PAF表達與冠心病患者冠脈斑塊形成及穩定性的關系

申文祥 ，李慶勇 ，張正偉 ，李琚平 ，崔健健 ，張靜 ，金棟梁 ，何曉勝 ，劉娟 ，管文娟 ，劉淼 ，牛鎖成

(1、濮陽市人民醫院心內二科，河南 濮陽457000；2、安陽市人民醫院心內科，河南 安陽455000)

冠狀動脈粥樣硬化斑塊的形成，是促進冠心病或者心絞痛等心血管疾病發生發展的獨立風險因素。流行病學研究顯示，現階段臨床上罹患有冠狀動脈粥樣硬化斑塊的患者可達234～555/10萬人左右，且在部分地區的發病率更高[1，2]。

血小板功能或者形態的異常，可以通過影響到血小板性血栓的形成、加劇血小板對于冠狀動脈血管內皮的損傷，促進患者冠狀動脈血管粥樣硬化的發生。多種生物學因子均可以促進血小板功能的活化，其中以血小板活化因子（platelet activating factor，PAF）的生物學效應最為顯著。PAF的高表達，能夠影響到內皮細胞的粘附、遷移，增加單核細胞或者泡沫細胞等對于內皮層的侵蝕[3，4]。已經證實在肺栓塞、下肢靜脈血栓等疾病的發展中具有一定的促進作用，但對于PAF的表達與粥樣斑塊病變的病變面積、斑塊的穩定性或者斑塊厚度等腔內血管斑塊相關指標的關系研究不足。為了進一步揭示PAF的表達在促進冠狀動脈粥樣斑塊病變發生過程中的作用，本次研究選取我院確診的冠心病患者140例，探討了PAF的異常表達及其與血管內超聲檢查相關指標的關系，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院確診的冠心病患者140例，其中穩定性心絞痛患者60例（SAP組）、急性冠脈綜合征80例 （ACS組），選取同期健康人群60例作為對照組。

SAP組，男 37例、女 23例，年齡 53～75歲，平均63.8±8.3歲，合并高血壓27例、糖尿病14例、高脂血癥19例，吸煙史20例。ACS組，男46例、女 34例，年齡 48～79歲，平均 63.2±10.7歲，合并高血壓35例、糖尿病21例、高脂血癥24例，吸煙史29例。對照組，男35例、女25例，年齡49～79歲，平均62.1±11.4歲。三組研究對象的年齡、性別比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 納入排除標準

1.2.1 納入標準 ⑴冠心病患者的診斷參考中華醫學會心血管病分會 《缺血性心臟病命名及診斷標準》、美國心臟病協會（AHA）/美國心臟病學會（ACA）的診斷標準；⑵患者均經過心電圖、冠脈造影或血管內超聲檢測至少一支冠狀動脈的狹窄程度＞50%；⑶患者年齡18～79歲；⑷對照組來源于本院體檢中心的健康自愿者；⑸本研究獲得研究對象的知情同意及醫學倫理委員會的批準。

1.2.2 排除標準：⑴合并全身急慢性感染性疾病；⑵嚴重的肝腎功能不全；⑶合并其惡性腫瘤病史；⑷腦卒中病史；⑸血壓控制不佳，收縮壓＞140mmHg或舒張壓＞90mmHg；⑹精神、認知功能障礙；⑺心瓣膜病、肥厚性心肌病、貧血等。

1.3 血管內超聲 采用美國GE公司生產的IU-900系列超聲診斷儀器進行診斷，檢查者取仰臥位，充分暴露頸部，超聲探頭頻率設置為4.5MHZ-5.5MHZ。檢查者頭仰向另一側，探頭從頸部根部開始探討頸動脈主干，并向上移行觀察頸動脈膨大以及分支處，典型的動脈外膜、肌層、內膜呈現出明顯的兩亮一暗的表現，在頸動脈膨大處內1cm以內檢測內膜內層至中膜外層的厚度，并計算血管外彈力膜面積（EEMA）、管腔直徑大小、管腔面積（LA）、斑塊面積（PA）等指標。

血管內超聲的測量指標有：血管外彈力膜面積（EEMA）、管腔直徑大小、管腔面積（LA）、斑塊面積（PA）、偏心指數（EI）=（最大斑塊厚度-最小斑塊厚度）/最大斑塊厚度，EI＞0.5為偏心性斑塊；斑塊負荷（PB）=斑塊面積/EEMA×100%，重構指數（RI）=病變處EEMA/參考部位近端與遠端的EEMA平均值，RI范圍 0.95～1.05 為無重構，RI＞1.05 為正性重構，RI＜0.95為負性重構。

1.4 檢測方法 采集空腹靜脈血約5ml，枸櫞酸鈉抗凝后以3000r/min離心10min，取上清液采用酶聯免疫吸附法測定血清中PAF水平，檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物有限公司，具體檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.5 統計學方法 統計軟件采用SPSS 16.0，采用均數±標準差（±s）進行統計描述，重復設計的計量資料組間比較采用重復測量的方差分析法；計數資料組間比較采用χ2檢驗，等級計數資料組間比較采用非參數檢驗法；P值＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象的血清PAF水平比較 ACS組患者的血清PAF水平顯著的高于對照組和SAP組 （P＜0.05），SAP組患者的血清PAF水平高于對照組（P＜0.05）。見表 1。

表1 三組研究對象的血清PAF水平比較（±s）

表1 三組研究對象的血清PAF水平比較（±s）

組別n對照組ACS組SAP組60 80 60 PAF（μg/L） F值 P值6.32±0.57 14.81±2.20 10.95±2.17 49.085 ＜0.001

