日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞免疫性能、血清生化和激素指標(biāo)及腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

代 航， 魯 曼，楊海明,2*， 王志躍,2，郁 鈞，鞠耿越，廖正軍

（1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州 225009；2.教育部農(nóng)業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品安全國(guó)際合作聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，江蘇揚(yáng)州 225009；3.建湖縣天和生態(tài)農(nóng)業(yè)專業(yè)合作社，江蘇建湖 224752）

火雞原產(chǎn)于美洲，是一種肉用高檔野味珍禽，具有食草性、節(jié)糧型等特點(diǎn)。在歐美國(guó)家很受歡迎，早已經(jīng)進(jìn)行規(guī)模化飼養(yǎng)（郭愛英等，2011）。我國(guó)于近年來(lái)才引進(jìn)的火雞，雖然飼養(yǎng)量不大，但因火雞較耐粗飼，抗病力強(qiáng)，容易飼養(yǎng)，屠宰率比肉雞高5%以上，肉中的蛋白質(zhì)含量較其他禽類高20%，并且脂肪含量較其他禽類低21%，膽固醇含量低，是較為理想的滋補(bǔ)佳品，因此發(fā)展前景十分可觀（羅治華，2009；何大參，1982）。

稻殼是一種價(jià)格低廉、產(chǎn)量豐富的農(nóng)副產(chǎn)品，其中的化學(xué)成分主要是粗纖維、木質(zhì)素、多聚戊糖等（AB等，1996），由于這些成分能占據(jù)稻殼的80%以上，所以稻殼的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極低，一般常作為飼料的填充劑或稀釋劑，在飼料中起到非營(yíng)養(yǎng)性的作用（夏圣榮等，2016）。稻殼作為一種廉價(jià)的粗纖維飼料來(lái)源，其對(duì)火雞血清生化和免疫的影響還鮮見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在研究雛火雞飼糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清生化指標(biāo)、免疫性能、激素水平及腸道結(jié)構(gòu)的影響，以期為后續(xù)研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取體重接近的健康1日齡貝蒂娜雛火雞100只，隨機(jī)分成2組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只，公母各半。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組飼喂添加稻殼粉的日糧。試驗(yàn)期為8周，試驗(yàn)日糧根據(jù)美國(guó)NRC（1994）火雞營(yíng)養(yǎng)需要配制的玉米-豆粕型日糧，對(duì)照組和試驗(yàn)組日糧的組成以及營(yíng)養(yǎng)水平見表1，配制成等能量、等蛋白的日糧。

表1 對(duì)照組和試驗(yàn)組日糧組成以及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理 育雛室前，嚴(yán)格按照衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對(duì)育雛室和育雛籠進(jìn)行打掃和消毒。在育雛籠進(jìn)行育雛，育雛室最初溫度保持在32～35℃，濕度保持在65%～70%。以后每周溫度降低3℃，保持溫度在20℃左右。5日齡前給予24 h光照，方便雛火雞采食和飲水，7日齡減少為20 h，以后逐漸減少到14 h。光照強(qiáng)度在前5天內(nèi)因雛火雞的視力差，使用50 W白熾燈，4～14日齡減為25 W，以后可減到10 W。采用自由采食、自由飲水的方式飼養(yǎng)，每天記錄采食量。免疫和飼養(yǎng)管理均按照雛火雞的飼養(yǎng)管理的程序進(jìn)行。

1.3 測(cè)定指標(biāo)

1.3.1 血清生化指標(biāo) 56日齡早晨稱重，從各重復(fù)中隨機(jī)選取2只與平均體重最為接近的雛雞,翅靜脈采血5 mL，緩緩注入促凝試管中,傾斜試管,靜置 30 min后，3000 r/min離心 10 min，用移液槍吸取血清并將其注入血清管中，測(cè)定血清中堿性磷酸酶、總膽固醇、甘油三酯、鈣、磷、總蛋白、球蛋白、白蛋白的含量。

1.3.2 免疫器官 將采血后的火雞宰殺、放血、解剖后，取雛雞脾臟、胸腺和法氏囊稱重，根據(jù)脾臟、胸腺和法氏囊的重量與相應(yīng)雛火雞活體重量的比值計(jì)算脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)。

免疫器官指數(shù)=免疫器官重（mg）/活重（g）。

1.3.3 激素指標(biāo) 將離心好的血清分裝入1mL離心管中，-20℃保存，用于測(cè)定胰島素（Ins）、生長(zhǎng)激素（GH）、類胰島素生長(zhǎng)因子（IGF-I）。Ins、GH和IGF-I的濃度采用放射免疫分析法測(cè)定，試劑盒由北方生物技術(shù)研究所提供。

