3個平菇品種搖瓶培養對比

孫玉祿

摘要：利用搖瓶培養的方式，根據菌絲生物量、溶液pH和培養液中還原糖質量分數篩選3個平菇品種進行液體培養的可行性。結果顯示：平8633菌絲生物量最大，菌球均勻，適應性較強，更適合用液體方式制作菌種。

關鍵詞：平菇；搖瓶培養；菌絲生物量；還原糖

中圖分類號：S646.1 文獻標志碼：A 文章編號：1001-1463（2018）05-0031-02

doi：10.3969/j.issn.1001-1463.2018.05.010

Study on Physiological Index Related with Pea Powdery Mildew

Resistance Induced by Erysiphe pisi

LU Jianying

（Gansu Academy of Agricultural Sciences，Gansu Lanzhou 730070）

Abstract：Taking eight different resistance to powdery mildew of pea varieties as the research object， we studied the relevant defence system changes of enzyme activity（SOD， POD， CAT）， chlorophyll content change rule between different varieties and different time after induced by Erysiphe pisi. The results showed that SOD activity were reduced after the first rise after infected as time change， SOD activity of resistant varieties were higher than susceptible cultivars； as time changePOD activity showed a trend of rising， POD activity of resistant varieties were higher than susceptible cultivars after infected； as time change CAT activity of most varieties were reduced after the first increase after infected； All varieties of chlorophyll content decreased after infected， which of resistantvarieties decline less than susceptible cultivars.SOD， POD activity change between varieties were significant difference. The ability of resistance to Powdery mildew of a pea variety is positively correlated with the activity of POD and the content of Chlorophyll.

Key words：Pea；Powdery mildew；Disease resistance；Defense enzyme；SOD；POD；CAT；Chlorophyll

平菇（Pleurtus ostrestus），別稱側耳，屬擔子菌亞門、傘菌目、口蘑科、側耳屬，是我國栽培最廣泛的食用菌之一，營養豐富，肉質細嫩，味道鮮美，具有較高的營養價值，是我國食用菌的主導品種。我國對平菇的栽培始于20世紀的70年代[1 ]，隨著食用菌生產機械化程度的提高，食用菌行業也逐漸步入了產業化、專業化、工廠化大規模生產的模式。液體菌種具有培養時間短、接種方便等優點，是食用菌制種產業的發展趨勢。目前關于開展平菇菌種液體培養的技術報道有很 多[2 ]，但尚未出現可完全替代固體菌種進行平菇栽培的成熟技術。鑒此，我們利用搖瓶培養的方式，根據菌絲生物量、溶液pH和培養液中還原糖質量分數篩選3個平菇品種（平菇615、平2002-4、平8633）液體培養的可行性，以期為平菇液體菌種工廠化生產過程控制提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種 平菇615、平2002-4、平8633，由遼寧省微生物科學研究院提供。

1.1.2 培養基 斜面培養基為PDA培養基；搖瓶培養基配方為：馬鈴薯20%、葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.05%、維生素B110 mg、水1 000 mL。

1.2 斜面菌種的活化

將菌種接于PDA斜面培養基上，于25 ℃恒溫培養，長滿斜面時作為搖瓶培養的一級菌種。

1.3 搖瓶菌種的制作與培養

用250 mL三角瓶，培養基裝量50 mL，于121 ℃、0.12 kPa壓力下滅菌30 min、冷卻后每瓶接入 1 cm2大小的斜面菌種，置黑暗處培養24 h。菌塊萌發后上搖床培養8 d，轉速178 r/min，培養溫度25 ℃，每天取1瓶檢測各項指標[3 ]。

1.4 指標測定

1.4.1 菌絲生物量 將三角瓶置于白色背景下觀察菌球大小、數量、均勻度，然后將溶液置離心機上離心10 min，轉速3 000 r/min。置恒重過的定性濾紙上過濾，再置60 ℃烘箱烘干至恒重，計算干重。

1.4.2 pH 用pH計測量。

1.4.3 還原糖 采用3，5-二硝基水楊酸法[4 ]測定。

2 結果與分析

試驗過程中觀察發現，平615菌球生長較快，在第2天即可多點萌生。但菌絲生物量最低；平2002-4菌球大小不一，且培養至第5天時，培養液稍顯渾濁；平8633菌球較均勻，生物量最高。從圖1可以看出，培養前2 d，菌絲生長緩慢，第3～6 天快速增長，隨著培養液中營養的消耗，菌絲生長速度開始下降。

整個過程中，溶液的pH一直呈增大趨勢，可能是由于菌絲分解培養液產生部分堿性物質和后期菌球自溶產生堿性物質有關，使培養液的pH略微升高（圖2）。還原糖質量分數于試驗前3 d快速增加，第5、6天又幾乎回落到初始水平（圖3）。說明第6天以后，培養液中的營養利用已接近尾聲，繼續培養，會增加菌絲的自溶。

3 小結與討論

試驗表明，就供試的3個平菇品種來說，同等條件下，平8633適應性較強，更適合液體方式制作菌種。若計劃大規模液體菌種栽培，還需要做后期的栽培出菇對比試驗，進一步驗證菌種的適應性。

平菇液體發酵培養，可以通過條件的摸索，找到不同品種的最適液體培養條件。平菇固體制種從母種到原種，再到栽培種，至少需要60 d左右。而液態深層發酵培養平菇菌種，則可快速生產菌絲體，縮短生產時間和成本。液態發酵食用菌菌種，不僅可以快速生產優質食用菌，還可以進一步利用液態發酵的食用菌蛋白質，改善食用菌生產對木屑等原料的粗獷利用和對大自然的破壞。從投資收入與產出的角度來看，建議使用液體深層發酵的方法生產平菇，這樣既可節省成本和時間，又可以獲得較高的投資收益。

參考文獻：

[1] 張金霞，陳 強，黃晨陽，等. 食用菌產業發展歷史、現狀與趨勢[J]. 菌物學報，2015，34（4）：525-540.

[2] 王 芳，張玉萍，孟麗君. 平菇液體菌種培養條件的研究[J]. 食用菌，2008（6）：21-22.

[3] 賀曉龍，任桂梅，王雪峰，等. 平菇液體培養檢測指標變化的研究[J]. 江蘇農業科學，2013，41（3）：208-209.

[4] 王蘭青，高玉千，戚元成，等. 平菇液體菌種搖瓶和發酵罐生長動力學模型的比較[J]. 食品與生物技術學報，2010，29（6）：927-930.

（本文責編： 劉 赟）