載脂蛋白E基因多態性與Alzheimer病和血管性癡呆的關系研究

邢麗菲 王敏 檀素娟 王艷紅

【摘要】目的 本次實驗課題主要探討載脂蛋白E基因多態性與血管性癡呆和Alzheimer病的關系。

方法 選取2013年2月～2018年2月我院住院以及門診收治的血管性癡呆患者80例（VD組）與Alzheimer病患者75例（AD組）作為研究對象，另選取健康人群120例作為正常組，均采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性方法進行檢測，對比三組等位基因頻率和載脂蛋白E基因型。結果 AD組載脂蛋白Eε4等位基因頻率、ε3/ε4基因型頻率分別為17.8%、24%，VD組為 20.6%、26.25%，正常組為5.8%、10.83%，AD組、VD組載脂蛋白Eε3/ε4基因型、ε4等位基因頻率明顯高于正常組，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 載脂蛋白Eε4等位基因是Alzheimer病和血管性癡呆疾病的危險因素。

【關鍵詞】載脂蛋白E基因多態性；Alzheimer病；血管性癡呆

【中圖分類號】R749.13 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.22..02

在老年期癡呆疾病中，發病率最高的是血管性癡呆疾病和Alzheimer病，載脂蛋白E基因是散發性、遲發性Alzheimer病最主要的遺傳易感因素，也是作為影響人體老化的重要因素，還是腦血管疾病、動脈粥樣硬化的易患病因素，還與人體認知功能存在緊密的相關性，本文主要對Alzheimer病、血管性癡呆疾病的載脂蛋白E基因多態性進行分析和

檢測，并與健康人群進行對比，從而探討兩者之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年2月～2018年2月我院住院以及門診收治的血管性癡呆患者80例（VD組）與Alzheimer病患者75例（AD組）作為研究對象，均符合語言機能障礙、美國神經病學、AD以及VD疾病的臨床診斷標準，另選取健康人群120例作為正常組。其中，VD組女32例，男48例，年齡58～84歲，平均年齡（72.4±1.41）歲，病程1.4～6.5年，平均病程（4.29±1.25）年，排除缺血缺氧性腦病史、遺傳性血管病者，所有患者均合并動脈粥樣硬化性腦血管疾病；AD組男42例，女33例，年齡64～80歲，平均年齡（73.5±4.96）歲，病程2.2～8.3年，平均病程（4.96±1.42）年；正常組女69例，男51例，年齡61～85歲，平均年齡（71.6±8.22）歲，排除糖尿病、腦血管病、認知功能障礙者。三組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P<0.05）。

1.2 方法

①提取DNA：取全部參研樣本5 mL靜脈血，抗凝處理后，提取血液中外周血白細胞基因組DNA[1]；②載脂蛋白E基因多態性檢測：應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性方法進行檢測，采用ABIPE公司生產的9700型PCR儀器，在25 μL PCR反應體系中主要包含了25 μL 10×PCR反應緩沖液，0.5 μL DMSO，0.5 μL下游引物和上游引物（50 μmol/L），0.5～1 μg DNA模板，25 μL MgCl2

（25 mmol/L），Phamacia公司生產的1.5 μL dNTPs

（2 mmol/L），欣經科生物技術公司生產的1UTaq DNA聚合酶。載脂蛋白E基因進行酶解、PCR擴增以及電泳檢測（使用北京六一儀器廠生產的垂直電泳儀，配合Bio-Rad公司生產的凝膠成像系統進行檢測），根據載脂蛋白E基因擴增的產物進行多態分析[2]。

1.3 統計學方法

采用SPSS 23.0統計學軟件對數據進行處理，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗；計數資料以百分數（%）表示，采用x2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 載脂蛋白E基因頻率

AD組、VD組攜帶ε4基因型的頻率高于正常組，差異有統計學意義（P<0.05），但VD組和AD組比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 載脂蛋白E等位基因頻率

VD組ε2、ε3、ε4等位基因頻率分別為5.1%、74.2%、20.6%，AD組ε2、ε3、ε4等位基因頻率依次為6.2%、76.1%、17.8%，正常組依次為10.4%、84.2%、5.8%，正常組ε4等位基因頻率低于VD組、AD組，差異有統計學意義（P<0.05），AD組與VD組ε4等位基因頻率比較，差異無統計學意義（P>0.05）。

2 討 論

散發性或家族性Alzheimer病中一個至關重要的危險因素是載脂蛋白Eε4等位基因，β淀粉樣蛋白能夠與載脂蛋白E進行結合，呈現出特異性，且ε4的特異性小于ε3、ε2的特異性[3]。人體神經元在攝取載脂蛋白E受體的同時，還將攝入Aβ，從而減少了細胞的外毒性。從超微結構以及細胞免疫研究結果發現，軸突中載脂蛋白Eε4和神經元細胞體能夠抑制軸突生長，引起微管解聚，細胞微管蛋白在經過載脂蛋白Eε4處理后會變少[4]。載脂蛋白Eε4能夠阻止重建正常神經元，同時還能夠加快聚集成神經原纖維纏結的速度和雙螺旋絲的形成，同樣的載脂蛋白E與膽堿能神經元損害和腦淀粉樣血管病變的關系較為密切。非癡呆性認知功能障礙會受到載脂蛋白Eε4的影響，同樣載脂蛋白Eε4也是認知功能障礙的重要危險因素[5]。

綜上，載脂蛋白E基因多態性可能是血管性疾病以及腦病變疾病中的相關因素之一，與癡呆疾病的關系需要更多的研究進行證實。

參考文獻

[1] 張 斌，陳 偉，張 嶸，徐 芳，李 蔚.中國人載脂蛋白E基因多態性與輕度認知功能損害關系的Meta分析[J].東南大學學報（醫學版），2015，34（01）：83-87.

[2] 孟 強，張雪海，張新衛.中國人群載脂蛋白E基因多態性與高脂血癥關系的Meta分析[J].中國預防醫學雜志，2015，16（04）：304-307.

[3] 魏法權，王 帥，劉學謙，程希富，何 毅.中國人群載脂蛋白E基因多態性與他汀類藥物療效關系的Meta分析[J].臨床薈萃，2015，30（05）：486-491.

[4] 吳祖榮，陳宗存，符茂雄，陳金逸，韓隆元，周麗華，黃亞蓮，王 毅.中國人載脂蛋白E基因多態性與2型糖尿病合并冠心病關系的Meta分析[J].臨床和實驗醫學雜志，2015，14（12）：982-985.

[5] 謝愛玲，張玉榮，劉小慶.載脂蛋白E基因多態性與動脈粥樣硬化性腦梗死關系的Meta分析[J].中國醫學創新，2016，13（26）：100-103.

本文編輯：劉欣悅