1.3.4 腸道結(jié)構(gòu) 分離十二指腸、空腸和回腸，擠出腸道內(nèi)容物，用生理鹽水輕輕沖洗內(nèi)容物。取十二指腸、空腸、回腸的組織樣本，通過甲醛固定，酒精脫水和二甲苯透明，再通過浸蠟和包埋等處理，用Leica切片機(jī)切片（5 μm），后經(jīng)蘇木精-伊紅染色，最后用中性樹膠封片。

采用Image-prolus圖像分析系統(tǒng)測(cè)量十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、絨毛寬度、隱窩深度、肌層厚度，并計(jì)算絨毛高度／隱窩深度的比值（V/C）。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn),數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析。

2 結(jié)果

2.1 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清生化指標(biāo)的影響 由表2可知，在雛火雞日糧中添加稻殼粉，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組血清中堿性磷酸酶、鈣和磷的含量分別降低4.09%、1.74%和3.26%（P＞0.05），試驗(yàn)組血清中總膽固醇和甘油三酯含量分別增加2.25%和2.27%（P＞0.05）。

表2 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清生化指標(biāo)的影響

2.2 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清免疫指標(biāo)的影響 由表3可知，在雛火雞日糧中添加稻殼粉，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白含量分別降低1.68%、1.37%和1.42%（P ＞ 0.05）。

表3 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清免疫指標(biāo)的影響

2.3 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞免疫器官的影響 由表4可知，在雛火雞日糧中添加稻殼粉，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組脾臟重、胸腺重和法氏囊重分別增加 36.08%、28.48%和 25.17%（P＜0.05），試驗(yàn)組脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)分別提高4.46%和4.97%（P＞0.05），試驗(yàn)組胸腺指數(shù)降低1.32%（P ＞ 0.05）。

表4 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞免疫器官的影響

2.4 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞激素水平的影響 由表5可知，在雛火雞日糧中添加稻殼粉，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組血清胰島素和生長(zhǎng)激素水平分別增加3.78%（P＞0.05）和11.97%（P=0.067），試驗(yàn)組血清胰島素樣生長(zhǎng)因子水平降低0.78%（P ＞ 0.05）。

表5 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞激素水平的影響

2.5 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞腸道結(jié)構(gòu)的影響 由表6可知，在雛火雞日糧中添加稻殼粉，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組十二指腸的絨毛高度、絨毛高度/隱窩深度的比值（V/C）和肌層厚度分別增加23.34%、44.54%和 33.26%（P＜0.05）,隱窩深度減少15.66%（P＜0.05），絨毛寬度增加31.54%（P=0.053）。試驗(yàn)組和對(duì)照組相比，試驗(yàn)組空腸的絨毛高度和肌層厚度分別增加26.07%和23.43%（P ＜ 0.05），絨毛寬度增加 5.77%（P ＞ 0.05），隱窩深度減少15.41%（P＜0.05），V/C增加41.10%（P＜0.01）。試驗(yàn)組和對(duì)照組相比，試驗(yàn)組回腸的絨毛高度和隱窩深度分別減少 2.17%和11.69%（P＞0.05），絨毛寬度和V/C分別增加10.03%和11.07%（P ＞ 0.05），肌層厚度增加12.04%（P ＜ 0.05）。

表6 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞腸道結(jié)構(gòu)的影響

3 討論

3.1 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清生化指標(biāo)的影響 堿性磷酸酶在機(jī)體代謝中起著關(guān)鍵的作用，其活性的高低會(huì)影響體內(nèi)膽固醇、甘油三酯和游離脂肪酸的含量，還可催化焦磷酸分解,促進(jìn)骨鹽的沉積（劉濤等，2011）。 周世霞（2006）研究發(fā)現(xiàn)，不同纖維水平日糧對(duì)鵝血清中的堿性磷酸酶沒有顯著影響。曹向陽(yáng)（2010）在粗纖維對(duì)固始雞的研究上也證明了這一點(diǎn)。本試驗(yàn)中對(duì)照組和試驗(yàn)組血清中堿性磷酸酶的含量沒有顯著的差異，與上述研究結(jié)果一致。

血清中總膽固醇和甘油三酯是反映動(dòng)物機(jī)體脂類代謝是否正常的重要指標(biāo)。高文俊（2003）在提高雞日糧中粗纖維水平的研究中發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組機(jī)體血清中膽固醇和甘油三脂的含量與對(duì)照組相比顯著降低，這與周世霞（2006）的研究一致，說(shuō)明粗纖維有降低血脂的作用。而本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組血清中的膽固醇和甘油三酯含量沒有顯著降低，這一結(jié)果還有待研究。

飼糧中的纖維物質(zhì)會(huì)影響礦物質(zhì)及微量元素的吸收（彭藝等，2000）。 曹向陽(yáng)（2010）研究發(fā)現(xiàn)，隨著日糧中粗纖維的水平增高，雞血清中鈣和磷的含量逐漸降低。本試驗(yàn)也得到相同的結(jié)果，雖然沒有達(dá)到顯著水平，但是試驗(yàn)組雛火雞血清中的鈣、磷含量有所降低，原因可能是日糧中的粗纖維含量還沒達(dá)到顯著影響礦物質(zhì)吸收的水平。

