食物過敏患兒細胞及體液免疫狀態分析

洪燕 王曉霞 阮桂英

[摘要] 目的 探討食物過敏（Food allergy，FA）患兒細胞及體液免疫狀態。 方法 選取2015年1月～2017年7月間我院收治的50例食物過敏患兒（FA組）及同期體檢的64例健康兒童（非FA組）作為研究對象，對其過敏原特異性抗體、血清免疫球蛋白、T淋巴細胞亞群進行檢測，分析FA患兒細胞及體液免疫的狀態。 結果 食物過敏患兒過敏變應原特異性IgE檢測結果顯示，牛奶（22.00%）、牛肉（20.00%）、全蛋（18.00%）、黃豆（10.00%）和海鮮（10.00%）是較常見的過敏變應原，花生、橙子、青胡椒、雞肉、蘑菇所占比例較低。FA組患兒的CD3+、CD8+水平均低于非FA組（P<0.05），CD4+、CD4+/CD8+水平高于非FA組（P<0.05）。FA組患兒的IgE水平明顯高于非FA組（Z=12.3472，P<0.05），而兩組間的IgA、IgG、IgM、C3、C4等指標的差異均無統計學意義（均P>0.05）。 結論 食物過敏患兒最常見的變應原為牛奶、牛肉和全蛋，患兒細胞免疫指標及體液免疫指標均會發生異常。

[關鍵詞] 食物過敏；兒童；細胞免疫；體液免疫

[中圖分類號] R725.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）18-0020-03

[Abstract] Objective To investigate the cellular and humoral immune status of children with food allergy （FA）. Methods A total of 50 children with food allergy（FA group） admitted in our hospital from January 2015 to July 2017 and 64 healthy children （non-FA group） who were examined during the same period were selected as study subjects. Allergen-specific antibodies， serum immunoglobulins， and T-lymphocyte subpopulations were tested to analyze the status of cellular and humoral immunity in children with FA. Results Allergy-specific IgE test results in children with food allergy showed that milk （22.00%），beef （20.00%）， whole eggs （18.00%）， soybeans （10.00%） and seafood （10.00%） were the common allergens. Peanuts， oranges，green peppers，chicken and mushrooms accounted for a relatively low proportion. The levels of CD3+ and CD8+ in the FA group were lower than those in the non-FA group（P<0.05）， and the levels of CD4+ and CD4+/CD8+ were higher in the FA group than those in the non-FA group（P<0.05）. The IgE levels in the FA group were significantly higher than those in the non-FA group（Z=12.3472， P<0.05）. There was no significant difference in IgA， IgG， IgM， C3， and C4 between the two groups（all P>0.05）. Conclusion The most common allergens in children with food allergies are milk，beef and whole eggs. The abnormalities of cellular immunity and humoral immunity in children may occur.

[Key words] Food allergy； Children； Cellular immunity； Humoral immunity

食物過敏（Food allergy，FA）是指由免疫介導的機體對一種（或多種）食物蛋白抗原產生的不良反應，根據介導途徑的分類，可分為IgE介導的變態反應和非IgE介導的變態反應兩種[1-2]。FA表現為群體發病，癥狀常累及消化系統、呼吸系統、皮膚等，牛奶、花生、蛋類均是較常見的致敏食物[3]。數據顯示，全球發生FA的兒童約有5%～8%，對兒童的生長發育及生活質量造成嚴重影響，且FA也是常見的其他過敏性疾病的誘因之一[4]，因此，FA已成為學者研究的熱點之一。本研究通過對50例食物過敏患兒血清中食物過敏原特異性IgE、免疫球蛋白及淋巴細胞亞群進行檢測，觀察FA患兒的細胞免疫及體液免疫狀態，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月～2017年7月間我院收治的50例食物過敏患兒（FA組）及同期體檢的64例健康兒童（非FA組）作為研究對象。FA組中男28例，女22例，年齡3個月～13歲，平均（4.52±3.22）歲，經皮膚點刺試驗初步確診為食物過敏。非FA組中，男34例，女30例，年齡2個月～14歲，平均（4.21±3.86）歲，經病史詢問、體格檢查、皮膚點刺試驗陰性及IgE測定確定為非FA患兒。兩組兒童的性別、年齡等基本資料比較，差異均無統計學意義（χ2=0.0935，t=0.4570，均P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

（1）食物特異性IgE檢測：患兒入院后，第2天清晨采取空腹靜脈血3 mL，離心后取血清，測量血清中食物特異性IgE抗體，試劑盒由杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司生產提供。（2）T淋巴細胞亞群檢測：抽取2 mL空腹靜脈血，應用熒光直接標記法（熒光抗體由美國貝克曼庫爾特有限公司生產提供）檢測淋巴細胞各亞群，包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+，操作過程嚴格按照試劑盒進行，采用美國貝克曼庫爾特有限公司提供的FC-500流式細胞分析儀進行統計分析。（3）免疫球蛋白檢測。采用免疫比濁法檢測血清免疫球蛋白總IgE、IgG、IgA、IgM以及補體C3、C4。

