某豬場不同生長期豬源大腸桿菌耐藥性分析

隆茂俊 姚曉慧 夏利寧（新疆農業大學動物醫學學院 830052）

大腸埃希氏菌是一種典型的革蘭氏陰性無芽胞直桿菌，大腸桿菌病養殖場中是危害嚴重的常見病和多發病，其發病率和死亡率位于仔豬疫病之首[1]，給豬場和養殖戶帶來巨大的經濟損失。一些豬場在預防和治療疾病的過程中盲目用藥、超劑量用藥，使細菌的耐藥率不斷攀升，耐藥譜不斷擴大，尤其是飼料中各種抗生素的添加，耐藥性大腸桿菌急劇增加，多重耐藥問題更加嚴重，給大腸桿菌的治療帶來困難，在增加治療成本的同時也給人類食品安全留下安全隱患。本研究對豬場不同生長期糞源大腸桿菌分離鑒定，分析其耐藥性，為該地區豬場大腸桿菌的綜合治療提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

通過肛拭子在健康仔豬直腸采集糞樣 （40日齡：100份；60日齡：179份）和妊娠母豬 （100份）；共379份。大腸桿菌標準質控菌為ATCC25922，購自杭州天和微生物試劑有限公司。麥康凱培養基、普通肉湯和Mueller-Hinton（MH）培養基均購自北京奧博星生物技術有限公司。阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋、氟苯尼考、環丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星、慶大霉素、安普霉素、阿米卡星藥品均為標準品，購自中國獸藥監察所。

1.2 試驗方法

參考美國臨床實驗室標準化委員會 （Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推薦的操作程序，采用瓊脂稀釋法檢測大腸桿菌對上述10種抗菌藥物的最小抑菌濃度（Minimal Inhibitory Concentration，MIC）值測定，以大腸桿菌ATCC25922作為質控菌株，根據CLSI標準進行結果判定。

2 結果與分析

2.1 不同生長期豬源大腸桿菌分離結果

不同生長期豬糞源的大腸桿菌分離情況見表1。

表1 不同生長期豬糞源的大腸桿菌分離情況

2.2 不同生長期豬糞源大腸桿菌耐藥結果

豬糞源大腸桿菌對10種臨床常用抗菌藥物的耐藥結果見表2。

表2 豬糞源大腸桿菌的耐藥率 （單位：%）

由表2可知，40d仔豬對阿莫西林、氨芐西林、氟苯尼考、環丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星6種藥物耐藥率較高，均在90%以上，慶大霉素和安普霉素次之，也分別為73.5%和45.8%，對頭孢噻呋和阿米卡星耐藥率較低，分別為12%和8.4%；60d仔豬對阿莫西林、氨芐西林、氟苯尼考、環丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星5種藥物耐藥率較高，在63～83%，對頭孢噻呋和阿米卡星耐藥率較低，分別為18%和0%；妊娠母豬對阿莫西林、氨芐西林、氟苯尼考、諾氟沙星、恩諾沙星、慶大霉素6種藥物耐藥率較高，在26.5～66.3%，對頭孢噻呋、安普霉素、阿米卡星3種藥物耐藥率最低，分別為0%、6.1%、0%。

2.3 不同生長期豬糞源大腸桿菌多藥耐藥結果

豬糞源大腸桿菌的多藥耐藥率見表3。

由表3可知，40日齡仔豬多藥耐藥主要以5耐、6耐和7耐為主，分別為19.3%、27.7%、42.2%，占89.2%；60日齡仔豬多藥耐藥主要以4耐、6耐和7耐為主，分別為18%、17%、18%，占53%；妊娠母豬多藥耐藥主要以2耐、3耐和4耐為主，分別為20.4%、22.4%、20.4%，占63.2%。

3 結論與討論

3.1 不同生長期豬糞源大腸桿菌耐藥比較分析

從耐藥結果看來，不同生長期豬源耐藥結果存在明顯差異，40日齡仔豬對10種藥物耐藥率主要集中在91.6～97.6%，60日齡仔豬對10種藥物耐藥率主要集中在63～83%，妊娠母豬明顯較低，耐藥率主要26.5～66.3%。仔豬耐藥率明顯大于妊娠母豬，其中40日齡仔豬耐藥率又明顯大于60日齡仔豬，仔豬的多藥耐藥程度也明顯大于妊娠母豬，這可能與仔豬隨著日齡增大斷奶，母源抗體逐漸降低，對疾病的抵抗力下降，生產中大量使用藥物，導致仔豬耐藥問題比妊娠母豬嚴重；分離的350份豬糞源大腸桿菌均對阿米卡星和頭孢噻呋較為敏感，呈一定的相似性，對其他8種藥物耐藥率相對都較高。整體來看，不同生長期豬糞源大腸桿菌對被檢測的大部分藥物均有較高的耐藥率，并且多藥耐藥現象嚴重。

3.2 與其他地區耐藥情況的差異

鄧均華等[2]2008年對武漢規模化養殖場分離鑒定出的73株大腸桿菌藥物敏感試驗研究表明，豬源性大腸桿菌僅對阿米卡星和大部分頭孢類抗菌藥物的耐藥率較低，對多數抗菌藥物均表現為較高的耐藥率，并呈現出嚴重的多重耐藥現象。李小成[3]對遼寧朝陽地區某豬場不同生長階段豬源大腸桿菌耐藥性調查結果顯示，各類豬群采集到的大腸桿菌對環丙沙星高度敏感，氧氟沙星對妊娠母豬和肥育豬分離到的大腸桿菌為高度敏感，對保育豬中度敏感，對哺乳仔豬不敏感，不同類別豬群豬源大腸桿菌對抗生素存在一定的耐藥性問題，尤其是哺乳仔豬對抗生素的耐藥種類上更為突出一些。這一結果與本試驗結果相一致。多藥耐藥結果顯示，仔豬糞源大腸桿菌以6～7耐為主，多藥耐藥水平與夏利寧[4]等報道相近。這種耐藥性的相似，與大腸桿菌疾病在臨床上普遍采用抗生素治療有關，在藥物使用過程中，把抗生素作為飼料添加劑，大劑量長期單獨使用一種藥物，使細菌的耐藥問題集聚發展，由不耐藥、單一耐藥逐漸發展到多重耐藥。

表3 豬糞源大腸桿菌的多藥耐藥情況

該縣主要的規模化養殖場豬源多藥耐藥現象較嚴重，建議以后治療大腸桿菌病時，科學合理使用抗生素，選取敏感性高的藥物，比如阿米卡星和頭孢噻呋等，以便提高治療效果。同時選出其他治療方案，如聯合用藥，疫苗防疫，血清的應用，微生態制劑的使用，以及提升圈舍的環境衛生，加強飼養管理措施等。