3.2 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清免疫指標(biāo)的影響 血清中的總蛋白是由肝臟合成，其可參

與機(jī)體蛋白質(zhì)的代謝，白蛋白是參與機(jī)體免疫機(jī)能的血清蛋白，球蛋白則可反映機(jī)體抵抗力的強(qiáng)弱。朱曉春等（2014）研究發(fā)現(xiàn)，不同纖維源對(duì)揚(yáng)州鵝蛋白質(zhì)代謝無(wú)顯著影響。張玲等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，高纖維水平日糧的仔鵝血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白的含量有下降的趨勢(shì)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組雛火雞血清中總蛋白和白蛋白的含量有所下降，與對(duì)照組差異不顯著。說(shuō)明粗纖維對(duì)雛火雞蛋白質(zhì)的代謝有一定的影響，而沒達(dá)到顯著水平，說(shuō)明雛火雞對(duì)粗纖維有較強(qiáng)的耐受能力。

3.3 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞免疫器官的影響 脾臟、胸腺和法氏囊是禽類重要的免疫器官，其可參與機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫。免疫機(jī)能的強(qiáng)弱和免疫器官重量大小呈正相關(guān) （黃冠慶，2003）。張權(quán)等（2010）研究表明，肉雞日糧中添加竹源纖維提取物可以調(diào)節(jié)雞的免疫器官發(fā)育。王曄和于輝（2015）研究表明，日糧一定的粗纖維水平對(duì)鵝的免疫器官發(fā)育有促進(jìn)作用，免疫器官指數(shù)呈先上升后降低的趨勢(shì)，且差異不顯著。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在雛火雞日糧中添加稻殼粉使雛火雞的脾臟、胸腺和法氏囊重量顯著增加，而對(duì)雛火雞的免疫器官指數(shù)沒有顯著的影響，原因是粗纖維的添加不僅促進(jìn)免疫器官的發(fā)育，同時(shí)也促進(jìn)了雛火雞體重的增加。

3.4 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞激素指標(biāo)的影響 胰島素（Ins）能促進(jìn)糖元、脂肪和蛋白質(zhì)的合成代謝,生長(zhǎng)激素（GH）和類胰島素生長(zhǎng)因子（IGFI）主要是調(diào)控動(dòng)物的生長(zhǎng)。劉長(zhǎng)忠等（2008）研究發(fā)現(xiàn)，隨著日糧纖維水平的增加，鵝血清中Ins、GH、IGF-I的濃度呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，Ins各處理組之間差異不顯著，GH和IGF-I的濃度以5%和7%的粗纖維水平為最高。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在雛火雞日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞血清中Ins、GH和IGF-I的濃度無(wú)顯著的影響，但試驗(yàn)組GH的濃度有增加的趨勢(shì)，與上述研究基本一致。

3.5 日糧中添加稻殼粉對(duì)雛火雞腸道結(jié)構(gòu)的影響 小腸是動(dòng)物機(jī)體消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要場(chǎng)所，其正常的結(jié)構(gòu)和功能是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被充分利用的重要保證。日糧中添加一定量的粗纖維有助于家禽維持消化道的正常生理結(jié)構(gòu)和功能。謝燕娟等（2016）研究表明，在鵝日糧中添加稻殼粉可顯著提高十二指腸和空腸的絨毛高度，降低空腸的隱窩深度，增加回腸的肌層厚度。Jankowski等（2013）在火雞日糧中添加2種不同類型小麥,研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)全谷物小麥組顯著降低了十二指腸隱窩深度，增加了肌層厚度。李青竹等（2014）研究不同纖維源對(duì)吉林白鵝腸道形態(tài)學(xué)發(fā)育的影響，試驗(yàn)結(jié)果表明不同的纖維源均可增加小腸不同腸段絨毛高度／隱窩深度的比值，小腸各段消化與吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力不斷增強(qiáng)。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在雛火雞日糧中添加稻殼粉能顯著增加十二指腸和空腸的絨毛高度、V/C和肌層厚度，降低隱窩深度，增加回腸的肌層厚度，這說(shuō)明火雞的食草性使其對(duì)粗纖維有一定的耐受性。日糧中添加粗纖維可以促進(jìn)雛火雞小腸絨毛的生長(zhǎng)，刺激胃腸道的蠕動(dòng)，增加腸道肌層厚度，從而增強(qiáng)消化吸收能力。

4 結(jié)論

在雛火雞日糧中添加稻殼粉，對(duì)雛火雞的血清生化指標(biāo)沒有顯著的影響，能促進(jìn)免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育，提高免疫性能、血清中胰島素和生長(zhǎng)激素水平，顯著改善小腸腸道結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)消化吸收能力，促進(jìn)雛火雞的生長(zhǎng)發(fā)育。