1.3 統計學方法

數據處理應用統計學軟件SPSS22.0完成。計量資料中，符合正態分布的兩樣本的比較采用獨立樣本的t檢驗，數據用（x±s）來表示，不符合正態分布的兩樣本的比較，采用Wilcoxon秩和檢驗；P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 食物過敏患兒過敏變應原特異性IgE檢測

食物過敏患兒過敏變應原特異性IgE檢測結果顯示，牛奶（22.00%）、牛肉（20.00%）、全蛋（18.00%）、黃豆（10.00%）和海鮮（10.00%）是較常見的過敏變應原，花生、橙子、青胡椒、雞肉、蘑菇所占比例較低。見表1。

2.2 食物過敏患兒T淋巴細胞亞群測定

FA組患兒的CD3+、CD8+水平均低于非FA組（P<0.05），CD4+、CD4+/CD8+水平高于非FA組（P<0.05）。見表2。

2.3 食物過敏患兒免疫球蛋白測定

FA組患兒的IgE水平明顯高于非FA組（Z=12.3472，P<0.05），而兩組間的IgA、IgG、IgM等指標的差異均無統計學意義（均P>0.05）。見表3。

2.4 食物過敏患兒補體測定

兩組兒童的C3、C4的差異均無統計學意義（均P>0.05）。見表4。

3 討論

IgE介導的FA是經典的Ⅰ型變態反應，常引發急性病變；非IgE介導的FA，常涉及到IgG、細胞介導的免疫反應等機制，多在進食數小時或數天后表現出典型癥狀[5-6]。由于FA也是變應性疾病，被認為與變應性鼻炎、支氣管哮喘、濕疹等較為相似，均具有相似的發病機制，只是會在不同的靶器官產生不同的臨床癥狀[7-8]。研究認為患兒若持續發生食物過敏，則發生呼吸道過敏的可能性越大，因此，當兒童出現食物過敏相關癥狀時，應及時篩查過敏原，早期回避致敏原[9]。干預并阻斷FA一方面可有效緩解FA的臨床癥狀，另一方面可有效降低FA引發其他嚴重過敏性疾病的風險，進而提高患兒的生活質量[10-11]。

研究發現，嬰幼兒的食物過敏主要集中在牛奶、牛肉、雞蛋，而回避不適宜的食物則是治療食物過敏的最好方法[12]。如母乳喂養、低抗原性配方奶、推遲添加輔食的時間等綜合干預方式均可降低食物過敏的發生率。本研究結果發現，牛奶（22.00%）、牛肉（20.00%）、全蛋（18.00%）、黃豆（10.00%）和海鮮（10.00%）是較常見的過敏變應原，花生、橙子、青胡椒、雞肉、蘑菇所占比例較低，這與以往相關研究的結果相似但不完全一致[13]，這可能與地域有關，不同地區的飲食習慣等各不相同，這會對變應原的陽性率產生不同的影響。研究認為定量體外檢測特異性IgE，可有效診斷IgE介導的食物過敏，其診斷陽性預測值高于95%[14]。流式細胞技術在過敏性疾病檢測中的應用較廣，該技術具有操作簡便、快速、能定量分析特定細胞群體等優勢[15]。

CD3+代表T淋巴細胞的總值，當發生食物過敏時，機體免疫功能降低，因此CD3+會降低[16]；CD4+能夠協調B淋巴細胞的分化而產生抗體，而CD8+又能夠抑制抗體的合成與分泌，CD4+/CD8+比值能夠反映Th與T8之間的狀態是否平衡，是人體免疫系統內環境穩定與否的敏感指標，當機體發生過敏或感染時，機體免疫功能降低，CD4+水平會降低，而CD8+水平升高，CD4+/CD8+比值也會低于正常值[17-18]。本研究發現，FA組患兒的CD3+、CD8+水平均低于非FA組（P<0.05），CD4+、CD4+/CD8+水平高于非FA組（P<0.05）。IgG是機體免疫球蛋白的主要成分，大部分抗毒、抗菌及抗病毒的抗體均為IgG，其在抗感染中發揮著主導作用，且具備調理、中和毒素、中和病毒的功能[19-20]；IgA是呼吸系統黏膜分泌的抗體，是一種重要的局部抗感染的免疫球蛋白；IgM是體液免疫中產生最快的免疫球蛋白[21-22]。本研究結果顯示，FA組患兒的IgE水平明顯高于非FA組（Z=12.3472，P<0.05），而兩組間的IgA、IgG、IgM、C3、C4等指標的差異均無統計學意義（均P>0.05），這與FA作為Ⅰ型變態反應的發病機制相一致，結果綜合提示食物過敏患兒的細胞免疫與體液免疫均會發生一定程度的亢進變化。

綜上所述，體外定量檢測IgE是尋找食物過敏原的有效方法，對于預防兒童食物過敏具有重要價值。最常見的食物過敏原有牛奶、牛肉和全蛋。食物過敏患兒的體液免疫及細胞免疫存在一定的亢進，血清IgE水平、T淋巴細胞亞群在兒童食物過敏診治中具有重要參考價值。

[參考文獻]

[1] 王曉川.食物過敏的免疫機制及其臨床意義[J].中華實用兒科臨床雜志，2015，30（9）：651-652.

