盈江縣高山大白菜根腫菌生理小種鑒定及抗源篩選

尹俊龍錢正益鄭宇峰趙從新岳艷玲*

（1云南農業大學園林園藝學院，云南昆明 650201；2景東彝族自治縣農業試驗站，云南普洱 676299；3德宏州農業技術推廣中心，云南芒市 679300）

大白菜根腫病是由蕓薹根腫菌（Plasmodiophora brassicae Woron.）侵染所引起的一種世界性土傳病害。該病菌最早發現于歐洲，目前流行于主要十字花科作物產區（伍文憲 等，2015）。根腫菌的休眠孢子能夠在土壤中存活8 a以上（譚翀和岳艷玲，2013），一旦被侵染將很難再進行十字花科作物的種植。根腫菌自20世紀末傳入我國，不斷蔓延，目前已有多個省市土壤受到污染，損失慘重（田雅琳，2015）。近年來，隨著對根腫病防控方法的深入研究，發現施用生石灰調節土壤pH能夠在一定程度上減弱根腫病的為害（班靜潔，2014），施用枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）生物制劑能夠抑制土壤中90%的根腫菌孢子萌發（彭麗莎，2015），施用化學農藥氟啶胺（福帥得）防治效果可以達到80%以上（王昌玉 等，2004）。但最為經濟有效的綠色防控方法是使用抗病品種。由于根腫菌在不同的地區以不同致病性和不同類型的生理小種形式存在，造成抗病品種在不同地區栽培后所表現出的抗性也存在顯著差異（譚翀和岳艷玲，2013）。盈江是云南省德宏州高山大白菜的重要產區，但土壤被根腫菌污染后生產受到嚴重威脅，產量損失嚴重，幾近絕收，因此篩選適宜盈江地區栽培的抗病品種尤為重要。為了保障該地區大白菜生產的需求，對該地區根腫菌進行生理小種鑒定和抗源篩選，以期為盈江地區大白菜生產和新品種選育提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

根腫菌采自云南省德宏州盈江縣油松嶺大白菜產區。

Williams鑒別寄主4份，即2個結球甘藍Jersey Queen、Badger Shipper和 2個 蕪 菁 甘 藍Laurentian、Wilhelmsburger，源自沈陽農業大學。

從國內外引進抗根腫病大白菜品種18份，品種名稱及來源見表2；對照為感病品種魯春白1號。

1.2 試驗方法

試驗于2016年8～10月在云南農業大學園林園藝學院蔬菜基地進行。利用Williams鑒別系統，采用菌土法（司軍 等，2003）進行根腫菌生理小種鑒定和大白菜品種抗性鑒定。菌土的孢子濃度為1×107個·g-1（周永紅 等，2007），每個品種接種100株，40 d后調查發病情況，計算發病率和病情指數。

根據十字花科作物根腫菌苗期病害分級標準（侯明生和蔡麗，2014）對不同品種大白菜植株發病情況進行鑒定和分級，分級標準：0級，根部無腫瘤；1級，側根有小腫瘤；3級，主根腫大，其直徑小于2倍莖基部；5級，主根腫大，其直徑是莖基部的2～3倍；7級，主根腫大，其直徑是莖基部的3～4倍；9級，主根腫大，其直徑是莖基部的4倍以上或腫大的根部變黑。計算病情指數，病情指數=0記為免疫，病情指數＜10記為抗病，病情指數≥10記為感病。

2 結果與分析

2.1 盈江根腫菌生理小種鑒定

Williams 鑒別系統的4個寄主接種盈江根腫菌40 d后，病情指數分別為21、33、28、30，均大于10，且各寄主的發病率均為100%（表1）。根據Williams鑒別系統的分類標準，盈江根腫菌為4號生理小種。

表1 盈江根腫菌生理小種鑒定結果

2.2 大白菜品種抗性鑒定

從國內外引進的18個抗根腫病大白菜品種接種盈江根腫菌后，發病率和病情指數明顯不同（表2）。其中尚品、CR鐵甲1號、抗根911、泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6個品種的發病率和病情指數均為0，對盈江根腫菌表現免疫，占供試品種的33.3%；德高CR117、中華白菜王的發病率分別為17%和11%，病情指數分別為9.7和7.7，對盈江根腫菌表現抗病，占供試品種的11.1%；其他10個品種和感病對照魯春白1號的發病率均為100%，病情指數在38.8～65.7之間，表現感病。

表2 18個抗根腫病大白菜品種對盈江根腫菌抗性鑒定結果

3 結論與討論

3.1 盈江根腫菌是更復雜的根腫菌

本試驗中，Willimas鑒別系統的4個寄主接種盈江根腫菌后全部發病，發病率均為100%；病情指數分別為21、33、28、30，均大于10，鑒定盈江根腫菌為4號生理小種。但是，抗4號生理小種的大白菜品種榮耀、亞菲4號和秋冠在接種湖北枝江和山東青島2個地區的4號生理小種后均表現抗?。ㄔ钜?等，2017），而在本試驗中榮耀、秋冠和亞菲4號接種盈江根腫菌后的發病率均為100%，病情指數均大于10，表現為感病，說明盈江根腫菌4號生理小種與湖北枝江和山東青島根腫菌4號生理小種不同，盈江根腫菌致病性更強，可能是Willimas鑒別系統鑒別不到的生理小種，也可能是含有多個生理小種的混合菌，具體小種組成還需要進一步進行單孢分離侵染鑒定。

3.2 盈江根腫菌抗病種質資源相對豐富

本試驗引進的18個抗根腫病大白菜品種接種盈江根腫菌后，尚品、CR鐵甲1號、抗根911、泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6個品種的發病率和病情指數均為0，對盈江根腫菌表現免疫；德高CR117、中華白菜王的發病率分別為17%和11%，病情指數分別為9.7和7.7，對盈江根腫菌表現抗病。說明這8個品種可能含有抗盈江根腫菌的抗性基因，可利用這些遺傳資源，針對該地區特殊的生理小種，將抗病基因轉育到適宜生態類型品系中，培育符合當地栽培園藝性狀需求的大白菜抗病新品種。

3.3 篩選符合當地生產需求的大白菜新品種

盈江縣是云南省德宏州高山大白菜重要產區，已有20 a的栽培歷史，大白菜夏秋季生產是當地農民創收的重要項目。隨著土壤被根腫菌污染，根腫病發生為害越來越嚴重，給當地大白菜生產造成了巨大的損失。近幾年來，德高CR117在該地區進行推廣應用，初步取得了較好的防控效果。但是，盈江地區主要是進行夏秋季栽培，溫度高、雨水大，德高CR117軟腐病的發生率為10%～13%，而且該品種球形偏大，不太符合當地市場需求。本試驗篩選出6個對盈江根腫菌表現免疫的大白菜品種，可通過進一步試種，對其在當地的表現進行綜合評價，以篩選出適宜當地氣候條件和市場需求的抗病品種，豐富盈江地區大白菜的品種類型。