生脈散配方顆粒及加味方劑對急性缺氧大鼠相關生化指標的影響

張加雄，萬 麗，王 張，楊沮勤，朱伊婷，陳英杰，夏媛媛

目前，預防急性高原病（AMS）的化學藥物主要有碳酸酐酶抑制劑、鈣離子通道阻滯劑、利尿劑、鎮靜催眠劑和糖皮質激素等，代表性藥物分別有乙酰唑胺、硝苯地平、呋塞米、地西泮和地塞米松等；預防AMS的中藥主要為補益類、活血化瘀類中藥，代表性藥物有紅景天、生脈散、復方丹參制劑等。由于AMS涉及多器官、多組織的功能改變，疾病機理錯綜復雜，中醫藥因注重“整體觀念”、“辨證論治”，相較于西醫藥物預防具有一定的優勢。外環境的低氧低壓、空氣干燥是AMS的主要病因，AMS經中醫辨證可歸為“氣陰虛”的范疇，因此，筆者選擇中醫治療氣陰虛的基本方“生脈散”為研究對象，對生脈散配方顆粒及其益氣、活血的加味方劑益氣生脈散（黃芪+生脈散）、活血生脈散（丹參+生脈散）配方顆粒進行抗急性缺氧方面的藥效學比較研究，為合理運用生脈散類方劑預防AMS提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑 生脈散配方顆粒（自制），紅景天(四川省中藥飲片有限責任公司），丹參配方顆粒、黃芪配方顆粒（四川新綠色藥業科技發展股份有限公司）；大鼠 ALD、ANG-Ⅱ、ANP、EPO、NT-proBNP、Renin ELISA試劑盒，均由Abcam公司生產，北京永輝生物科技有限公司進口分裝。

1.1.2 實驗動物 SPF級SD大鼠，雌雄各半，體重180～220 g，購于成都達碩實驗動物有限公司，生產許可證號SCXK（川）2015-030，飼養于成都中醫藥大學藥學院實驗動物觀察室，實驗前適應性飼養1 w。

1.1.3 主要設備 FLYDWC50-ⅡA低壓氧艙（中航工業貴州風雷航空軍械有限責任公司），Multlskan Mk3酶標儀（賽默飛世爾儀器有限公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 動物分組與給藥 取大鼠60只，雌雄各半，隨機分成6組，每組10只，即空白組、模型組、紅景天（HJT）組、生脈散（SMS）組、益氣生脈散（YQSMS）組、活血生脈散（HXSMS）組。空白組、模型組均灌胃給予生理鹽水（10 ml/kg），其余各組分別灌胃給予紅景天水煎液（以原生藥計，劑量為1 g/kg）、生脈散配方顆粒（以原生藥計，劑量為4 g/kg）、益氣生脈散配方顆粒（以原生藥計，劑量為5 g/kg）、活血生脈散配方顆粒（以原生藥計，劑量為5 g/kg），1次/d，連續7 d。

1.2.2 急性缺氧模型[1]連續給藥7 d后，除空白組外，其余各組均置于模擬海拔5000 m的低壓艙內，放置24 h，此期間正常供應飼料及水。

1.2.3 檢測指標 完成造模后，將各組自低壓氧艙取出，用10%水合氯醛腹腔注射（劑量為3 ml/kg），待大鼠失去意識后，取腹主動脈血液，離心，取上層血清，采用ELISA法檢測血清促紅細胞生成素（EPO）、心鈉素（ANP）、N-腦鈉鈦（NT-proBNP）、腎素（Renin）、血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)、醛固酮(ALD)的含量。

1.3 統計學方法 應用SPSS18.0統計軟件分析數據，計量資料以±s表示，組間比較采用方差分析和兩兩比較t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

與空白組比較，其他各組血清EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD 含量均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）。但與模型組比較，HJT組、SMS組、YQSMS 組 和 HXSMS 組 的 EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD 含量均較低 （P＜0.05或P＜0.01）。比較而言，在SMS組、YQSMS組和HXSMS組中，HXSMS組的EPO和ANP含量最接近空白組，其次是YQSMS組；在NT-proBNP的變化上，以HXSMS組最低（P＜0.01），其他各組差異不大（P＞0.05）。 見表1。

3 討論

ANP、NT-proBNP是反映心臟功能的重要生化標志物；腎素-血管緊張素-醛固酮系統（RASS）在維持體內水、電解質平衡和內環境穩定方面發揮著重要作用；高原缺氧環境會導致機體血漿EPO含量升高，進而導致紅細胞增生，血液粘稠度增高。基于以上因素，本研究選擇血清EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD為急性缺氧的藥效學研究指標。

紅景天防治AMS療效確切，目前已廣泛應用于臨床[2-3]，故本研究選擇其為陽性對照藥物。本研究結果顯示，實驗大鼠在暴露模擬海拔5000 m高原環境后， 血清 EPO、ANP、NT-proBNP、Renin、ANG-Ⅱ、ALD含量均明顯升高，而生脈散配方顆粒及加味方劑能明顯降低其含量，其中活血生脈散在降低急性缺氧大鼠血清EPO含量方面，較生脈散藥理作用更強；在降低NT-proBNP含量方面，較生脈散、紅景天藥理作用均更強，這是否表明丹參與生脈散配伍，產生了藥理協同作用，有待進一步研究。

表1各組急性缺氧相關生化指標比較（n=10）

查閱生脈散預防AMS的相關文獻，雖偶見臨床應用報道[4-6]，但在基礎藥理方面，研究還不夠全面、深入。而本課題較全面地研究了生脈散及其加味方劑對模擬高原環境下急性缺氧大鼠生化指標的影響，為合理應用生脈散類方劑預防AMS提供了更充分的實驗依據。