2型糖尿病患者血清Betatrophin水平變化對頸動脈內膜-中層厚度的影響

于淑萍，鄧家良，馬蘇嫻，洪霞飛，潘瑞蓉，袁國躍

(江蘇大學附屬醫院，江蘇鎮江212000)

心腦血管疾病等糖尿病大血管并發癥是導致T2DM患者死亡的常見原因，動脈粥樣硬化(AS)與糖尿病大血管并發癥緊密相關，是導致其發生發展的主要病理機制。研究表明，糖脂代謝紊亂、胰島素抵抗(IR)等是AS發生發展的重要影響因素[1]。Betatrophin是一種在人類肝臟組織中高表達的分泌蛋白，又名血管生成素樣蛋白8(Angptl8)。與家族其他成員一樣，Betatrophin在IR、調節糖脂代謝等不同方面發揮多種生物學作用[2]。人血清Betatrophin主要由肝臟組織分泌。近年，本研究團隊及國外課題組均發現，T2DM患者的血清Betatrophin水平升高，其與IR及糖脂代謝緊密相關[3,4]。AS早期表現為頸動脈內膜-中層厚度(CIMT)增加，因此，CIMT是糖尿病早期大血管病變的判定標準之一。目前，關于Betatrophin的研究大多集中在糖脂代謝方面，國內外尚無有關血清Betatrophin水平與CIMT關系的研究報道，本研究首次通過觀察T2DM合并CIMT增厚患者血清Betatrophin水平來探討兩者之間的相關性，以期為糖尿病大血管病變的預防及診治提供新的臨床依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年3月～2017年12月在江蘇大學附屬醫院內分泌科住院的T2DM合并CIMT增厚(CIMT≥1 mm)[5]患者100例(CIMT增厚組) ，其中男61例、女39例，年齡(68.18±9.18)歲，另選同期T2DM CIMT正常(CIMT<1 mm)患者100例(CIMT正常組)，其中男51例、女49例，年齡(55.15±9.97)歲。T2DM的診斷均符合1999年WHO的診斷及分型標準。入選者均排除T1DM、特殊類型糖尿病、糖尿病急性并發癥或嚴重慢性并發癥；嚴重心、肝、腎功能不全等。

1.2 病史及血標本的采集 由專人采用統一標準測量T2DM患者的身高、體質量、腰圍(WC)、臀圍、血壓等一般臨床資料。以問診的方式了解患者年齡、糖尿病病程、用藥史及其他疾病史等；計算BMI、腰臀比(WHR)等；研究對象禁食10 h，于次日清晨空腹采集血液，然后行葡萄糖耐量試驗(OGTT)及胰島素釋放試驗。所有血標本靜置離心后放于-80 ℃冰箱冷凍保存。

1.3 血生化指標及Betatrophin的測定 采用酶法測定血脂，包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，葡萄糖氧化酶法測定空腹血糖(FPG)及餐后2 h血糖(2 h PG)。采用高效液相層析法檢測糖化血紅蛋白(HbA1c)。采用放射免疫法檢測空腹胰島素(FINS)，計算胰島素抵抗指數(HOMA-IR)、胰島β細胞功能指數(HOMA-β)。ELISA法檢測血清Betatrophin，試劑盒采購于武漢伊艾博公司。

1.4 CIMT測定 由專人運用彩色多普勒超聲診斷儀進行CIMT(血管壁內膜與管腔界面到中膜與外膜界面之間的垂直距離)的測定：選取左右頸動脈膨大下1 cm處進行測量，每處測量3次后取平均值。

2 結果

2.1 兩組臨床指標及血清Betatrophin比較 CIMT增厚組：平均病程12年，平均體質量69.13 kg，平均BMI 25.46(kg/m2)，平均WC 92.51 cm，平均WHR 0.95，平均SBP 136.92 mmHg，平均DBP 80 mmHg，平均FPG 10.44 mmol/L，平均2 h PG 18.19 mmol/L，平均FINS 10 μIU/L，HOMA-IR 4.61，HOMA-β 28.50，平均HbA1c9.42%，平均TG 2.49 mmol/L，平均TC 4.71 mmol/L，平均HDL-C 1.08 mmol/L，平均LDL-C 2.69 mmol/L，平均CIMT 1.15 mm，平均Betatrophin 0.79 pg/L。CIMT正常組:平均病程10年，平均體質量66.85 kg，平均BMI 24.44 kg/m2，平均WC 88.17 cm，平均WHR 0.93，平均SBP 131.51 mmHg，平均DBP 80 mmHg，平均FPG 9.87 mmol/L，平均2 h PG 17.78 mmol/L，平均FINS 8.24 μIU/L，HOMA-IR 3.55，HOMA-β 27.73，平均HbA1c8.86%，平均TG 1.68 mmol/L，平均TC 4.85 mmol/L，平均HDL-C 1.04 mmol/L，平均LDL-C 2.28 mmol/L，平均CIMT 0.8 mm，平均Betatrophin 0.51 pg/L。與CIMT正常組比較，CIMT增厚組年齡增大，病程延長，BMI、WC、SBP、FINS、HOMA-IR、HbA1c、TG、Betatrophin均升高(P均<0.05)。

