楊少宗,陳家龍,柳新紅,林昌禮,程亞平,方 茹,*
(1.浙江省林業(yè)科學(xué)研究院,浙江 杭州 310023;2.溫州科技職業(yè)學(xué)院,浙江 溫州 325006;
3.云和縣農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)有限公司,浙江 麗水 323600;4.浙江省慶元縣慶元林場,浙江 麗水 323800)
木槿(Hibiscus syriacus L.)為錦葵科木槿屬,木本,花期長,是夏秋主要的觀花植物,除了觀賞綠化外,木槿還是一種具有優(yōu)良保健作用的花卉。木槿屬在全球分布約220 種[1-2],目前對木槿屬植物的研究主要集中在活性成分上,木槿屬植物含有多酚類、萜類以及植物固醇類等多種活性成分,藥理研究表明這些活性成分具有抗炎、退熱、止瀉、保肝、抗高血壓、抗糖尿病、抗氧化、抗腫瘤等作用[3-4]。木槿花又被稱為面花、雞肉花,烹飪?nèi)腽傇缭跁x代就有記載[5],在浙南、皖南、閩北、閩西和贛南等地區(qū)一直保留食用木槿花的習(xí)俗[6-8]。隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,木槿作為食用花卉,烹飪方法多樣,味道清香,滑嫩可口,已成為綠色高檔菜肴。目前對木槿花營養(yǎng)價(jià)值的報(bào)道已有涉及[9-11],但都不夠全面和深入,本實(shí)驗(yàn)將全面檢測木槿花的中各營養(yǎng)成分,并通過科學(xué)的評價(jià)體系對其進(jìn)行分析,為證明木槿花可作為一種優(yōu)良的食材提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
木槿在國內(nèi)分布廣泛,從遼寧到廣東均有栽培,而作為食用花卉栽培生產(chǎn),主要集中在長江以南地區(qū),如安徽南部、江西、上海、浙江、福建和廣州等地。在浙江南部地區(qū)廣泛栽培生產(chǎn)的食用木槿變型主要有雅致木槿(H. syriacus f. elegantissimus)、白花重瓣木槿(H. syriacus f.albus-plenus)、紫花重瓣木槿(H. syriacus f. violaceu),通過引種馴化,各地形成了各自不同的品系。本研究將在浙江龍泉和蒼南地區(qū)采集的以上3 個(gè)木槿變型的不同品系進(jìn)行檢測,比較這些品系的主要營養(yǎng)成分,為食用木槿的品種選育、開發(fā)利用等提供理論依據(jù)。
供試樣本總共5 份,分別為從浙江龍泉采集的雅致木槿(A1)、紫花重瓣木槿(A2)、白花重瓣木槿(A3)和浙江蒼南采集的白花重瓣木槿(B1)、紫花重瓣木槿(B2)。
甲醇、乙腈為均色譜純,其余試劑均為分析純。
KJE LTEC 2300全自動凱氏定氮儀、2010纖維測定儀 丹麥Foss公司;SOLAAR Mk2-M6型原子吸收分光光度計(jì) 美國Thermo Elemental公司;LC-20A高效液相色譜儀 日本島津公司;SPECORD?210 PLUS紫外-可見光分光光度計(jì) 德國Analytikjena公司;L-8900氨基酸分析儀 日本日立公司;7900電感耦合等離子體質(zhì)譜儀美國Agilent公司。
1.3.1 樣本采集
通過對開花物候期的觀察,確定木槿開花前1 d的花蕾大小和形狀,于早晨8:00~9:00采集花蕾,并去掉苞片和雌雄蕊,取新鮮花瓣,放入冰盒中冷藏運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。同一變型按不同植株取樣,每個(gè)變型采集花瓣500 g以上,充分混合后備用。
1.3.2 營養(yǎng)成分測定
水分含量測定:參照GB 5009.3—2010《食品中水分的測定》直接干燥法;粗蛋白含量測定:參照GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測定》定氮蒸餾法;粗灰分含量測定:參照GB 5009.4—2010《食品中灰分的測定》灼燒稱重法;膳食纖維含量測定:參照GB/T 5009.10—2003《植物類食品中粗纖維的測定》酸堿消煮法;粗脂肪含量測定:參照GB/T 5009.6—2003《食品中脂肪的測定》酸水解法;多糖含量測定:參照GB/T 5009.8—2008《食品中蔗糖的測定》高效液相色譜法;鐵、鎂、鋅、鈣、鉀、硒含量測定:分別依據(jù)GB/T 5009.90—2003《食品中鐵、鎂、錳的測定》、GB/T 5009.14—2003《食品中鋅的測定》、GB/T 5009.92—2003《食品中鈣的測定》、GB/T 5009.91—2003《食品中鉀、鈉的測定》、GB/T 5009.93—2010《食品中硒的測定》的原子吸收分光光度法;VA和VE含量測定:參照GB/T 5009.82—2003《食品中維生素A和維生素E的測定》高效液相色譜法;VC含量測定:參照GB/T 5009.86—2003《蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定(熒光法和2,4-二硝基苯肼法)》熒光法和2,4-二硝基苯肼法;VPP含量測定:參照GB 5413.15—2010《嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測定》微生物法;VB1和VB2含量測定:參照GB 5413.11—2010《嬰幼兒食品和乳品中維生素B1的測定》、GB 5413.12—2010《嬰幼兒食品和乳品中維生素B2的測定》高效液相色譜法;總黃酮和原花青素含量測定:參照《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003版)的分光光度計(jì)法;亞硝酸鹽含量測定:參照GB 5009.33—2010《食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定》分光光度法;氨基酸含量用SYKAM 443D氨基酸分析儀測定,檢測方法參照GB/T 5009.124—2003《食品中氨基酸的測定》。所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次。營養(yǎng)成分、礦物質(zhì)、主要維生素及其他成分含量均以濕基計(jì)。
1.3.3 總碳水化合物和能量的計(jì)算
總碳水化合物采用減差法計(jì)算,能量采用能量折算系數(shù)來計(jì)算[12],均以濕基計(jì)。
1.3.4 氨基酸組成分析
采用世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(Food and Agriculture Organization,F(xiàn)AO)提出的必需氨基酸比值(essential amino acid,EAA)系數(shù)法[13-15],并以FAO/WHO的必需氨基酸模式為標(biāo)準(zhǔn)模式[16-17],根據(jù)公式(1)~(3)可計(jì)算木槿花所含必需氨基酸的氨基酸比值(ratio of amino acid,RAA)、氨基酸比值系數(shù)(ratio coefficient,RC)和比值系數(shù)分(score of ratio coefficient,SRC)。氨基酸含量以每克蛋白含有氨基酸毫克數(shù)計(jì)(干基)。

