兒童OSAHS患者血清IL—17、IL—23的表達及意義

謝先榮　詹俊杰

【摘要】 目的：探討IL-17、IL-23在兒童OSAHS患者血清中的表達及意義。方法：選擇2017年1-9月期間佳木斯大學附屬第一醫院耳鼻喉科收治的4～12歲OSAHS患兒27例，健康門診進行常規體檢的正常兒童32例。OSAHS患兒組（試驗組）均行PSG檢查，健康兒童組（對照組）通過詳細的病史詢問排除OSAHS。血清學白細胞介素17（簡稱IL-17）及白細胞介素23（簡稱IL-23）檢測采用ELISA法。結果：試驗組血清IL-17、IL-23的含量均高于對照組，比較差異均有統計學意義（P<0.05）。結論：與健康兒童相比，兒童OSAHS患者IL-17及IL-23顯著提高，白細胞介素17及白細胞介素23在兒童OSAHS發病機制中可能有重要作用。

【關鍵詞】 睡眠呼吸暫停低通氣； 白細胞介素17； 白細胞介素23

Expression and Significance of Serum IL-17 and IL-23 in Children with Obstructive Sleep Apnea Hypopnea Syndrome/XIE Xianrong，ZHAN Junjie.//Medical Innovation of China，2018，15（13）：069-072

【Abstract】 Objective：To investigate the expression and significance of serum IL-17 and IL-23 in children with OSAHS.Method：27 cases of 4-12 years old children with OSAHS in ENT department of the first affiliated hospital of jiamusi university from January to September 2017 were selected.32 cases of normal children in health clinic for routine examination were selected.The children in OSAHS group （experimental group） were treated polysomnographic evaluations.The normal children group（control group） were excluded OSAHS by taking history carefully.Serum interleukin 17（IL-17） and interleukin 23（IL-23） were detected by ELISA method.Result：The levels of serum IL-17 and IL-23in the experimental group were higher than those in the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion：Compared with healthy children，the children with OSAHS have a significantly increasing level of IL-17 and IL-23，and interleukin 17 and interleukin 23 may play an important role in the pathogenesis of OSAHS in children.

【Key words】 Sleep apnea hypopnea； Interleukin 17； Interleukin 23

First-authors address：Jiamusi University，Jiamusi 154007，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.13.018

兒童OSAHS既是一種炎癥性疾病，同時，也是一種免疫性疾病。Tauman及其團隊的研究表明，呼吸睡眠紊亂的兒童血漿hs-CRP水平增加，并且與睡眠呼吸紊亂指數（AHI）、最低動脈血氧飽和度和覺醒指數的有明顯的相關性。睡眠呼吸紊亂的兒童存在間歇性出現的低氧血癥以及破碎的睡眠結構，這些是構成全身炎癥反應的基礎[1]。而近些年發現的促炎性細胞因子白細胞介素17（IL-17）和白細胞介素23（IL-23）則對這一發病機制進行了很好的補充。IL-17是由Th17細胞和各種細胞（包括免疫細胞和非免疫細胞）分泌的促炎性細胞因子。IL-17A和IL-17F由IL-17分泌細胞分泌，這兩種細胞因子可形成同源二聚體或異質二聚體，并與巨噬細胞、上皮細胞和內皮細胞形成IL-17受體復合物。導致炎癥反應如中性粒細胞浸潤、組織破壞和新生血管形成。IL-23可以促進激活的記憶細胞產生IL-17，對Th17細胞的維持和擴增有著重要的作用。目前IL-17及IL-23在兒童OSAHS方面的研究報道較少，本文擬通過對OSAHS患兒及健康兒童血清IL-17及IL-23的表達進行研究，以期探討兩者在兒童OSAHS中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇OSAHS患兒27例為試驗組，來自佳木斯大學附一院耳鼻喉科，就診時間為2017年1-9月；選擇同時期在健康門診進行常規體檢的正常兒童32例為對照組，通過詳細的病史詢問排除睡眠打鼾者。納入標準：年齡4～12歲；診斷符合《兒童阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診療指南草案（烏魯木齊）》[2]。排除標準：患有先天性疾病、哮喘、變應性鼻炎等過敏性疾病，肥胖患兒（參考國際肥胖工作組織推薦的標準）[3]。患兒家長均知情同意，該研究已經倫理學委員會批準。