2.2 ACS組和SAP組患者的斑塊性質比較 ACS組患者的脂質斑塊檢出率53.74%顯著的高于SAP組患者的16.33（P＜0.05），ACS組的斑塊破裂檢出率66.67%顯著的高于SAP組的28.57%（P＜0.05）；SAP組纖維斑塊檢出率52.04%顯著的高于ACS組的 19.73%（P＜0.005）；ACS組和 SAP組的鈣化斑塊、混合性斑塊檢出率差異無統計學意義 （P＞0.05）。 見表 2。

表2 ACS組和SAP組患者的斑塊性質比較[n（%）]

2.3 ACS組和SAP組患者的血管內超聲斑塊參數比較 ACS 組患者的 EEMA、PA、EI、PB、RI高于SAP組 （P＜0.05），ACS組的 LA 顯著低于 SAP組（P＜0.05）。 見表 3。

2.4 相關性分析 冠心病患者血清PAF水平與EEMA、PA、EI、PB、RI參數呈顯著的正相關關系（P＜0.05），與 LA 呈顯著的負相關關系（P＜0.05）。見表 4。

3 討論

冠心病或者冠狀動脈綜合癥等是促進患者病情持續性進展，導致患者病死率上升的重要因素。冠狀動脈斑塊的形成或者脫落，增加患者不良臨床結局的風險[5，6]。但迄今為止臨床上缺乏對于冠狀動脈粥樣斑塊的有效治療措施，雖然抗凝或者抗血小板藥物等，能夠在一定程度上抑制斑塊的形成，降低斑塊的厚度，但其治療的臨床總體有效率仍然較低，治療后斑塊的復發風險仍然較高[7]。

表3 ACS組和SAP組患者的血管內超聲斑塊參數比較（±s）

表3 ACS組和SAP組患者的血管內超聲斑塊參數比較（±s）

組別ACS組SAP組t值P值斑塊數80 60 EEMA（mm2） LA（mm2）12.31±1.81 10.63±1.62 5.682＜0.001 3.30±0.49 3.74±0.61 4.731＜0.001 PA（mm2） EI 9.16±2.00 7.05±1.10 7.374＜0.001 0.63±0.14 0.52±0.07 5.582＜0.001 PB（%） RI 71.83±7.09 65.45±6.21 5.553＜0.001 1.08±0.10 1.00±0.08 5.093＜0.001

表4 相關性分析

PAF的表達活化能夠在促進血小板表面糖蛋白配體的激活，促進血小板性血栓的形成，增加血小板對于血管內皮粘附能力，增加血管狹窄的發生率[8，9]；PAF羧基末端結構上包含的多個可結合區域，能夠增強血小板的相互富集的風險，促進微血栓的形成、脫落，并能夠增加已形成血栓的厚度和侵蝕程度[10，11]。回顧國內外相關臨床研究，部分研究揭示了PAF的表達與患者心肌梗塞、腦梗塞等嚴重心血管結局事件的關系認為高表達的PAF可以顯著促進患者病情的進展[12，13]，增加冠狀動脈狹窄或者腦血管狹窄的風險。

本次研究發現在急性冠脈綜合癥的患者或者穩定型心絞痛的患者體內，PAF的表達明顯上升，高于正常對照人群，差異具有統計學意義，提示PAF的異常表達可能參與到了心血管疾病的病變發生發展過程中，PAF的高表達可能通過影響到下列幾個方面的因素，進而促進心血管不良結局事件的發生：⑴PAF的高表達，促進了患者局部血小板的活化，增加了其對于冠狀動脈內皮細胞層完整性的損傷，誘導泡沫細胞在內皮細胞層下的持續性蓄積；⑵PAF的高表達，能夠誘導局部氧化應激反應或者炎癥反應，促進不同的炎癥因子如IL-6或者IL-10等對于血管內皮層的浸潤，促進為斑塊的形成提供條件。海祺旻等[14]研究者在探討了24例不同病情的心血管惡性結局事件患者的血清學PAF變化過程中發現，PAF的平均上升幅度可達25%~55%以上，且患者的粥樣斑塊的形成越為明顯，斑塊的脫落風險越高，PAF的高表達越為嚴重。在冠脈綜合癥或者心絞痛患者體內，粥樣斑塊的檢出率均較高，特別是在冠脈綜合癥的患者體內，PAF的上升同樣較為明顯，但有趣的是，本次研究中并未發現不同的鈣化斑塊、混合性斑塊等在不同患者中的檢出差異，這主要考慮鈣化斑塊、混合性斑塊的差異可能主要與患者心血管疾病的病程、斑塊形成的個體化差異或者既往使用不同的抗粥樣硬化斑塊藥物等有關[15]。在冠脈綜合癥的局部腔內血管超聲檢查結果中可見的是，EEMA、PA、EI、PB、RI明顯高于對照組，而 LA 的表達有所下降，提示冠脈綜合癥患者的腔內血管粥樣斑塊病變更為嚴重，管腔直徑更小、管腔局部斑塊的厚度、面積等指標均明顯增加。最后，相關性分析也可見，PAF的表達與不同的腔內血管粥樣斑塊指標均具有密切的關系，進一步提示了PAF對于促進患者血管粥樣斑塊病變的作用。

本次研究通過對于血管內超聲及血清學PAF的相關檢查，具有以下現實意義：⑴對于PAF表達的研究能夠在揭示斑塊的形成機制，為評估斑塊脫落的風險提供血清學依據；⑵對于PAF與患者斑塊不同參數指標的研究，可以為后續臨床藥物治療提供新的研究方向。綜上所述，冠心病患者的血清PAF存在明顯的異常高表達趨勢，并與患者斑塊形成及斑塊穩定性有關。