓形蟲的卵囊。胃蛋白酶消化法消化貓的心、腦、舌，并將消化的組織腹腔注射給小鼠，采取頜下淋巴結、肺臟、肝臟做涂片檢查。自然干燥后，甲醇固定。姬姆薩氏染色，置顯微鏡1000倍油鏡下鏡檢，可發現弓形蟲蟲體。

表5 以上四種檢測方法優缺點對比

5 治療

在臨床治療方面，抗弓形蟲滋養體藥物的療效尚滿意，但在獲得性弓形蟲病的治療中，經常出現復發。

5.1 對癥治療

根據臨床癥狀來采取的相應治療措施，例如患病動物出現發熱時，應作退熱處理，必要時給予退熱藥；不食者，可給予靜脈補液，以保體液平衡；顱內壓增高者，可給予20%甘露醇，進行脫水治療；對于呼吸困難者可給予吸氧或者呼吸中樞興奮劑來處理等等。

5.2 抗弓形蟲治療

目前公認有效的抗弓形蟲病藥物有乙胺嘧啶、磺胺嘧啶（或黃安吡嗪、磺胺二甲氧嘧啶）和螺旋霉素、氯林可霉素等。弓形蟲病不管是先天性、獲得性的、急性、亞急性和慢性急性發作的均需治療，應注意在發病初期及時用藥，如用藥較晚，雖可使臨床癥狀消失，但不能抑制蟲體進入組織形成包囊，結果使病畜成為帶蟲者。

6 公共衛生

6.1 加大宣傳力度，普及動物疫病的防控知識

通過各種媒介大力宣傳動物疫病相關的防控方法及正確的飼養管理技術，提高動物飼養者的防疫意識，普及動物傳染病的預防知識，動物的健康狀況與主人的飼養方法有直接關系，如是否定期進行體檢、環境消毒、是否飼喂健康食品，由于動物主人并不知道應如何合理地飼養寵物，導致寵物經常患病，通過宣傳推廣正確的飼養方法，倡導以預防為主，控制動物疫病的發生。

6.2 盡快研制和推廣貓用預防弓形蟲病的疫苗

弓形蟲病在世界各地發病率都比較高，大多在10%～70%之間，防控形勢嚴峻，但從太平洋島嶼調查來看，在無貓島上，人和動物均沒有發現弓形蟲，這足以證明貓在傳播本病的作用。因此貓就成為防止弓形蟲病工作中的重要管制對象。

目前在國際上有弓形蟲疫苗，但未被批準進入中國境內銷售，此疫苗給貓注射之后，只能阻止貓體內的弓形蟲孢子化，并不能保護貓不感染弓形蟲。

我國并沒有預防貓弓形蟲病符合標準的疫苗，使貓弓形蟲病的預防及治療遇到了一定的困難，生物制品科研單位與獸藥審核單位配合應盡早研制出符合標準的高效的預防貓弓形蟲病疫苗，以滿足廣大動物診療單位的需求及更好地控制貓弓形蟲病的發生。

6.3 養成良好的飲食習慣

弓形蟲病的最主要傳染源首先是人吃了未煮熟的肉，特別是豬、羊肉等。幾乎所有哺乳動物和鳥類，如鼠類、豬、羊、牛、家兔、狗和雞、鴨、鵝等都可以傳染弓形蟲，而且感染率很高。人的傳染來源主要來自于這些動物的肉類，如火鍋溫度不夠或涮7成熟，煎牛排保留一半生等，肉中的弓形蟲包囊沒有被殺死（加熱到71℃包囊即可死亡），就有傳染給人的危險，家中生肉或切肉案板的污染同樣可以傳染給人，污染的羊和牛奶也可以傳染。我國人口的弓形蟲感染率較低，可能與中國人喜歡熟食肉類的飲食習慣有關。

另外，狗狗也可以傳染弓形蟲，但是它們的糞便和排泄物都沒有傳染性，如果不吃狗肉就不會傳染，所以養狗的寵主們不用擔心會感染。

6.4 提高自我防護意識，不與寵物有過分親密的接觸

與犬貓保持一定距離，不過分親熱，接觸犬、貓咪后和飯前勤洗手，與犬貓玩耍時避免被其抓傷、咬傷。孕婦應遠離犬貓，有資料顯示，異常妊娠的孕婦、畸形兒、弱智兒等的弓形蟲感染率顯著高于正常妊娠的孕婦及正常兒，不孕癥婦女中弓形蟲感染率有逐年上升趨勢。最近幾年，家庭飼養寵物越來越多，使育齡婦女感染弓形蟲的機會增加，必須定期對孕婦作弓形蟲常規檢查。

6.5 養成良好的生活方式，減少弓形蟲傳播

6.5.1 貓糞傳染：感染的貓糞里有弓形蟲的囊合子，人接觸這種貓糞可以傳染。貓主要通過感染的貓、食用被感染的而且未經加工的生肉、捕食老鼠和鳥類獲得弓形蟲感染。在室內圈養，不吃活物的貓不會被傳染。貓感染包囊后經過2～7d開始由糞便排出囊合子，喂入卵囊后，經21～41d排出囊合子，食入滋養體后，經7～10d排出囊合子，糞便排出囊合子的時間不長，只有10～20d，高峰期是5～8d，1g糞便中有數百萬到數千萬個卵囊。囊合子需要在外界發育1～2d或更長時間，才可以形成孢子化卵囊，才具有傳染性，所以要每天清除貓砂或貓糞，貓咬傷不會傳染弓形蟲病。孢子化卵囊對外界環境有很強的抵抗力，在常溫下，可保持感染力1～1.5年，實驗中要注意避免污染和自身感染。加熱50℃、30min；55℃、15min；70℃、2min或者80℃、1min均可殺死卵囊的孢子。

6.5.2 土壤污染和昆蟲機械傳染：囊合子抵抗力強，在外界環境——土壤、水和草地的生存時間很長，在潮濕的土壤里可活數月乃至數年。蒼蠅和蟑螂可沾染囊合子，機械攜帶。這些都可以造成傳染。因此盡量不要讓貓外出，遛狗時，需要牽犬鏈，避免其在草地亂聞亂舔而感染。

6.5.3 做好孕前檢查：先天性感染：最后也是最重要的一種，孕婦在懷孕期間發生感染，可以通過胎盤傳染給胎兒，如果在懷孕前已經感染過，就不再有傳染胎兒的危險。因此，在備孕期間，做好弓形蟲檢測，懷孕期間將上述問題排除后，可以避免感染弓形蟲。