酶法制備阿莫西林的工藝優(yōu)化研究

李勝男

摘 要：阿莫西林別名為特力士、新達(dá)貝寧、益薩林、阿莫鋒、奧納欣、弗萊莫星、酚塔西林、阿莫靈、阿莫仙、阿莫新、阿木西林、阿摩西林、安福喜、廣林、奈他美等，是一種最常用的半合成青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素，阿莫西林殺菌作用強(qiáng)，穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)對(duì)酶的投入量、反應(yīng)PH、反應(yīng)溫度進(jìn)行了優(yōu)化。

關(guān)鍵詞：制備；阿莫西林；工藝

阿莫西林別名為特力士、新達(dá)貝寧、益薩林、阿莫鋒、奧納欣、弗萊莫星、酚塔西林、阿莫靈、阿莫仙、阿莫新、阿木西林、阿摩西林、安福喜、廣林、奈他美等，是一種最常用的半合成青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素，阿莫西林殺菌作用強(qiáng)，穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)對(duì)酶法制備阿莫西林的工藝進(jìn)行研究。

1儀器與試藥

電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統(tǒng)（大連依利特分析儀器有限公司）；CO-Ⅳ色譜柱溫箱（恒溫柱箱）（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）； 長(zhǎng)城獅鼎SHB-III型臺(tái)式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；和泰Master-S超純水機(jī)（自來(lái)水為水源）（上海和泰儀器有限公司）；RE100-S數(shù)顯旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器（北京）有限公司）； ILMVAC真空泵--德國(guó)伊爾姆抗化學(xué)腐蝕隔膜泵（上海泰坦科技股份有限公司）；DLAB D2012plus 臺(tái)式高速微量小型離心機(jī)（大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器（北京）有限責(zé)任公司）；Globus超聲波萃取設(shè)備（賽普泰克有限公司（上海比朗儀器制造有限公司）； 600220液相保護(hù)柱（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）；JASCO V-7000系列紫外可見(jiàn)近紅外分光光度計(jì)（沈陽(yáng)佳士科商貿(mào)有限公司）。磷酸二氫鉀（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、氫氧化鉀（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、乙腈（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、甲醇（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸二氫銨（南京化學(xué)試劑股份有限公司）、醋酸銨（南京化學(xué)試劑股份有限公司）、三乙胺（南京化學(xué)試劑股份有限公司）。

2工藝優(yōu)化

2.1酶的投入量的選擇

分別采用2.0KU/L、2.2KU/L、2.4KU/L、2.6KU/L、2.8KU/L、3.0KU/L、3.2KU/L為投酶量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)投酶量為2.0KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之六十三點(diǎn)二；當(dāng)投酶量為2.2KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之六十九點(diǎn)一；當(dāng)投酶量為2.4KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之七十五點(diǎn)二；當(dāng)投酶量為2.6KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)二；當(dāng)投酶量為2.8KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十點(diǎn)九；當(dāng)投酶量為3.0KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)一；當(dāng)投酶量為3.2KU/L時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十點(diǎn)九。實(shí)驗(yàn)表明當(dāng)投酶量為2.6KU/L時(shí)就可以達(dá)到反應(yīng)的需求。

2.2反應(yīng)PH的選擇

分別采用5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0為PH值進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)PH值為5.6時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之七十點(diǎn)一；當(dāng)PH值為5.8時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之七十九點(diǎn)九；當(dāng)PH值為6.0時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)二；當(dāng)PH值為6.2時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)一；當(dāng)PH值為6.4時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)二；當(dāng)PH值為6.6時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之八十點(diǎn)一；當(dāng)PH值為6.8時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之七十三點(diǎn)九；當(dāng)PH值為7.0時(shí)，阿莫西林摩爾收率為百分之六十三點(diǎn)八。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PH值在6.2到6.6收率較高。

2.3反應(yīng)溫度的選擇

分別采用9攝氏度、11攝氏度、13攝氏度、15攝氏度、17攝氏度、19攝氏度、21攝氏度為反應(yīng)溫度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)反應(yīng)溫度為9攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之七十點(diǎn)三；當(dāng)反應(yīng)溫度為11攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之七十六點(diǎn)一；當(dāng)反應(yīng)溫度為13攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)一；當(dāng)反應(yīng)溫度為15攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之八十一點(diǎn)一；當(dāng)反應(yīng)溫度為17攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之七十九點(diǎn)三；當(dāng)反應(yīng)溫度為19攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之七十五點(diǎn)二；當(dāng)反應(yīng)溫度為21攝氏度，阿莫西林摩爾收率為百分之七十點(diǎn)六。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明反應(yīng)溫度在13到15攝氏度時(shí)收率較高。

3討論

分別考察0.1mol/L磷酸二氫銨溶液（三乙胺調(diào)節(jié)pH6.6）–乙腈（70：30），乙腈-甲醇-0.083 mol？L-1醋酸銨 （52：30：18）（醋酸調(diào)節(jié)pH 6.8），0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用2mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0）-乙腈（97.5：2.5），0.2%三乙胺溶液（用磷酸調(diào)p H至5.3）-乙腈（65∶35），0.01 mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（p H=2.2）-水（80：20），乙腈-甲醇-水（10：5：85）（用磷酸調(diào)PH值為6.0），0.1mol.L-1磷酸二氫銨溶液（三乙胺調(diào)節(jié)pH6.5）-乙腈（75∶25）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用2mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0）-乙腈（97.5：2.5）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用2mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0）-乙腈（97.5：2.5）為流動(dòng)相。測(cè)定方法為：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用2mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0）-乙腈（97.5：2.5）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm[1-6]。實(shí)驗(yàn)分別考察了酶的投入量、反應(yīng)PH、反應(yīng)溫度。確定了當(dāng)投酶量為2.6KU/L，PH值在6.2到6.6，反應(yīng)溫度在13到15攝氏度時(shí)收率最高。

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