2.2 血清Betatrophin與各觀察指標的相關性 相關分析結果顯示，T2DM患者血清Betatrophin水平與年齡、病程、SBP、FPG、2 h PG、FINS、HOMA-IR、HbA1c、TG呈正相關(r分別為0.326、0.167、0.230、0.347、0.159、0.302、0.436、0.329、0.348,P<0.05或<0.01)。

2.3 CIMT與各觀察指標的相關性 T2DM患者CIMT與年齡、病程、體質量、WC、WHR、BMI、SBP、HOMA-IR、HbA1c、TG、Betatrophin呈正相關(r分別為0.580、0.365、0.181、0.279、0.175、0.170、0.248、0.252、0.193、0.218、0.408，P<0.05或<0.01)。

2.4 CIMT增厚的影響因素 以CIMT增厚為因變量，年齡、病程、HDL-C、LDL-C、TG、TC、Betatrophin、HOMA-IR等為自變量，行多元逐步回歸分析，結果表明，血清Betatrophin、TG及體質量是CIMT增厚的獨立影響因素(β分別為0.129、0.010、0.003，P均<0.01)。見表1。

表1 CIMT增厚影響因素的多元逐步回歸分析

3 討論

Betatrophin是近年發現的一種新型分泌蛋白，小鼠體內主要在肝臟和脂肪組織表達，人類血清Betatrophin主要在肝臟高表達。體外實驗與小鼠模型研究證實，血清Betatrophin在調節脂質代謝方面發揮重要作用[6,7]。多項獨立研究表明，Betatrophin與多種內分泌疾病如糖尿病、肥胖癥和代謝綜合征密切相關，血清Betatrophin水平在T2DM患者中顯著升高。目前國內外研究表明，Betatrophin與糖尿病腎病、糖尿病視網膜疾病等多種微血管并發癥有一定的相關性。

糖尿病大血管并發癥的早期病變是脂質沉積導致AS，其發生發展受多種因素的影響，血管內皮損傷及功能障礙、糖脂代謝紊亂、IR均是AS的高危因素。研究發現,CIMT增厚患者冠心病的發生率明顯升高。本研究結果顯示，與CIMT正常的T2DM患者相比，T2DM合并CIMT增厚患者血清Betatrophin水平升高，相關分析結果表明Betatrophin與CIMT呈正相關；多元逐步回歸分析結果顯示,血清Betatrophin是T2DM患者CIMT增厚的獨立危險因素。以上研究結果均提示血清Betatrophin水平與CIMT增厚具有一定的相關性。近年翟志紅等[8]研究結果顯示，冠心病患者血清Betatrophin水平高于正常對照組。綜合目前研究結果，推測血清Betatrophin可能參與了AS的發生、發展。

研究表明，IR與致AS的血脂譜密切相關，其通過影響血脂代謝增加心血管疾病的發生風險[8,9]。本研究結果顯示，CIMT增厚組中HOMA-IR升高，相關分析結果表明，T2DM患者血清Betatrophin水平及CIMT均與HOMA-IR呈正相關。近年，Chen等[9]研究結果顯示，T2DM患者中血清Betatrophin水平升高，且與HOMA-IR具有相關性，本研究結果與其一致。以上研究結果提示，血清Betatrophin可能通過影響IR而參與了CIMT增厚的過程。

研究表明，血脂代謝紊亂也在AS發生發展中發揮了重要作用，高甘油三酯血癥是CIMT增厚的主要危險因素。本研究相關分析結果顯示，血清Betatrophin、CIMT與血清TG濃度呈正相關。有研究中也發現Betatrophin在糖尿病患者中明顯升高且與TG水平相關。以前的研究表明，Betatrophin可通過調節小鼠血清TG水平而作為血脂調節劑發揮作用。近年有研究發現，經腺病毒轉染的小鼠肝臟中Betatrophin過表達，血清TG水平顯著升高，而敲除Betatrophin基因后的小鼠血清TG則顯著下降。Betatrophin調節脂代謝的機制目前尚無定論，已有研究證明β受體蛋白通過調節肝VLDL分泌機制影響血脂[7]。Quagliarini等[10]觀察到血清Betatrophin以重組人血管生成素樣蛋白3依賴性方式增加血清TG。由此推測，血清Betatrophin可能通過參與上調TG從而促進了AS的發生。

綜上，T2DM合并CIMT增厚患者血清Betatrophin水平明顯升高，其可能是通過促進IR及升高血脂而促進CIMT增厚，其可能在糖尿病大血管并發癥的發生發展中起重要作用。