氣相色譜法測定果蔬類農產品中甲胺磷農藥殘留量的測量不確定度評定

季應明，錢海娟，林愛華

(海安市綜合檢驗檢測中心，江蘇海安 226600)

農業生產中果蔬類農產品農藥殘留量的控制已越來越受到生產經營者的重視，也是百姓關心、政府關注的突出問題。通過實驗室檢測掌握果蔬類農產品農藥殘留量狀況，可為農產品質量安全評價、風險分析、標準實施、行政執法、市場監管和產品外銷等提供技術保障和技術支撐。測量結果的可用性很大程度取決于測量結果不確定度的大小，因此，開展測量不確定度的評定[1-2]是實驗室提高檢驗結果可靠性的重要保障。筆者以氣相色譜法測定黃瓜中甲胺磷測量不確定度的評定為例，說明果蔬類農產品農藥殘留量測量結果不確定度的評定過程。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1供試樣品。當地某農副產品批發市場例行監測抽檢的空白黃瓜樣品加標。

1.1.2試劑。乙腈(色譜純)；丙酮(色譜純)；氯化鈉(分析純)，置于140 ℃條件下烘烤4 h；濾膜，0.2 μm有機溶劑膜。

1.1.3農藥標準品。100 μg/mL甲胺磷標準溶液，購自農業部環境保護科研監測所。

1.1.4儀器設備。氣相色譜儀Agilent7890A-FPD；色譜柱DB-17；食品加工器；高速勻漿機；電熱恒溫水浴鍋；電子天平(JM-202)；容量瓶(10 mL/A級、5 mL/A級)；分度吸量管(0.1 mL/A級、0.5 mL/A級、5.0 mL/A級)；單標線吸量管(10 mL/A級)。所有用到的儀器設備及量器均經檢查或校準，符合檢測規范要求。

1.2方法

1.2.1樣品處理。

1.2.1.1試樣制備。按GB/T 8855抽取黃瓜樣品，取可食部分，將其切碎，充分混勻放入食品加工器中粉碎，制成待測樣。

1.2.1.2提取。準確稱取25.00 g制好的試樣于高型燒杯中，加入甲胺磷0.03 mg/kg，加入提取溶劑乙腈50.0 mL，用高速勻漿機勻漿2 min后用濾紙過濾于裝有6 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，在常溫下靜置30 min，使乙腈相和水相充分分層。

1.2.1.3凈化。從具塞量筒中吸取10.00 mL乙腈溶液于150 mL 燒杯中，在80 ℃水浴鍋加熱蒸發至近干，將殘留物用5 mL丙酮分3次洗入5 mL試管中，最后用丙酮定容至5.00 mL 待測，進樣量1 μL，外標法定量，如溶液過于渾濁，過0.2 μm濾膜后待上機測定。

1.2.2色譜條件及色譜分析。色譜柱：DB-17；氮氣：流速60 mL/min；氫氣：流速75 mL/min；空氣：流速100 mL/min。進樣口溫度220 ℃，檢測器溫度250 ℃。由自動進樣器分別吸取1.0 μL標準溶液和凈化后的樣品溶液注入色譜儀中，以保留時間定性，以獲得的樣品溶液峰面積與標準溶液峰面積比較定量。

1.2.3結果計算。依據NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》[3]對果蔬類農產品中甲胺磷農藥殘留量進行測定。果蔬中甲胺磷農藥含量的計算公式：

ω=(V1×A×V3×ρ)/(V2×As×m)

(1)

式中，ω為樣品中甲胺磷測定濃度(mg/kg)；V1為提取溶劑總體積(mL)；A為樣品溶液中被測甲胺磷的峰面積；V3為樣品溶液定容體積(mL)；ρ為標準溶液中甲胺磷的質量濃度(μg/mL)；V2為用于檢測的提取溶液體積(mL)；As為甲胺磷標準溶液中被測甲胺磷的峰面積；m為試樣的質量(g)。

1.2.4不確定度計算方法。試驗結果的不確定度計算公式[2]：

相對不確定度計算公式：

urel(x)=u(x)/x×100%

(3)

2 結果與分析

從式(1)分析可知，甲胺磷農藥殘留量的測量不確定度主要來源：測量的重復性、樣品處理過程溶液的體積、樣品質量、被測農藥峰面積、標準溶液中被測農藥質量濃度等因素[4-7]。

2.1重復測量引入的不確定度按試驗方法對供試樣品及甲胺磷標準溶液樣品進行10次重復測量，測量覆蓋該方法全過程(表1)。

表1標準溶液與樣品濃度測定值

Table1Measuredvalueofstandardsolutionandsampleconcentration

測定次數Measured timesAAs樣品溶液甲胺磷濃度Sample solution methamidophos concentration∥μg/mL196.36279.530.026 0299.17282.170.026 6395.36273.950.025 8496.89275.150.026 2597.21274.160.026 3694.40281.290.025 6795.73276.500.025 9896.56280.600.026 1995.03281.120.025 71099.04273.020.026 5平均值Mean value96.58277.750.026 1標準差Standard devia-tion(S)1.593.540.000 33

