血清白細胞介素-1家族細胞因子和白細胞介素-34的檢測在強直性脊柱炎的臨床應用價值

白雄偉，張科

(漢中市人民醫院骨科，陜西 漢中 723000)

強直性脊柱炎(ankylosing Spondyilits,AS)屬風濕病范疇，為世界性疑難雜癥，與HLA-B27呈強關聯，其臨床表現為關節強直性病變，主要累及骶髂關節、脊柱及肌腱附著點。目前，AS病因尚未完全明確。遺傳、環境、免疫均與之相關，其中以細胞因子網絡異常為核心的免疫紊亂假說逐漸被臨床研究者所認同[1]，白介素(IL)作為免疫細胞間相互作用的淋巴因子,在信息傳遞，免疫細胞激活與調節， T、B細胞活化、增殖與分化的介導以及炎癥反應中均起重要的作用[2]。IL-1家族細胞因子包括IL-lα、IL-lβ、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra、IL-36α、IL-37、IL-36β、IL-36γ、IL-38及IL-33，由多種細胞表達，為先天免疫及炎癥的中樞介質，在免疫調節中起重要的作用。IL-34由241個氨基酸殘基組成，與單核細胞生長分化及破骨細胞的形成有關。本研究回顧性分析2016年1月至2018年1月本院收治的36例AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34檢測情況，旨在探討IL-1家族細胞因子及IL-34與AS發病機制的聯系，以及AS患者IL-1家族細胞因子和IL-34檢測的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年1月至2018年1月漢中市人民醫院確診的36例AS患者為研究對象，設為AS組，其中男性21例，女性15例，年齡28～47歲，平均(33.2±6.3)歲，病程3～7年，平均(5.8±1.2)年；選擇同期48名健康志愿者為對照組，其中男性28名，女性20名，年齡30～45歲，平均(33.6±6.8)歲。兩組研究對象性別、年齡構成上差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。AS患者在6個月內均未接受免疫抑制、生物及激素治療，排除腫瘤、感染患者。本研究經醫院倫理會批準通過，患者享有知情權。

1.2 診斷標準

AS診斷參考2001年我國《強直性脊柱炎診斷標準》，臨床表現：腰、脊柱、下肢關節炎、不對稱外周關節炎癥狀持續≥6周；夜間痛、晨僵≥0.5 h；家族史或HLA-B27陽性；虹膜睫狀體炎；足跟痛及其他肌腱附著點痛；非甾體抗炎藥可迅速緩解，符合上述臨床表現中的一項及相關的病理、影像學診斷支持可確診。

1.3 研究方法

受試者清晨空腹取血檢測血沉(ESR)、C反應蛋白(CRP)、IL-lα、IL-lβ、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra、IL-36α、IL-37、IL-36β、IL-36γ、IL-38、IL-33及IL-34。ESR采用魏氏法，CRP采用免疫比濁法，全自動生化分析儀為HITACHI7600，試劑由寧波美康生物有限公司提供，IL-1家族細胞因子采用蛋白芯片法，AAH—CYT-G1000試劑盒購自美國Raybiotech公司，IL-34采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測，試劑由Bio-Legend公司提供。比較兩組研究對象各項檢測指標的差異性，并研究IL-1家族細胞因子、IL-34與ESR、CRP的關聯。

1.4 統計學分析

研究數據的分析處理采用統計學軟件SPSS 19.0，組間均值的比較采用t檢驗分析，相關性分析采用Pearson直線相關分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平比較

兩組研究對象IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平經t檢驗分析比較見表1， ESR、CRP、IL-lα、IL-lβ、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra、IL-36α、IL-37、IL-34、ESR及CRP均有統計學意義(P<0.05)，與對照組比較AS患者IL-lα、IL-18、IL-36α、IL-37、IL-34、ESR及CRP升高，IL-lβ、IL-1Ra、IL-36Ra降低。

表1 兩組研究對象IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平比較

2.2 AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平與ESR、CRP的相關性分析

AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平與ESR、CRP經pearson相關性分析詳見表2，IL-lα、IL-34與ESR、CRP呈正相關，IL-1Ra與ESR、CRP呈負相關，均有統計學意義(P<0.05)。