1.3.5 主成分分析
根據(jù)主成分分析方法對5 份樣本的基本營養(yǎng)成分、礦物質(zhì)、維生素、氨基酸以及功能性成分共20 個(gè)指標(biāo)進(jìn)行主成分變量提取,建立綜合評價(jià)函數(shù),得到每個(gè)樣品的綜合得分及排名[18-20]。
利用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行顯著性分析(P<0.05)、數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化和主成分分析。

表1 木槿花基本營養(yǎng)成分Table 1 Proximate nutritional composition of the petals of Hibiscus syriacus L.
由表1可知,水分和粗灰分的含量5 份樣本沒有顯著性差異,其余營養(yǎng)成分5 份樣本之間存在顯著性差異。另外,與常見的食用花卉玫瑰相比[21],木槿花的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和膳食纖維含量較低,而與綠葉類蔬菜花椰菜相比[14],木槿花的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和膳食纖維含量略高,能量則明顯高于蔬菜。其中,膳食纖維雖然不具有營養(yǎng)價(jià)值,但與人體的營養(yǎng)有著密切關(guān)系,被稱為第7營養(yǎng)素,能預(yù)防和治療多種疾病[22-23]。

表2 木槿花主要礦質(zhì)營養(yǎng)元素含量Table 2 Contents of mineral elements in the petals of Hibiscus syriacus L.mg/100 g
如表2所示,各種礦質(zhì)元素含量在5 份樣本之間存在顯著性差異,其中B2樣本優(yōu)勢比較明顯,其鈣、鐵、鋅、硒的含量在5 份樣本中均最高。木槿花與玫瑰花相比,其中鈣和鎂含量略低,鐵含量明顯低,鋅含量較高;與花椰菜相比,其中鈣、鐵、鋅含量基本相同,鎂和鉀含量較高,硒含量很低。

