生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)研究

高宏軍

摘要：隨著社會經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展以及工業(yè)化、城市化進(jìn)程的推進(jìn)，水資源污染問題越來越嚴(yán)重，與此同時(shí)，人們對于生活飲用水的水質(zhì)要求也越來越高。目前，我國的飲用水中存在大量的微生物，其中，部分微生物對人們的身體健康有一定的威脅，因此，飲用水必須嚴(yán)格地進(jìn)行消毒殺菌處理，并應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格的微生物檢測，檢測達(dá)標(biāo)后方可輸配給終端用戶。

關(guān)鍵詞：生活飲用水、微生物檢驗(yàn)

生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)對人們的飲水安全有著極為重要的作用，通過科學(xué)、有效的微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法，可保證水源的水質(zhì)合格、水處理達(dá)標(biāo)。但是，在生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)過程中，若存在不合理之處，則會一定程度地影響微生物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，進(jìn)而也容易造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果誤差，無法給生活飲用水的安全提供有力的保障。

一、生活飲用水微生物檢驗(yàn)的闡述

生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)主要是指為了保證人們的飲水安全，對經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等一系列處理后的飲用水進(jìn)行的一項(xiàng)微生物檢驗(yàn)方法。根據(jù)我國生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB5749-85）中的規(guī)定，其飲用水中的微生物含量不得超過如下數(shù)字：總大腸菌群≤3個(gè)/L，細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)/mL，糞大腸菌群于100mL水樣中不得檢出等等。目前常見的生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法包括有：濾膜法、酶底物法、多管發(fā)酵法、平皿計(jì)數(shù)法等，在實(shí)際的生活飲用水微生物檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)人員根據(jù)微生物類型的不同，所選擇的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法也會有所不同。 而生活飲用水微生物的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)步驟大多如下。1.樣本采集。具有代表性的采集需要檢驗(yàn)的生活飲用水水樣，采集過程中必需注意無菌操作，且要保證采集的水樣能夠在采集后的 4 h 之內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)，以免其因置放時(shí)間過長而發(fā)生變化或污染。2.實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。根據(jù)所要檢驗(yàn)的水中微生物類型的不同，選擇最適宜、最準(zhǔn)確、最科學(xué)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法。3.結(jié)果分析。通過對生活飲用水中各種微生物及時(shí)、有效的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果分析，便可得知飲用水中微生物的實(shí)際情況，這對早期處理或控制微生物超標(biāo)或含有致病性微生物的生活飲用水帶來的十分積極的作用。