表2 AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平與ESR、CRP的相關性分析

項目ESRr值P值CRPr值P值IL-lα0.3650.0140.4590.007IL-lβ-0.2970.098-0.3650.072IL-1Ra-0.3830.018-0.4280.034IL-180.2450.0680.3190.059IL-36Ra-0.4320.127-0.5430.095IL-36α0.2830.0930.3550.067IL-370.3160.0820.4690.061IL-340.3750.0320.4810.025

3 討論

AS又稱竹節狀脊椎屬結締組織疾病，早期病情隱匿，好發于青壯年男性，致殘率較高[3]，其基本病理病變為脊椎韌帶的風濕性炎癥[4]。炎性病變由關節累及骨質形成強直性病變。研究[5]發現AS患者機體存在多種細胞因子網絡調節的紊亂，多細胞因子諸如干擾素、血管內皮生長因子等均參與了AS疾病的發病過程，且部分細胞因子與疾病的活動性關系密切。在骨關節炎性致病機制中，IL-1家族細胞因子為重要的決定因子，具有多效性及高效性。有研究[6]指出IL-1家族細胞因子及其受體拮抗蛋白與關節軟骨基質分解、合成代謝平衡關系密切，本研究著重于IL-1家族細胞因子及IL-33與AS發病機制的關系探討。

IL-1家族細胞因子多數為細胞外分泌，為先天免疫與炎癥的中樞介質，對機體免疫穩態的維持作用較為關鍵[7]。其中IL-lα、IL-lβ、IL-18、IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-33具有促炎作用，而IL-1Ra、IL-36Ra、 IL-37、IL-38具有抑炎作用。本研究數據顯示：AS患者相對于對照組血清IL-lα、IL-18、IL-36α、IL-37、IL-34、ESR及CRP升高，IL-lβ、IL-1Ra、IL-36Ra降低。IL-1早期被稱為人白細胞致熱原，在結締組織中IL-1可促進成纖維細胞、角質細胞增生及組織重建，促進骨質吸收及膠原酶合成。IL-1骨代謝有重要的影響作用，IL-1為骨吸收因子，可促進骨髓細胞形成破骨細胞。IL-1主要包含IL-lα、IL-lβ兩種蛋白質，IL-lα源自壞死細胞可促進炎癥的發展，IL-lβ則主要與炎癥細胞從血液到組織的浸潤有關[8]，IL-1Ra為IL-1的受體拮抗劑可下調IL-1介導的炎癥過程，抑制IL-1的生理活性。研究中AS患者血清IL-lα升高，IL-lβ、IL-1Ra 降低，反映了AS患者機體的炎性狀態。IL-18、IL-37屬于IL-18亞家族成員，IL-18可由成骨細胞、角質化細胞產生，并可引發強烈的Th1炎癥反應，有研究[9]發現AS患者存在嚴重的Th1/Th2失衡。IL-18可激活巨噬細胞及T細胞，促進炎性細胞因子及黏附因子的分泌，導致骨質的損傷。AS患者的抑炎因子IL-37的升高源于機體免疫調節過程中的反饋性增高，IL-37可減少炎性因子IL-lα、TNF的產生。

IL-36亞族由單核細胞及B細胞分泌，包括IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-36Ra多種細胞因子。有研究[10]報道：在AS患者中IL-36α作為重要的促炎因子可出現升高。本研究數據符合上述觀點，IL-36Ra為IL-36的受體拮抗劑具有抗炎效能，在AS患者血清多呈現降低。IL-34存在于機體多種組織，目前臨床對IL-34的研究較為少見，其生理效能主要與巨噬細胞的分化增殖有關，在風濕性疾病中IL-34普遍增高，IL-34與巨噬細胞集落刺激因子擁有共同的受體，可誘導多種細胞因子及趨化因子的表達[11]。在AS患者IL-34出現升高，動物實驗[12]顯示：IL-34對破骨細胞具有分化作用。目前尚不了解IL-34與AS發病機制的關系，仍需進一步深入研究。CRP為急性實相反應蛋白與ESR相似均與疾病的活動性相關，本研究相關性分析顯示：IL-lα、IL-34與ESR、CRP呈正相關，IL-1Ra與ESR、CRP呈負相關，均具統計學意義。

綜上所述，IL-1家族細胞因子和IL-34與AS關系密切，IL-1家族細胞因子和IL-34的檢測對AS的診斷及疾病的活動性有重要的臨床意義。