將表1數據導入公式(2)，得出重復測量引入的不確定度為0.000 1 μg/mL，其相對不確定度為0.40%。

2.2樣品處理過程溶液體積引入的不確定度

2.2.1提取溶劑總體積V1引入的不確定度。試驗使用50 mL量筒，其最大誤差為±0.50 mL[8]，按均勻分布計算，量筒誤差引入的不確定度為u(V1)=0.289 mL、urel(V1)=0.58%。

2.2.2用于檢測的提取溶液體積V2引入的不確定度。試驗使用10 mL單標吸量管，其最大允許誤差為±0.020 mL，按均勻分布計算，用于檢測的提取溶液體積引入的不確定度為u1(V2)=0.012 mL、urel(V3)=0.12%。

2.2.3樣品溶液定容體積V3引入的不確定度。試驗使用5 mL刻度試管，其最大允許誤差為±0.1 mL，按均勻分布計算，樣品提取過程中由定容引入的不確定度為u(V3)=0.06 mL、urel(V3)=1.20%。

2.3樣品質量引入的不確定度樣品稱量所用的電子天平最小分度值為 0.01 g，稱量樣品25.00 g，查稱量使用的電子天平檢定證書，其最大允許誤差為±0.1 g，按正態分布計算，天平引入的不確定度為u(m)=0.058 g、urel(m)=0.23%。

2.4標準溶液引入的不確定度

2.4.1標準溶液中農藥質量濃度引入的不確定度。查標準品證書，甲胺磷標準儲備液的擴展不確定度為±0.16 μg/mL(包含因子k=2)，則標準物質的相對不確定度urel(ρ)為0.08%。

表2 標準溶液稀釋過程中不確定分量

2.5溶液中被測農藥峰面積引入的不確定度

2.5.1標準溶液中被測農藥峰面積As引入的不確定度。被測農藥色譜峰面積的不確定度主要來源于重復進樣引入的不確定度和進樣器的不確定度，由于色譜儀靈敏度很高，所以儀器穩定性即測定值分散性是構成峰面積測量不確定度的主要因素，儀器進樣量及儀器示值誤差可不必考慮。標準溶液連續測定10次，以濃度值的分散性代表峰面積的分散性。

根據公式(2)對表1峰面積數據進行計算，得出標準液測定峰面積引入的不確定度u(As)為1.12，根據公式(3)得出其相對不確定度urel(As)為0.40%。

2.5.2樣品溶液中被測農藥峰面積A引入的不確定度。樣品溶液中被測農藥峰面積引入的不確定度計算方法同“2.5.1”，u(A)=0.50、urel(A)=0.52%。

2.6合成標準不確定度將各分量相對不確定度進行合成，即得到測定農藥的相對合成標準不確定度(表3)。計算公式：

=2.06%

2.7擴展不確定度按置信概率p=95%，取k=2，則該供試黃瓜中甲胺磷殘留量測定的相對擴展不確定度為：urel=k×urel(ω)=4.12%。從表1可知，該供試樣品黃瓜中甲胺磷殘留量的最佳估計值為0.026 1 mg/kg，故其擴展不確定度為U95=0.026 1 mg/kg×4.12%=0.001 1 mg/kg。

2.8樣品測定結果的表示經測量分析，供試黃瓜樣品中甲胺磷殘留量為：X(甲胺磷)=(0.026 1±0.001 1)mg/kg(k=2)。

3 結論與討論

從試驗結果及不確定度分析數據來看，供試樣品加標黃瓜中甲胺磷農藥殘留量測定的測量不確定度主要來源為樣品處理中的樣品溶液定容體積、標液制備中的0.1 mL分度吸量管，其次為重復性測量、提取溶劑總體積及儀器的穩定性，其他因素影響較小。因此，通過選擇更高精度的移液、定容器皿，規范操作就可以有效減少不確定度，保證測量結果的準確、可靠。

表3相對合成標準不確定度分量

Table3Relativesyntheticstandarduncertaintycomponent

不確定度來源Source of uncertain-ty不確定度分量Uncertain component甲胺磷Methami-dophos%重復測量Repeated measurementurel(x)0.62樣品處理提取溶劑總體積urel(V1)0.58Sample processing用于檢測的提取溶液體積urel(V2)0.12樣品溶液定容體積urel(V3)1.20合成urel(V)1.34樣品稱量Sample weighingurel(m)0.23標準溶液制備0.1 mL分度吸量管urel(Vb1)1.20Preparation of 5.0 mL分度吸量管urel(Vb2)0.29standard solution5 mL容量瓶urel(Vb3)0.2310 mL容量瓶urel(Vb4)0.12合成urel(Vb)1.26儀器穩定性標準溶液峰面積urel(As)0.40Instrument stability樣品溶液峰面積urel(A)0.52合成urel(Ac)0.66合成標準不確定度Synthetic standard uncertaintyurel(ω)2.06