抗體介導肝靶向抗腫瘤給藥系統的研究進展

王丹丹　朱靜　張瑋　吳衛

中圖分類號 R944 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2018）01-0138-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.01.34

摘 要 目的：為肝靶向給藥制劑的研發提供參考。方法：以“抗體介導”“肝靶向抗腫瘤給藥系統”“主動靶向”“藥物載體”“Antibody mediated”“Liver targeted antitumor drug delivery system”“Active targeting”“Drug carriers”等為關鍵詞，組合查詢2005年1月-2017年10月在PubMed、Web of Science、中國知網、萬方、維普等數據庫中的相關文獻，對部分作用于不同靶點的肝靶向抗體，對以抗體為靶標的免疫納米粒、免疫脂質體及復合物等進行綜述。結果與結論：共檢索到相關文獻142篇，其中有效文獻29篇。目前全世界已有超過150種單抗應用于臨床或正處于臨床研究階段，單抗主要的作用靶點有肝細胞癌（HCC）相關抗原、某些生長因子及其受體、某些癌基因產物以及HCC發展信號途徑等。肝靶向給藥系統主要有免疫納米粒、免疫脂質體及復合物3種，具有增強藥物靶向性、減少免疫原性、特異性高、殺瘤效應強等優點。抗體的人源化、小型化、高度特異性、作用靶點的多樣性、藥物的高效性和低毒性等可能是今后抗體介導給藥的進一步研發方向與研究熱點。

關鍵詞 抗體介導；肝靶向抗腫瘤給藥系統；主動靶向；藥物載體

肝細胞癌（Hepatocellutar carcinoma，HCC）嚴重危害人類健康，是最常見的惡性腫瘤之一[1]。目前對HCC的治療措施主要有手術和藥物，然而臨床上用于治療HCC的藥物，由于存在在肝分布少、對正常器官毒副作用大以及在體內性質不穩定等問題，使其臨床應用受到很大限制[2]。肝靶向給藥系統（Hepatic targeted drug delivery system，HTDDS）可將藥物有效地運載至肝，提高藥效，降低不良反應[3]。HTDDS主要有受體或抗體介導的主動靶向、微粒吞噬作用的被動靶向以及pH敏感、熱敏感等物理化學靶向。抗體介導肝靶向給藥系統利用抗體-抗原特異性結合的原理，將藥物導向肝病變部位。與其他兩種靶向系統比較，抗體介導的靶向系統能更有效地運載藥物至肝病變部位。筆者以“抗體介導”“肝靶向抗腫瘤給藥系統”“主動靶向”“藥物載體”“Antibody mediated”“Liver targeted antitumor drug delivery system”“Active targeting”“Drug carriers”等為關鍵詞，組合查詢2005年1月-2017年10月在PubMed、Web of Science、中國知網、萬方、維普等數據庫中的相關文獻。結果，共檢索到相關文獻142篇，其中有效文獻29篇。現對部分作用于不同靶點的肝靶向抗體，對以抗體為靶標的3種肝靶向給藥系統免疫納米粒、免疫脂質體及復合物等進行綜述，以期為肝靶向給藥制劑的研發提供參考。

1 作用于不同靶點的抗體

單克隆抗體（單抗）介導的HCC靶向治療近年來發展迅速，受到越來越多的關注。目前，全世界有超過150種單抗應用于臨床或正處于臨床研究階段。單抗具有高度的靶向特異性，HCC相關抗原、某些生長因子及其受體、某些癌基因產物以及HCC發展信號途徑等均可能成為HCC的作用靶點[4]。針對這些作用于不同靶點的抗體，筆者整理文獻[5-12]，總結了部分抗體的靶向特性，見表1。

單抗是復雜大分子，難以滲透到實體瘤中，而單鏈抗體體積小，與完整的抗體比較，其表現出更好的細胞穿透能力[13]。如抗EGFR抗體Fab'片段，比完整的抗體的免疫原性低，改善藥物代謝分布，延長血液循環周期[14]，這促使更多的研究者去研究單鏈抗體或抗體片段來提高治療效果。筆者認為，在肝靶向給藥方面，研究者需要通過尋找合適的肝靶向抗體，使藥物能直接到達肝細胞及其受體特異性位點。此外，一些新的分子靶點的出現如TM4SF5[11]，不僅是一種潛在的肝靶向作用位點，而且對于HCC的預防和治療也有幫助。因此，抗體由于其靶向特異性，在藥物發揮肝靶向性及藥效方面起著至關重要的作用。

2 肝靶向給藥系統研究

2.1 免疫納米粒

納米粒可將藥物輸送至細胞表面或內部而不干擾其功能[15]。利用納米載體包封藥物，可提高藥物溶解性和生物利用度。將具有免疫活性的抗體，如單克隆抗體或抗體片段偶聯在納米粒上，不僅可增強藥物靶向性，還能減少免疫原性[16]。

目前，臨床上使用的大部分藥物到達體內后會被快速地消除，而免疫納米粒具有靶向性強、毒副作用小、半衰期長等優點[17]。有研究[18]采用化學偶聯技術將抗人甲胎蛋白單克隆抗體與馬錢子堿納米粒結合，制備出具有抗腫瘤免疫靶向特點的馬錢子堿免疫納米粒。結果表明，馬錢子堿免疫納米粒不僅半衰期變長，而且能靶向至肝癌細胞SMMC-7721的細胞膜，能有效地抑制該細胞的生長、黏附、侵襲和轉移，表現出了明顯的肝靶向性。

