珍珠透骨草藥材的質量標準研究

楊瑞虹，王知平，李 梅，郭愛華，徐變珍，徐麗萍

(山西衛生健康職業學院，山西 太原 030012)

珍珠透骨草，別名透骨草、山花椒(山西臨汾)，為大戟科植物地構葉Speranskia tuberculata (Bge.)Baill.的干燥全草。始載于《本草原始》，現收錄于1987年版《山西省中藥材標準》(簡稱《山西87》)[1]和《中國藥典2010版》(一部)[2]的附錄中。珍珠透骨草為山西習用藥材，能夠祛風除濕，活血止痛。用于風濕痹痛，筋骨攣縮，寒濕腳氣，瘡癬腫毒。但在《山西87》中的標準簡單，僅有性狀描述，為完善該藥材的質量標準，本研究對薄層鑒別條件、浸出物測定、水分測定、總灰分和酸不溶性灰分測定等做了較系統的研究，制定了該藥材的質量標準。

1 儀器與試藥

FA1104-型電子分析天平(上海精科)，SX-25-10型箱式電阻爐(浙江省嘉興市新騰電器制造廠)，202-Ο型臺式干燥箱(北京市永光明醫療儀器廠)，P-薄層色譜展開缸(上海信誼儀器廠)，W-5微量進樣器(寧波市鎮海三愛儀器廠)，DZKW電子恒溫水浴鍋(北京市永光明醫療儀器廠)，硅膠G預制薄層板(青島海洋化工集團)，木犀草素標準品(中國藥品生物制品檢定所 批號：111520200504)，化學試劑均為分析純，水為純凈水。

實驗用樣品共11批(樣品批號及產地、購地及批號，見表1)，經省藥檢所專家高天愛主任藥師鑒定，均系大戟科植物地構葉Speranskia tuberculata (Bge.)Baill.的干燥飲片或藥材。

表1 實驗用珍珠透骨草樣品

注：20111006號樣品系采自太原南郊的新鮮全草，經高天愛老師鑒定，品種準確，特作為對照藥材使用。

2 方法與結果

2.1 薄層色譜鑒定

2.1.1 供試品溶液的制備 稱取藥材粉末2 g ，95%乙醇30mL超聲提取30 min，濾過，濾液減壓回收溶劑至干，殘留物加蒸餾水10 mL，用石油醚(30～60℃)10 mL振搖萃取脫色，水層溶液用正丁醇萃取(10 mL×3次)，合并正丁醇萃取液，減壓回收溶劑至干，殘留物用2 mL乙醇溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對照藥材溶液的制備 依2.1.1項下方法，制成對照藥材溶液。

2.1.3 薄層鑒別 分別吸取20111001～20111005批號和20111007～201110011批號的樣品溶液及對照藥材溶液各5μL，點于硅膠G薄層板和默克硅膠G板上，用10 mL甲苯-乙酸丁酯-甲酸(3.5∶1.2∶1.5 上層液)展開劑展開約8 cm，取出，晾干，噴以10%H2SO4乙醇溶液，105 ℃加熱至斑點顯色清晰，置于365 nm紫外分析儀下觀察，對照品藥材與供試藥材在相同的位置上均出現相同的斑點。見圖1和圖2。

2.2 醇浸出物測定

2.2.1 測定方法 綜合考慮藥材主要成分的溶解性及浸出效果，以薄層色譜行為為指標，對浸出溶劑和浸出方法及時間進行了考察，選定以75%乙醇作為提取溶劑，加熱回流提取30 min制備浸出物測定的樣品溶液。按照《中國藥典》2010版一部附錄ⅩA 的測定方法測定。

2.2.2 測定結果 11個批次不同產地珍珠透骨草藥材醇溶性浸出物測定結果。見表2。

圖1珍珠透骨草樣品在默克硅膠G板上的展開圖譜

Fig1ExpansionMapofExtractivesofSperanskia
Tuberculata(Bge.)BaillonMerckSiliconeGBoard

圖2 珍珠透骨草樣品在自制硅膠G板上的展開圖譜

(注：圖1和圖2中，1～11依次為20111001～201110011批號的樣品溶液，其中6為對照藥材溶液)

表2 珍珠透骨草浸出物測定結果

2.3 水分、總灰分、酸不溶性灰分的測定

2.3.1 測定方法 水分測定按照《中國藥典》2010版一部附錄Ⅸ H第一法測定11批藥材的水分。總灰分、酸不溶性灰分測定按照《中國藥典》2010年版一部(附錄Ⅸ K)中總灰分、酸不溶性灰分測定法測定樣品11批藥材的總灰分、酸不溶性灰分。

2.3.2 測定結果 11個批次不同產地珍珠透骨草藥材水分測定值、總灰分測定值及酸不溶性灰分測定值。見表3。

表3 珍珠透骨草水分、總灰分、酸不溶性灰分測定結果±s)

2.4 性狀和顯微鑒別

本研究利用性狀鑒別和顯微鑒別兩種方法對珍珠透骨草的生藥學特征進行了研究。結果表明，珍珠透骨草藥材性狀、葉橫切面、葉表皮撕片、藥材粉末特征均具有形態學規律，對其生藥鑒定有實際意義[3]。

3 討論

根據11個批次不同產地珍珠透骨草藥材測定值，在去掉異常值后，在最高值基礎上，上浮10%作為測定上限，故暫定珍珠透骨草藥材水分限度為不得過8.0%、總灰分限度為不得過15.0%，酸不溶性灰分不得過3.0%。

醇溶性浸出物測定中去掉異常值后，以最低值下浮20%設為浸出物測定下限，故暫定醇溶性浸出物不得少于8.5%。

范云柏等[4]從該植物中曾分離得到6個黃酮類化合物，分別是香葉木素、木犀草素、5,7,4′-三羥基二氫黃酮-7-O-β-D-(4〞﹣對香豆酰) - 吡喃葡萄糖苷、5,7,4′-三羥基二氫黃酮-7-O-β-D-(3〞﹣對香豆酰)- 吡喃葡萄糖苷、穗花衫雙黃酮、木犀草素-7-O-蕓香糖苷。以木犀草素標準品作對照，與藥材供試液及加了木犀草素標準品的藥材供試液共薄層，可能由于藥材中木犀草素含量較低，薄層色譜結果顯示，在與對照品相應位置，藥材供試液未見該成分的斑點。本研究參考相關文獻資料[5-10]，采用自采并經鑒定后的藥材作對照，進行薄層色譜等研究，薄層色譜展開系統分離效果好，斑點清晰，不拖尾，方法耐用性好。 本文制定的質量標準簡單、易于操作，可用于珍珠透骨草采購及生產中的快速檢驗，為該藥材GAP規范化種植、品質優劣確定、真偽鑒別、質量控制等奠定了重要基礎。