二、檢驗(yàn)總大腸菌群的方法

首先，多管發(fā)酵法：測定總大腸菌群的多管發(fā)酵法最為適合居民日常生活飲用水以及水源的檢測。測試的儀器以及檢驗(yàn)步驟如下：1.多管發(fā)酵法應(yīng)用的儀器：多管發(fā)酵法中需要使用的儀器包含了：天平、分度吸管、培養(yǎng)箱、錐形瓶、小倒管、冰箱、顯微鏡、平皿、試管、載玻片。2.檢驗(yàn)步驟：（1）取出10ml的水樣放到10ml的雙料乳糖蛋白胨的培養(yǎng)液里面，然后取出1ml的水樣放到10ml的單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液里面，再取出1ml的水樣放到9ml的滅菌生理鹽水里面，均勻混合后吸取出1ml（也就是0.1ml的水樣）加入到10ml的單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液里面，每一種稀釋度都要接種5管。把已經(jīng)處理好的飲用水，還要經(jīng)常的做出檢驗(yàn)，每天都定時(shí)檢驗(yàn)一次，還可以直接接種5份的10ml的水樣進(jìn)行雙料培養(yǎng)基，每種10ml。（2）水源如果檢驗(yàn)出污染嚴(yán)重，就需要加大稀釋度，每種標(biāo)準(zhǔn)稀釋度都要接種5管，總共接種水樣為15管。接種不足1ml的水樣時(shí)，就需要10倍的稀釋，取其中的1ml進(jìn)行接種，然后逐次增稀，換用帶有滅菌刻度的吸管。（3）將接種好的試管放置在恒溫的培養(yǎng)箱中，經(jīng)過24個(gè)小時(shí)的培養(yǎng)，如果沒有產(chǎn)生出氣產(chǎn)酸，就說明沒有總大腸菌群，但是如果產(chǎn)出了酸產(chǎn)氣，就可以繼續(xù)的進(jìn)行檢測。（4）對產(chǎn)出的酸產(chǎn)氣試管中，轉(zhuǎn)種到伊紅美藍(lán)瓊脂板上，在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行24小時(shí)的培養(yǎng)，查看菌落形態(tài)，將其中具有特征的菌落作革蘭氏染色、證實(shí)試驗(yàn)以及鏡檢。（5）經(jīng)過了染色鏡確定了是革蘭氏陰性無芽孢桿菌，然后接種乳糖蛋白胨進(jìn)行培養(yǎng)，防止恒溫箱中培養(yǎng)24個(gè)小時(shí)，產(chǎn)出了酸氣者，就肯定是有總大腸菌群。其次，濾膜法：總大腸菌群檢測的濾膜法一般都是用微孔徑的濾膜進(jìn)行水樣的過濾，把過濾膜貼附在乳糖上進(jìn)行恒溫的24小時(shí)培養(yǎng)，將形成的菌落中的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌然后對飲用水中的總大腸菌群做出檢測。1.培養(yǎng)基與試劑：濾膜法選用培養(yǎng)基與試劑主要是品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基以及乳糖蛋白胨的培養(yǎng)液。2.濾膜法使用的試驗(yàn)儀器：濾器、濾膜（孔徑0.45微米）、抽濾設(shè)備、天平、分度吸管、培養(yǎng)箱、錐形瓶、小倒管、冰箱、顯微鏡、平皿、試管、載玻片、無齒鑷子。3.試驗(yàn)步驟：（1）滅菌。主要是分為濾膜濾器兩種滅菌方法。（2）過濾水樣。使用無菌鑷子將滅菌濾膜的邊緣部分夾取起來把粗糙的表面朝上，然后放在滅菌好的濾床之上，將濾器固定好，往濾器中加入100ml的水樣，將濾器的閥門打開進(jìn)行抽濾。（3）培養(yǎng)。過濾完水樣之后抽氣5秒后，將濾器閥門關(guān)上，使用滅菌鑷子移放到品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基之上，濾膜截留好的細(xì)菌面要朝上，相互緊貼不可以存有氣泡，倒置平皿放入恒溫箱中進(jìn)行24小時(shí)的培養(yǎng)。

三、多管發(fā)酵法與濾膜法的對比

多管發(fā)酵法是采用MPN進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果的表示，這是以統(tǒng)計(jì)學(xué)中的理論對水體中的大腸桿菌密度以及衛(wèi)生質(zhì)量的評估標(biāo)準(zhǔn)的方法一樣，但是可以進(jìn)行反復(fù)的檢測，能夠發(fā)現(xiàn)結(jié)果要比實(shí)際的數(shù)值大，但是反復(fù)的實(shí)施檢測，那差異會因此而變小，其中細(xì)菌的含量值估算，絕大部分是因?yàn)橄♂尪扔诛@示著陽性也會顯示著陰性，所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，一定要根據(jù)水樣檢驗(yàn)的實(shí)際需求來制定重復(fù)的數(shù)量，應(yīng)該根據(jù)數(shù)據(jù)要求的準(zhǔn)確度來制定。多管發(fā)酵法更實(shí)用于多種類型的樣品當(dāng)然也包括了底泥，可惜操作的步驟卻又繁瑣，使用的時(shí)間又過于的長；濾膜法就比較適用于那些包含著少量雜質(zhì)的水樣，可是操作的方法卻相對的簡單快捷，所以多管發(fā)酵法就可以被廣泛的使用，并且是采用最多的方法，并且數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度又特別高。多管發(fā)酵法相對于濾膜法的數(shù)據(jù)結(jié)果實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)的比較，濾膜法的結(jié)果就比較的精密，兩種的測試方法得到的結(jié)果能夠提供出水質(zhì)的基本情況，但是檢驗(yàn)數(shù)值卻不同，所以進(jìn)行水源的水質(zhì)做出檢測過程中，就應(yīng)該預(yù)期到大部分的濾膜數(shù)據(jù)都會遺落在多管發(fā)酵法的試驗(yàn)的界限內(nèi)。

總之，相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員，應(yīng)該加強(qiáng)對我國當(dāng)下生活飲用水微生物實(shí)驗(yàn)中容易出現(xiàn)的質(zhì)量問題進(jìn)行詳細(xì)分析，并采取積極、科學(xué)、有效的措施控制微生物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，以保證質(zhì)量的穩(wěn)定性與良好性，進(jìn)而為我國生活飲用水的檢測與正常、安全使用奠基堅(jiān)實(shí)地基礎(chǔ)。

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