1.2 試驗材料 IL-23和IL-17的ELISA試劑盒，上述試劑盒均購自欣博盛生物科技有限公司，整個實驗過程均按試劑使用說明嚴格操作。

1.3 試驗方法 多導睡眠呼吸監測OSAHS患兒在入院第1晚就行多導睡眠監測（多導睡眠監測系統是偉康公司生產的StrardⅡ型）。主要的監測項目有：血氧飽和度，脈搏，口鼻氣流。患兒均于入院第2天晨起空腹抽靜脈血3 mL進行血清中IL-17、IL-23的水平測定，在常溫自然凝固20 min，以

2 500 r/min進行離心，時間為20 min，收集上清液，-80 ℃冷凍保存待用；采用雙抗體夾心ABC-Elisa法進行血清IL-17、血清IL-23測定。

1.4 統計學處理 運用SPSS 19.0統計軟件，計量資料以M（Q）表示，組間比較采用秩和檢驗，使用Pearson相關分析分別對試驗組和對照組中的IL-23與IL-17的進行相關性檢測。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清中IL-17、IL-23的含量水平比較 試驗組IL-17、IL-23含量均明顯高于對照組，比較差異均有統計學意義（Z=-3.241、-1.971，P<0.05）。見表1。

2.2 兩組IL-23與IL-17的相關分析 試驗組血清IL-17含量與IL-23含量呈正相關，差異有統計學意義（r=0.564，P<0.05）；對照組血清IL-17含量與IL-23含量呈正相關，差異有統計學意義（r=0.544，P<0.05）。

3 討論

兒童睡眠呼吸疾病中以睡眠呼吸暫停綜合征（OSAHS）最為常見，不過其發病率報道不多。根據文獻統計，國外兒童打鼾的發病率的報道從4.9%～7.9%不等，伴呼吸暫停的發病率為0.9%～1.8%[4-6]，年齡和性別均沒有顯著差異；而國內的報道打鼾的發病率為2.2%，合并OSAHS的則為2.2%[7]。OSAHS使兒童夜間睡眠質量下降，睡眠期間微覺醒次數增多，導致神經認知功能的下降，引起包括注意力不集中、多動障礙等一系列癥狀[8-11]。OSAHS對兒童健康和發育有著長期的慢性影響[12-17]。兒童的腺樣體肥大和/或扁桃體肥大是最多見的病因，其他的還包括神經肌肉功能障礙，面顱骨發育畸形等。發生于OSA的全身性慢性炎癥提示，呼吸暫停低通氣指數與炎性細胞因子水平之間可能存在相關性[18-19]。張麗凈等[20]研究也指出：在對血清中的TNF-α和IL-4含量進行檢測發現，腺樣體肥大的患兒，這兩種物質的含量均有不同程度的提高，而且，升高的幅度與腺樣體肥大程度（A/N）有正相關性。目前，兒童OSAHS的病因、病理尚沒有像成人OSAHS一樣研究的那么清楚，但為大家公認的發病因素有：間接性低氧血癥、睡眠碎片化、局部或全身的炎癥反應，以及遺傳、個人體質等其他因素。最近有許多研究表明，全身或局部炎癥反應，均不同程度的存在于OSAHS兒童[1，21-22]。其中有兩種重要的細胞因子如IL-17及IL-23與兒童OSAHS存在著密切的相關性。Th1、Th2、Treg以及Th17等T細胞亞群都是由幼稚CD4+ T細胞分化形成。作為來源于T細胞的細胞因子IL-17，它于1995年被發現，因其可以與IL-6共同激活T細胞增殖而命名[23]。