[2] Jiménez-Saiz R，Chu DK，Mandur TS，et al. Lifelong memory responses perpetuate humoral TH2 immunity and anaphylaxis in patients with food allergy[J].J Allergy Clin Immunol，2017，140（6）：1604-1615.

[3] 梅少華，吳成.食物過敏患兒特異性抗體與細胞免疫因子變化特點及氨基酸乳品聯合益生菌干預效應[J].安徽醫學，2014，35（1）：75-78.

[4] Shik D，Tomar S，Lee JB，et al.IL-9-producing cells in the development of IgE-mediated food allergy[J]. Seminars in Immunopathology，2016，39（1）：69-77.

[5] 張曉娟，高勁，徐國成，等.過敏性紫癜患兒免疫功能的變化及臨床意義[J].皖南醫學院學報，2015，34（6）：551-553.

[6] De Bruyne R，Gevaert P，Van Winckel M，et al.Raised immunoglobulin A and circulating T follicular helper cells are linked to the development of food allergy in paediatric liver transplant patients[J]. Clinical & Experimental Allergy，2015，45（6）：1060-1070.

[7] 胡驍飛，王耀，鄧瑞廣，等.免疫學技術在食品過敏原檢測中的應用[J].食品科學，2014，35（8）：1-5.

[8] 單延春，馮雪英，衣明紀.食物過敏兒童的生長狀況與營養管理[J].中國兒童保健雜志，2016，24（10）：1055-1058.

[9] Han Y，Wang X，Chen G，et al. Di-（2-ethylhexyl） phthalate adjuvantly induces imbalanced humoral immunity in ovalbumin-sensitized BALB/c mice ascribing to T follicular helper cells hyperfunction[J]. Toxicology，2014，324（10）：88-97.

[10] Alergia CND. Food allergy in children：Recommendations for diagnosis and treatment[J].Archivos Argentinos De Pediatria，2018，116（1）：82.

[11] Berin MC，Wang W.Reduced severity of peanut-induced anaphylaxis in TLR9-deficient mice is associated with selective defects in humoral immunity[J]. Mucosal Immunology，2013，6（1）：114.

[12] 李興永，王巍，孫宏治，等.食物過敏發病機制及診療策略的研究進展[J].食品安全質量檢測學報，2014，（7）：2133-2137.

[13] Mazzocchi A，Venter C，Maslin K，et al. The role of nutritional aspects in food allergy：Prevention and management[J]. Nutrients，2017，9（8）：850.

[14] 邵明軍，沙莉，劉傳合，等.北京市城區及農村兒童食物過敏患病率比較[J].中華臨床免疫和變態反應雜志，2017，11（4）：358-364.

[15] Burton OT，Tamayo JM，Stranks AJ，et al. IgE promotes type 2 innate lymphoid cells in murine food allergy[J].Clin Exp Allergy，2018，48（3）：288-296.

[16] Dion C，Chappuis E，Ripoll C. Does larch arabinogalactan enhance immune function？A review of mechanistic and clinical trials[J]. Nutrition & Metabolism，2016，13（1）：28.

[17] 王俊閣，張虹，羅輝.食物過敏與食物不耐受的鑒別[J].中華全科醫師雜志，2016，15（8）：653-656.

[18] Kruijff DD，Mackus M，Otten LS，et al. Assessment of perceived immune status：Comparison of a 1-item question versus the immune function questionnaire[J]. European Neuropsychopharmacology，2016，26（2）：S367-S368.

[19] 單延春，馮雪英.食物過敏兒童的生長狀況與營養管理[J].中國兒童保健雜志，2016，24（10）：1055-1058.

[20] Aitoro R，Paparo L，Amoroso A，et al. Gut microbiota as a target for preventive and therapeutic intervention against food allergy[J]. Nutrients，2017，9（7）：672.

[21] Yu W，Freeland DMH，Nadeau KC. Food allergy：Immune mechanisms，diagnosis and immunotherapy[J]. Nature Reviews Immunology，2016，16（12）：751-765.

[22] Chung MY，Shin HS，Choi DW，et al.Citrus tachibana leaf extract mitigates symptoms of food allergy by inhibiting Th2-associated responses[J].Journal of Food Science，2016，81（6）：H1537-H1545.

（收稿日期：2018-02-12）