北京市順義區370份腹瀉病例中彎曲菌監測結果

王彥波 李穎 李湛

彎曲菌病是全球范圍內胃腸炎的主要病因, 能引起散發性和地方流行性胃腸炎暴發, 也是全球廣泛流行的人獸共患病原菌。在一些發達國家監測中，彎曲菌在腹瀉病原譜中的構成甚至超過沙門菌、志賀菌等傳統病原排在首位[1]。隨著我國經濟的發展和國民生活模式的改變,彎曲菌感染監測工作逐步受到重視[2]，尤其在中國疾病預防控制中心(CDC)推廣加強過濾法分離彎曲菌法后，彎曲菌檢測難點得到突破。北京市順義區CDC從2016年5月開始使用加強過濾法在腹瀉病例中進行彎曲菌病原學監測，彎曲菌檢測工作對掌握順義區彎曲菌感染狀況及流行變化趨勢，完善疾病監測網絡具有重要意義，現將2016年5月-2017年4月間檢測結果報道如下。

1 材料與方法

1.1標本采集 標本采集自順義區2家哨點醫院腸道門診腹瀉病例糞便標本，病例定義為以腹瀉為主要癥狀的病例，每日排便3次及以上，且糞便性狀異常(稀便、水樣便、粘液便或膿血便)等。樣本采集24 h內送至區CDC進行病原學檢測。2016年5月-2017年4月共采集腹瀉病例糞便標本370份。

1.2細菌分離與鑒定 彎曲菌培養使用加強過濾法進行分離培養[3]，檢測試劑耗材采購自青島中創生物制品公司。少許腹瀉病例糞便加入促生長因子增菌液微需氧培養18 h；然后將增菌液滴加在鋪有0.45 μm直徑濾膜的karmali平板和哥倫比亞血平板上，風干40 min，使菌液自然濾過，微需氧培養48 h；挑取平板上可疑菌落轉種karmali平板培養48 h后進行生化鑒定。

1.3儀器與試劑 VITEK 2 COMPACT 微生物鑒定系統、NH(彎曲菌鑒定卡)鑒定卡購自法國梅里埃公司；空腸彎曲菌培養檢測試劑盒購自青島中創生物科技有限公司；彎曲菌生化檢測試劑盒購自青島中創生物科技有限公司；哥倫比亞血瓊脂平板和karmali培養基購自OXOID公司。

1.4統計學方法 使用Excel 2010對數據進行處理。

2 結果

2.1彎曲菌檢出季節分布 腹瀉糞便標本中彎曲菌陽性檢出率7.03%(26/370)，26株彎曲菌中空腸彎曲菌構成比為92.31%(24/26),結腸彎曲菌2株(2/26，表1和圖1)。

表1 各月份彎曲菌檢出情況

注：春季(2016年5月、2017年3-4月)，夏季(2016年6-8月)，秋季(2016年9-11月)，冬季(2016年12月-2017年2月)。圖1 4 個季節彎曲菌檢出率分布

2.2患者年齡與性別分布 26例彎曲菌檢測陽性的病例中，男性19例，女性7例； 15～40歲患者16例，41～60歲患者4例，61～87歲患者6例。

2.3患者職業分布 彎曲菌檢出陽性病例中，職業分布占據前三位的分別是家務及待業人員5名，構成比為19.23%，農民和工人3名，構成比為11.54%，離退人員、干部職員及餐飲服務人員各2名，構成比均為7.69%。

2.4臨床癥狀分布 26例彎曲菌感染病例中，17例被診斷為急性胃腸炎，5例診斷為感染性腹瀉，4例診斷為細菌性痢疾；其中3例病例有基礎病，2例為糖尿病，1例為冠心病；26例病例各臨床癥狀出現的頻數為，腹瀉26例，腹痛17例，脫水12例，發熱8例，嘔吐2例。

2.5可疑食品分布及暴露史情況 彎曲菌檢測陽性病例主訴可疑食品包括蔬菜及水果、肉與肉制品、飲料、糧食及其制品等；可疑就餐地點包括家庭自制和在外就餐；可疑食品加工及包裝方式包括家庭自制、定型包裝、散裝、餐飲服務業現場加工等(表2)。

表2 彎曲菌感染病例暴露史情況

3 討論

3.1彎曲菌培養條件苛刻，菌落小，無特異識別特征，分離培養中極易被雜菌遮蔽，并且隨著變形桿菌等腸桿菌科細菌耐藥性的加劇，傳統基于抗生素抑制遮蔽菌的分離方法逐漸失去了分離彎曲菌的作用，因此自2000年后中國腹瀉病例中有關彎曲菌的研究幾乎處于停滯狀態，彎曲菌在全國病原譜中的構成比極低[4-6]。2016年順義區CDC在日常監測中運用加強過濾法分離彎曲菌獲得了較高彎曲菌陽性檢出率，證明加強過濾法在腹瀉病例中分離彎曲菌具有較高的可行性。此次監測結果顯示，彎曲菌也是構成順義區腹瀉病例病原譜的重要病原菌。

3.2監測結果顯示，彎曲菌一年四季中流行強度無明顯變化，與沙門菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌流行強度隨季節變化顯著有一定區別[7-10]。特別是在冬季，彎曲菌檢出率達到8.00%，說明在冬季腹瀉病例監測中除關注病毒性腹瀉外還要高度關注彎曲菌造成的腹瀉。監測結果還顯示，夏季彎曲菌反而呈現相對較低的流行強度，這可能與這一時段沙門菌、副溶血弧菌等病原高強度流行影響監測敏感性有一定關聯。其次，15～40歲青壯年是感染彎曲菌的重要群體，應該與這一年齡組社會活動頻繁有一定關聯。而患者的職業分布較為分散，說明彎曲菌對所有人群均具有較高的感染機率，所有職業人群都應關注這一病原的感染，特別是26個病例中有2例餐飲服務人員，這一人群對食源性感染傳播可造成巨大風險，值得關注。最后，從臨床癥狀分析看出，彎曲菌與沙門菌、志賀菌等侵襲性致病菌產生的臨床癥狀較為類似，所以病例大多診斷為急性胃腸炎，其中26個病例中有4例被診斷為細菌性痢疾，提示細菌性痢疾在臨床診斷上的誤區，除了志賀菌感染，彎曲菌也是造成痢疾樣癥狀感染的重要病原；26個病例中有8例出現了發熱，而嘔吐僅出現2例，說明彎曲菌與蠟樣芽胞桿菌、副溶血弧菌、產氣莢膜梭菌等引起中毒型癥狀的病原有區別。

3.3從可疑食品和暴露史看出，蔬菜水果在可疑食品中占有一定比重。雖然彎曲菌是重要的人畜共患病原[11-14]，禽類和牲畜類動物中普遍存在，但因為中國人沒有生食肉的習慣，所以肉及其制品在病例主訴的可疑食品中構成比不高。蔬菜水果在可疑食品構成比占到第一位，說明蔬菜水果與彎曲菌污染的生肉制品存在交叉污染，而生食水果蔬菜間接導致人感染彎曲菌。26例彎曲菌感染患者中24例都主訴由家庭感染為主，說明家庭在日常加工、儲存食品的不科學方式是導致彎曲菌感染的重要原因，集中餐飲場所反而不是彎曲菌感染的重要場所。

此次選取哨點醫院為兩家成人醫院，因此未覆蓋兒童病例，為更加全面了解彎曲菌感染狀況，建立和完善彎曲菌監測體系應成為將來腹瀉監測的重要內容。