IL-17又被稱作IL-17A，其和IL-17F都屬于IL-17家族。它們是細胞因子如IL-1、IL-6、IL-23刺激IL-17分泌細胞的產物。IL-17A與IL-17F既可以形成同源二聚體，還可以形成異質二聚體，這些二聚體再與IL-17炎癥相關細胞如巨噬細胞、上皮細胞和內皮細胞形成IL-17受體復合物。IL-1、IL-6和TNF-α等細胞因子既是活化的炎癥細胞的產物，又可以和炎性細胞共同刺激，導致中性粒細胞浸潤，組織破壞和新生血管形成，形成炎癥反應。IL-17對多種細胞靶點都有促炎性作用，這些細胞包括上皮細胞和內皮細胞、成骨細胞、單核/巨噬細胞和成纖維細胞。目前已被證明IL-17的主要功能在炎癥反應的效應階段[24]。呼吸系統的炎癥反應也有IL-17的參與，以致引起氣道的慢性炎癥[25-26]；哮喘患者中就可以檢測到IL-17F的高水平表達[27]。IL-17也與成人OSA有關聯：Th17/Treg（調節性T細胞）比例升高，血漿中細胞因子IL-6和IL-17的過度表達，微環境過度分泌的促炎性因子均可導致OSAHS的發展[28]。對OSAHS兒童來說，從扁桃體組織中可以檢測出來高含量細胞因子如IL-1b、IL-10、IL-17A，這表明炎癥反應活化了T細胞[29]。在本研究中，OSAHS兒童血清IL-17含量高于正常對照組，比較差異有統計學意義（P<0.05），這提示在兒童OSAHS的發病中，較高濃度的血清IL-17可能有著重要的作用。Oppmann等[30]最早發現了IL-23的存在。作為細胞因子IL-12家族的一員，不論是在小鼠，還是在人，激活的單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞和T、B細胞以及內皮細胞均有表達；其是異二聚體分子，單個獨特的p19亞基以及p40亞單位組成，而這個亞單位是與IL-12共享的；致病性CD+T細胞群擴增離不開IL-23。Aggarwal等[31]發現在IL-23存在的情況下活化的T細胞導致Th17細胞增殖，從而導致IL-17水平的增加。Th17反應的特征是生產的IL-17（以及其他炎性細胞因子）并且很大程度上靠IL-23來擴增和維持它們的表型，因此，出現了IL-23/IL-17軸的概念。關于IL-23/IL-17軸的研究陸續出現在銀屑病關節炎、過敏性紫癜以及過敏性鼻炎等炎癥性疾病中，這些研究結果顯示，IL-23/IL-17軸與炎癥性疾病有著密切的聯系[32-34]。本研究結果顯示OSAHS患兒血清IL-23的含量水平高于正常對照組，而且兩組血清中IL-23和IL-17濃度具有明顯相關性（試驗組相關系數r=0.564，P<0.05；對照組相關系數r=0.544，P<0.05；均屬正相關），這個結果也提示了存在IL-23/IL-17軸。綜上所述，青春前期的兒童中，OSAHS組患者有著較高的促炎性介質IL-17和IL-23的表達，兩者存在著相關性，這為幫助診斷小兒阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征以及提供治療后隨訪的潛在標記打開了新的思路。

筆者研究上也存在著一些不足：首先，筆者研究的對象是僅限于黑龍江東部地區，病源來源有限，若能將樣本來源擴大將能取得更好的效果；其次，樣本量偏少，以至于數據分布稍顯零散，是一個整體較低的數量，筆者會在今后的臨床工作累計更多樣本，以便于進行更深一層的研究與探討。

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（收稿日期：2017-01-23） （本文編輯：周亞杰）