P16與Ki67在宮頸病變中表達的臨床意義

周文超1，趙衛紅

(1.山西衛生健康職業學院，山西 太原 030012；2.山西醫科大學第二醫院，山西 太原 030002)

宮頸癌是女性臨床常見的惡性腫瘤之一，其發病率僅次于乳腺癌，嚴重威脅著女性的生活和工作。近年來，隨著人們生活習慣的改變與社會壓力的增加，宮頸癌的發病率逐年上升，并呈現年輕化的趨勢。宮頸癌的發病是一個漸進的過程，有研究顯示由正常宮頸發病進展為宮頸癌需要約8～12年，其發病、進展及預后同腫瘤抑制基因P16及增殖細胞核抗原Ki67具有重要關系[1]。本研究通過免疫組化方法，觀察P16、Ki67在正常宮頸組織、宮頸上皮內瘤變及宮頸癌內的表達情況，分析二者與宮頸疾病發生的關系，現將結果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選取山西醫科大學第二醫院2017年收治的106例已行宮頸活檢或手術的患者為研究對象，年齡27～72歲，平均(42.6±6.8)歲。患者均經宮頸活檢或手術切除標本，依據2014年第四版WHO女性生殖器官腫瘤分類標準，其中子宮頸上皮內瘤變(CIN)患者70例，包括CIN I患者21例，CIN II患者25例，CIN III患者24例；子宮頸癌患者36例，全部患者在接受采集標本前均未接受放射治療、化學治療及免疫治療。同時另選取醫院同期15例正常宮頸組織作為對照組。

1.2 方法

本實驗標本均采用甲醛進行固定，石蠟包埋后切片，每片厚度4μm，采用Envision免疫組化方法進行處理染色，陽性對照選用已知的陽性切片，陰性對照參照物選用PBS緩沖液進行。

1.3 診斷標準

本實驗以患者宮頸活檢結果或標本病理檢查為診斷標準，切片由兩位不同的副主任以上職稱病理醫師閱片，診斷結果統一時作為最終診斷，診斷有差異時請另一副主任以上職稱病理師會診并商議最終診斷。P16染色陽性表達部位為細胞核或細胞質，表現為棕黃色的顆粒。Ki67表達部位主要在細胞核，表現為棕黃色顆粒形態。兩種表達情況均根據染色細胞的多少與強弱，按照四級定量法，陰性(-)為<5%，弱陽性(+)為5%～25%，陽性(+ +)為26%～50%，強陽性(+ + +)為>50%[2]。

1.4 統計學方法

本研究全部數據均采用SPSS15.0統計學軟件進行分析，其中計數資料以率(%)表示，兩組間數據比較采用χ2檢驗進行。數據間相關性分析采用spearman等級相關法進行分析，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 P16在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達情況

在正常宮頸組織(對照組)中P16表達為陰性，伴隨宮頸病變的不斷加重，P16在CIN I、CIN II、CIN III、子宮頸癌中的陽性率分別為57.14%、80.00%、87.50%、100.00%，P16在正常組織中的表達同子宮頸上皮內瘤變(CIN)、子宮頸癌相比較，陽性率明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 P16在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達情況

注：1)為CIN與正常宮頸組織比較，χ2=30.17，P<0.05；

2)為子宮頸癌與正常宮頸組織比較，χ2=46.30，P<0.05

2.2 Ki67在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達情況

在正常宮頸組織(對照組)中Ki67表達為陽性率為6.67%，伴隨宮頸病變的不斷加重，Ki67在CIN I、CIN II、CIN III、子宮頸癌中的陽性率分別為61.90%、84.00%、91.67%、100.00%，P16在正常組織中的表達同子宮頸上皮內瘤變(CIN)、子宮頸癌相比較，陽性率明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 Ki67在正常宮頸組織及宮頸病變中的表達情況

注：1)為CIN與正常宮頸組織比較，χ2=26.84，P<0.05；

2)為子宮頸癌與正常宮頸組織比較，χ2=41.75，P<0.05

2.3 P16、Ki67的表達與宮頸病變的關系

P16宮頸病變的的檢測中其敏感性為83.96%(89/106)，采用spearman相關分析，在子宮頸病變的檢測中，P16的表達與子宮頸病變嚴重程度呈正相關(r=0.692,P<0.05)。Ki67宮頸病變的的檢測中其敏感性為90.57 %(96/106)，采用spearman相關分析，在子宮頸病變的檢測中，Ki67的表達與子宮頸病變嚴重程度呈正相關(r=0.343,P<0.05)。

3 討論

宮頸癌是臨床上常見的一種婦科惡性腫瘤，其發病、發展是一個緩慢、漸進的過程，近年來的臨床研究顯示，宮頸癌的發病呈現出上升且年輕化的趨勢。在早期的宮頸病變中，其臨床表現往往因不具備特異性而被忽視或漏診，尤其是對于無癥狀及體征的早期宮頸病變。臨床上為進行宮頸病變篩查常用的方法為液基薄層細胞學檢查和雜交捕獲Ⅱ代法人乳頭瘤病毒(HPV HC-Ⅱ)檢測，液基薄層細胞學檢查方法帶有一定的主觀性質且受診斷醫師的水平影響，檢測結果存在一定的誤差；HPV檢測只能檢測HPV的感染情況，對于HPV在感染細胞中的存在狀態不能提示，同時有研究顯示，大部分HPV感染患者為亞臨床型或者是自限性感染，90%的感染患者可以清除HPV自愈。因此臨床研究一直在研究如何采用特異度與敏感性較高的標志物輔助臨床篩查，從而提高臨床診斷的準確率。

P16作為一種新發現的抑癌基因1994年由Kamp報道，其在腫瘤中缺失、突變等均會導致細胞增殖周期出現紊亂，從而導致細胞無限增殖甚至發生癌變，有研究顯示其在多種惡性腫瘤中失活或缺失[3]。近年來臨床研究顯示P16在宮頸癌及癌前病變中幾乎100%出現過度表達，其不僅與癌癥有關，與上皮內瘤變亦有密切關系[4]。本研究結果顯示，在正常宮頸組織(對照組)中P16表達為陰性，伴隨宮頸病變的不斷加重，P16在CIN I、CIN II、CIN III、子宮頸癌中的陽性率逐漸增高，P16宮頸病變的的檢測中其敏感性為83.96%，在子宮頸病變的檢測中，P16的陽性表達與子宮頸病變嚴重程度呈正相關。Ki67作為細胞增殖活性的一種標志物，其陽性表示表示細胞發生增殖的活性，有研究發現，Ki67在正常宮頸組織、CIN以及宮頸癌中的表達呈現逐漸增高的態勢[5]，本研究結果顯示隨著宮頸病變的不斷加重Ki67表達的陽性率逐漸增加，Ki67的陽性表達與子宮頸病變嚴重程度呈正相關。

綜上所述，P16及Ki67在宮頸上皮內瘤變及宮頸癌中具有較高的敏感性，對于子宮頸癌及癌前病變的檢測、判斷具有重要意義，可以作為臨床診療中的重要依據，有利于疾病的早期發現與治療。