為探究免疫納米粒的細胞毒性以及抗體靶向性，有研究[19]將CD147單抗與包載常春藤素的殼聚糖納米粒偶聯，結果顯示，單抗介導的納米粒對人肝癌細胞HepG2和SMMC-7721的半數抑制濃度低于游離的藥物和無抗體介導的納米粒，提示單抗介導的納米粒毒性減小。將上述單抗介導和無單抗介導的納米粒分別通過尾靜脈注入小鼠體內，1 h后，近紅外熒光活體實時成像結果顯示，兩種納米粒子均分布到小鼠全身，但抗體介導納米粒在腫瘤和肝細胞中的熒光比無抗體介導的納米粒要強，提示抗體介導的藥物主動靶向性更好。在另一項蛋白羥乙基殼聚糖納米粒研究[20]中發現，納米粒對H22細胞生長的抑制作用呈劑量依賴性，用DR5單鏈抗體介導的羥乙基殼聚糖納米粒能使不同類型的腫瘤細胞死亡，并抑制體內和體外腫瘤的生長，提示免疫納米粒具有較好的抑瘤作用。因此，免疫納米粒不僅能提高藥物的生物利用度，而且能降低藥物毒性。同時，抗體修飾的抗癌藥物納米粒可通過特異性識別抗原發揮作用，進一步提高在腫瘤治療方面的應用。

2.2 免疫脂質體

脂質體是將藥物載于類脂質雙分子層內而形成的微型囊泡[21]。將脂質體與特異性單抗偶聯即成為免疫脂質體，免疫脂質體利用單抗與腫瘤細胞的特異結合性，具有特異性高、殺瘤效應強等優點[22]。

蜂毒肽（PBV）具有抗腫瘤等多種藥理活性。有研究[23]以人源化抗肝癌單鏈抗體（hdsFv25）為配體，PBV為模型藥，制備聚乙二醇（PEG）偶聯hdsFv25免疫脂質體。結果顯示，PEG-hdsFv25免疫脂質體對肝癌細胞SMMC-7721具有較強的親和性和特異性，對該細胞具有較好的殺傷能力。EGFR是腫瘤治療中一個很重要的靶分子。有研究[24]將EGFR單鏈抗體片段接在脂質體表面，使其特異性識別高表達EGFR的癌細胞。脂質體由于雙分子層的特殊膜結構，能夠有效地與細胞融合或被細胞吞噬，抗體的連接使脂質體在腫瘤細胞中的攝取明顯增加。

為探究脂質體表面同時偶聯2種抗體或配體能否產生協同作用，有研究[25]使用抗體和配體同時對脂質體進行修飾。結果表明，與無修飾的脂質體比較，使用抗體和配體進行修飾的脂質體的細胞攝取率明顯增加，在靶向細胞時產生了協同作用。有研究[26]以阿霉素（ADR）為模型藥物制成脂質體，分別用葉酸和EGFR單抗進行修飾。結果表明，與未修飾的脂質體比較，葉酸-EGFR單抗修飾脂質體，藥物更多地聚集于腫瘤部位，降低對正常組織的毒性，提高治療效果。如果選擇合適的抗體或配體，采用2種或多種聯合修飾脂質體，將進一步增強藥物的靶向性，提高抗腫瘤療效。

2.3 復合物

在包裹復合物的載體表面嵌合抗體，不僅可發揮復合物聯合治療的作用，還能提高藥物靶向性。有研究[27]用EGFR抗體片段Fab'偶聯ADR和核糖核苷酸還原酶M2（RRM2）siRNA陽離子脂質體（LPD）制備得ADR- RRM2-LPD復合物。結果顯示，ADR-RRM2-LPD復合物可以特異性靶向高表達EGFR的肝癌細胞，對腫瘤細胞顯示出更強的增殖抑制和凋亡誘導活性。有研究[28]合成單鏈Fv抗體與ADR組成的ADM-Dex-ScFv- SA3復合物，進行研究后發現ADM-Dex-ScFv-SA3復合物可以選擇性地結合到人肝癌細胞HepG2并抑制其增殖，同時荷瘤小鼠模型實驗表明復合物能抑制腫瘤生長并延長小鼠生存時間。有研究[29]考察了載CD/TK雙基因和 αVβ3整合素抗體的陽離子微泡（CMBsαVβ3）對人肝癌細胞HepG2的影響，與無靶向作用的陽離子微泡比較，CMBsαVβ3能顯著促進5-氟胞嘧啶/丙氧鳥苷在人肝癌細胞HepG2中誘導的細胞周期阻滯和細胞凋亡。結果表明，以抗體為靶標的復合物能夠發揮聯合治療的作用，但這只是其中的一部分，是否有一些復合物會降低治療作用仍需進一步探究。

3 結語

抗體介導肝靶向抗腫瘤給藥系統，能有效增強藥物靶向性，提高在肝的藥物濃度，減少對正常組織器官的毒性，從而增強藥物療效、減少毒副作用。單抗是抗體介導肝靶向抗腫瘤給藥系統的核心組成部分，抗體靶向性的強弱直接影響其作用效果。近年來，隨著分子生物學及基因工程技術的不斷進步，將會有特異性更強、不良反應更小的單抗不斷涌現。關于抗體介導給藥，目前存在一些尚待解決的問題，如不同靶點的抗體作用機制各不相同，有的靶點還尚未明確，藥物進入靶點部位的機制還有待進一步確認；藥物與抗體、載體材料之間的相互作用；含藥載體在生物體內的變化以及體內物質對藥物載體是否有影響等。考慮到抗體修飾載體的安全性及合成載體的低轉運率等問題，還需要設計更加理想的藥物載體。抗體的人源化、小型化、高度特異性、作用靶點的多樣性、藥物的高效性和低毒性等可能是今后抗體介導給藥的進一步研發方向與研究熱點。

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（收稿日期：2017-05-10 修回日期：2017-11-06）

（編輯：余慶華）