兩種血液檢測方式對核酸試劑有效利用率的分析比較

張照陽

［作者單位］450000河南鄭州，河南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科（張照陽）

根據(jù)《血站質(zhì)量管理規(guī)范》設(shè)立規(guī)范的血液檢測實驗室，建立完善的血液制備管理體系，確保血液安全有效并嚴格執(zhí)行隔離與放行制度［1］。血標本在全自動核酸檢測儀器（nucleic acid amplifica－tion testing，NAT）下檢測乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、獲得性免疫缺陷病毒（HIV），該檢測儀器的靈敏度、特異性度高，檢測為假陽性的概率低，保證檢測結(jié)果的正確性和可信性。另外，我國于2015年制定了《血站技術(shù)操作規(guī)程》［2］，進一步對核酸檢測做了規(guī)范性的指導(dǎo)，試驗中將嚴格按照指導(dǎo)規(guī)范操作，保證結(jié)果的正確和可信。提高核酸試劑的效能和利用率是現(xiàn)在研究的一項重點工作，為了探索最佳檢測方式，故筆者對核酸試劑采用不同方式進行檢測，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年、2017年市中心血站無償獻血者標本分別為8000份、8500份 （快速HBsAg和ALT試紙檢測血液標本合格）。獻血者需根據(jù)《獻血者健康檢查要求》［3］和《中華人民共和國獻血法》［4］選取。

1.2 試劑與儀器HIV、HCV、HBV ANT聯(lián)合測試（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)）；全自動核酸檢測系統(tǒng)（北京博暉創(chuàng)新光電技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)）；3k30德國SIGMA低溫高速離心機 （上海基匯生物科技有限公司），儀器都經(jīng)過校準并在有效期內(nèi)。

1.3 方 法

1.3.1 分組方法 對照組：2016年度實驗站對實行批放行的血液樣本進行血型、ANT、ELISA等常規(guī)初檢，若ELISA初檢時樣本結(jié)果為“反應(yīng)性”則進行雙孔復(fù)檢，若復(fù)檢為“反應(yīng)性”無須進行核酸試驗，所有檢測結(jié)果為“無反應(yīng)性”的標本均需進行核酸試驗。先對8個標本采用核酸檢測系統(tǒng)進行混檢并于48h內(nèi)檢測完畢，對于混檢為陽性的再做拆分測試，在此過程中記錄報廢試劑的原因及狀況并進行總結(jié)。核酸檢測操作步驟如下：取5 ml標本放入低溫高速離心機內(nèi)離心，離心條件為1600 g、20 min，標本需在4 h內(nèi)離心防止RNA降解，離心后置于4℃冰箱內(nèi)靜置30 min；將離心完畢后樣本、HIV、HCV、HBV ANT聯(lián)合測試試劑及芯片置于全自動核酸檢測系統(tǒng)相應(yīng)位置，關(guān)閉儀器門并點擊運行，即可得到檢測結(jié)果。研究組：于2017年按照要求嚴格實行隔離與放行的血液管理制度。優(yōu)化操作人員技術(shù)水平、提高室內(nèi)環(huán)境并加強儀器的管理質(zhì)量，試驗站對每天采集的血標本定為1個大的檢測批，同樣先對血標本行血型、ANT、ELISA（兩次）等常規(guī)初檢，對血液標本檢查為“無反應(yīng)”的結(jié)果進行“滿架”核酸混檢，每天的檢測總量為25個，將剩余的標本在冷凍室保存（4℃），每天按此循環(huán)。根據(jù)對照組的方式進行拆分單檢，對于不合格及“無反應(yīng)性”的血標本禁止核酸檢測，所有測試均在72 h內(nèi)完成，血液質(zhì)量合格的做好標記核對再批放行，同樣在操作過程中記錄報廢試劑的原因及狀況并進行總結(jié)。

1.3.2 數(shù)據(jù)整理 每天記錄好實驗室核酸測試。包括每天標本總數(shù)和試劑總數(shù)、混檢標本數(shù)和試劑用量、拆分試劑用量和報廢的試劑量，做好報廢原因的記錄并進行總結(jié)分析。

1.3.3 計算公式 總有效利用率=實際測試量/試劑標定測試量×100%。

1.3.4 觀察指標 測試完結(jié)后，對比兩種檢測方式的有效利用率和廢用率。

1.3.5 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)，核酸的總有效利用率與總報廢率計數(shù)資料以%表示，數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方式下核酸有效利用率的比較檢測后，研究組的總有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=15.312，P＜0.01）。 見表 1。

2.2 兩種檢測方法的試劑報廢率比較檢測后，研究組的廢棄率低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=14.312，P＜0.01）。 見表 2。

表 1 兩種檢測方式下核酸有效利用率的比較

表 2 兩種檢測方法的試劑報廢原因比較

3 討論

做好血液的篩查工作，保證血液質(zhì)量的安全，是臨床患者用血的根本。全自動化核酸檢測可以減少工作量、減少樣本的污染、高效提取樣本的核酸、實施過程監(jiān)護等。但其成本比較高，為了減少浪費，所以本次實驗采用兩種不同的管理方式對其利用率進行比較且須在48 h完成檢測。據(jù)結(jié)果顯示，優(yōu)化檢測模式可提高試劑有效利用率［5］。

此次研究采用了兩個年度血標本進行試驗，分別采用血液批模式和血液隔離放行模式完成檢測，并在研究組血液隔離放行模式中完善了操作人員技術(shù)水平并加強了環(huán)境管理制度。根據(jù)兩次檢測結(jié)果可知研究組中核酸試劑的利用率優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），研究組中的報廢率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。說明研究組的檢測方式更具有優(yōu)勢，可有效提高試劑利用率，減少資源浪費，可能是研究組中完善了檢測流程，提高了管理方式。李天君等［6］學(xué)者指出導(dǎo)致試劑浪費的原因多是因為檢測流程安排的不夠完善。

綜上所述，強化操作流程、提高工作人員的專業(yè)水平、完善環(huán)境的管理、做好儀器的保管工作，采用研究組方法進行檢測，可進一步的提高核酸檢測的利用率，減少資源的浪費。隨著科技不斷進步，全自動ANT檢測儀器也會升級換代，檢測技術(shù)也將會不斷完善，以后還需做更多血液檢測模式的研究以適用臨床需求。