磁共振檢查中戊巴比妥麻醉乳腺移植瘤兔的最佳濃度探討

李江平，劉 峰，王苗苗，林明明，李文軍，孫業全

動物模型能夠用于研究腫瘤的發生及發展機制。裸鼠是乳腺癌常用的建模動物，但是，裸鼠乳腺癌模型發生腋窩淋巴結的轉移率較低，無法滿足乳腺癌淋巴結轉移研究的需要。兔性情溫順、體型較裸鼠大、易飼養，是外科手術或操作常用的實驗研究對象［1］。 近年來，劉玉璽等［2，3］報道利用新西蘭兔成功建立了乳腺癌腋窩淋巴結轉移模型。

兔作為具有生命的個體，其自主活動不受人為控制，在行磁共振檢查的過程中易產生嚴重的偽影。因此，良好的麻醉是關系兔實驗操作成功的必備條件［4］。據文獻報道，水合氯醛及戊巴比妥是實驗研究中常用的麻醉劑，但由于水合氯醛的單純麻醉劑量不好控制，麻醉過程中易出現不良反應，如腸梗阻、抑制心肌收縮力、縮短心肌不應期、抑制延髓呼吸中樞等［5，6］。 因此，筆者主要對戊巴比妥在行磁共振檢查時所需最佳濃度進行探討，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 主要材料戊巴比妥（上海源葉生物科技有限公司（分裝），德國，批號 69020100），50只 8月齡雌性經產新西蘭兔購于山東省農科院 （許可證號SCXK20090013），美國 GE signa 3.0T MRI，膝關節線圈，固定裝置（自制）。

1.2 溶液配制先用分析天平分別稱取0.5 g、1 g的戊巴比妥，再用0.9%的氯化鈉溶液配置成濃度分別為0.5%和1%的戊巴比妥鈉溶液。

1.3 動物模型的建立將液氮保存的VX2瘤組織在37℃的生理鹽水中復蘇，然后裁剪成1 mm3大小的組織塊種植于雄兔右后肢肌肉豐富區，3 W后取出1 cm3大小的瘤組織，去除表面纖維結締組織和血液，在滴有慶大霉素的生理鹽水中裁剪，大小1 mm3，將裁剪好的瘤組織種植于50只雌兔左側第3乳腺內，待腋窩處能觸及腫大的淋巴結后將乳腺移植瘤切除，保留乳頭。

1.4 模型分組從建成的動物模型中隨機選出40只并將其隨機分為A、B兩組，A、B兩組分別用0.5%和1%的戊巴比妥鈉進行麻醉，麻醉劑量30 mg/kg，麻醉滿意后行常規T1WI和T2WI檢查，觀察并記錄麻醉劑的起效時間，掃描圖像的質量及掃描結束后兔的狀態，圖像質量。

1.5 麻醉效果評價標準［7］（1）麻醉優良，表現為呼吸減慢，四肢松弛，角膜反射；（2）麻醉不良，呼吸抑制；（3）死亡。

1.6 圖像質量評價圖像主要由兩位主任醫師評價，意見不統一時由第3位主任醫師判定。標準：優良，圖像無偽影，組織結構清晰可辨；中等：圖像有偽影，組織尚可辨；差：圖像有偽影，組織不可辨。

1.7 統計學分析利用SPSS 20.0軟件進行統計學分析，率的比較以%表示，采用χ2檢驗；起效時間、使用量的比較用（±s）表示，采用t檢驗。 取P＜0.01為差異具有極顯著性。

2 結果

0.5%戊巴比妥鈉麻醉起效時間（6±1.6）min，麻醉維持時間約1 h；1%戊巴比妥鈉麻醉起效時間約（1±0.2）min，維持時間約 2.5 h 左右；掃描圖像均清晰無運動偽影，檢查完成后實驗兔均處于麻醉狀態，整個實驗過程中A組實驗兔未出現因麻醉過量死亡，B組中麻醉致死1只。麻醉效果及對比分析分別見表1、表2。

表 2 麻醉劑的濃度及麻醉效果比較

3 討論

磁共振具有極好的組織分辨力，時間及空間分辨力，不僅廣泛應用于動物模型建立的評價中，而且也可對實驗干預效果進行評價。不足之處：磁共振檢查時間長，檢查過程中需要實驗動物保持較長時間靜止狀態。所以，成功的麻醉是保證實驗順利進行的重要環節。選擇合適的麻醉藥物、麻醉藥物濃度和劑量、麻醉方法是麻醉成功的先決條件。戊巴比妥是實驗研究中較常用的麻醉劑之一［8］。戊巴比妥鈉為白色粉劑，相對分子質量為248.26，易溶于水，水溶液呈堿性，屬于中效巴比妥類中樞神經抑制藥，隨劑量由小到大，相繼出現鎮靜、催眠和麻醉作用。戊巴比妥的麻醉的效果與注射濃度和注射方式有關；因此，不同的實驗目的需要配置出不同濃度的戊巴比妥溶液。目前，關于戊巴比妥的注射方式、注射劑量及濃度的研究報道有很多，但是，關于將其應用于磁共振檢查的合適濃度的研究尚少。該研究主要探討了在滿足麻醉效果的前提下經靜脈注射戊巴比妥麻醉兔乳腺移植瘤腋窩淋巴結轉移模型所需的合適劑量。研究發現：（1）和0.5%的戊巴比妥相比，濃度為1%的戊巴比妥起效時間短（約1 min），麻醉速度快，節約實驗時間。MR掃描儀價格昂貴，試驗用的更甚，非一般實驗室所能承擔。因此，大部分的實驗研究都是在合作的醫院進行，受各種因素的影響，應盡可能地縮短不必要的實驗時間。1%的戊巴比妥的誘導時間明顯短于0.5%的戊巴比妥，兩者差異顯著（P＜0.01），大大節省實驗時間。（2）安全性。該研究過程中麻醉致死率為95%，與劉為萍等［9］研究不一致?？赡茉颍孩僭撗芯康臉颖玖枯^小，未達到統計學要求的理想樣本；②注射速度緩慢。左艷芳等［10］研究發現，注射速度過快極易引起實驗動物的死亡。該研究的注射速度為0.17ml/s，低速注射能夠使麻醉劑在血液中得到良好的稀釋，麻醉作用較平緩，動物的承受力相對增強，減少了因注射速度快造成實驗動物的死亡。（3）麻醉深度。麻醉狀態一般分為四期：誘導期、淺麻期、深麻期以及恢復自主期。磁共振檢查屬于無創操作，相對于有創操作而言其所需的麻醉深度較低，只要動物失去自主活動能力即可。因此，只需將實驗動物麻醉至淺麻期（實驗動物停止爬動后，呈側臥狀，翻正反射消失，對非疼痛刺激無肢體動作反應，以胸式呼吸為主，肌肉松弛即進入淺麻期）即可。一般實驗的麻醉標準是角膜反射消失，該標準下麻醉的程度較深，這樣不但浪費麻醉藥品，又會對實驗動物造成損害。（4）注射方便。3～4 kg的實驗兔一般用1%的戊巴比妥8 ml即可，而0.5%的戊巴比妥用量約是1%的兩倍，注射時不方便，且短時間內注入大量液體可能造成心衰。另外注射時針頭的選取以5 ml注射器配備的為最佳，其直徑略小于充盈狀態下的耳緣靜脈，落空感明顯。

綜上所述，1%的戊巴比妥在磁共振檢查的應用中麻醉效果好、安全性高及麻醉方便，是較為理想的麻醉濃度。