表3 木槿花主要維生素含量Table 3 Vitamin contents in the petals of Hibiscus syriacus L.mg/100 g
由表3可知,5 份樣本中VE、VC、VB1和VB2均存在顯著性差異,其中,VE含量差異比較明顯,A1、B1和B2的VE含量為0.01 mg/100 g,而A2為0.04 mg/100 g,A3為0.49 mg/100 g。與玫瑰花相比,木槿花VC含量較低。與花椰菜相比,木槿花的維生素含量也不占優(yōu)勢,總體偏低。其中,VC含量比蔬菜略低,其含量大多在20~30 mg/100 g之間,而花椰菜為61 mg/100 g,為木槿花的2 倍左右。木槿花V B1含量略高,在0.05~0.08 mg/100 g之間。木槿花中VE、VC和VPP含量比蔬菜低。
2.4.1 氨基酸組成分析
蛋白質(zhì)通常由20 種氨基酸構(gòu)成,其中包括8 種必需氨基酸。對人體而言,判斷一種蛋白質(zhì)是否為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì),主要參考該蛋白質(zhì)中必需氨基酸的種類、數(shù)量以及含量。雖然木槿花蛋白質(zhì)含量較低,僅為2%左右,作為蛋白質(zhì)來源意義不大,但作為一種食物資源,了解其組成有一定意義,同時(shí)作為一種食材,其中游離氨基酸的存在對于口感具有意義。由表4可知,木槿花含有16 種氨基酸,5份樣本氨基酸的總量分別為1 034.92、718.75、644.44、908.33、875.63 mg/g,樣本中氨基酸總量大于1 000 mg/g,說明在木槿花中存在較多的游離氨基酸。在各種氨基酸中,5 份樣本均以谷氨酸最高,分別占總氨基酸含量的16.25%、12.11%、12.58%、17.84%、14.28%。除此以外,天冬氨酸和酪氨酸含量也較高,谷氨酸、天冬氨酸和酪氨酸均為呈味氨基酸,5 份樣本呈味氨基酸所占比例分別為36.75%、31.88%、27.17%、41.84%、33.14%。食用玫瑰花的呈味氨基酸含量為26.60%[21],與木槿花相比較低。

表4 木槿花氨基酸種類及含量Table 4 Amino acid composition of the petals of Hibiscus syriacus L.mg/g
食物蛋白營養(yǎng)價(jià)值的優(yōu)劣主要取決于所含EAA的種類、數(shù)量和組成比例,其組成比例越接近人體需要氨基酸的比例,則其質(zhì)量就越優(yōu),WHO/FAO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)為EAA與總氨基酸比值為40%。在木槿花16 種氨基酸中含有7 種人體必需氨基酸,5 份樣本中EAA與總氨基酸比值分別為32.65%、40.00%、37.93%、34.48%、33.57%,其中A2已達(dá)到標(biāo)準(zhǔn),其余4 份樣本比標(biāo)準(zhǔn)略低,但差距并不大。由于WHO/FAO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)并非針對植物蛋白,目前研究表明完全符合此標(biāo)準(zhǔn)的植物蛋白并不多,如食用玫瑰花EAA與總氨基酸比值也僅為37.78%[21]。因此,總體來說木槿花所含蛋白屬于比較優(yōu)質(zhì)的植物蛋白。
2.4.2 必需氨基酸比值系數(shù)法評價(jià)木槿花蛋白營養(yǎng)價(jià)值

表5 必需氨基酸平均比值系數(shù)比較Table 5 Average ratio coefficients of essential amino acids in the petals of Hibiscus syriacus L.
若木槿花蛋白中必需氨基酸的組成比例與WHO/FAO氨基酸模式一致,則各種必需氨基酸的RC應(yīng)等于1,若大于1表明該種必需氨基酸相對過剩,若小于1則表明該種必需氨基酸相對不足,RC最小者為第1限制性氨基酸。由表5可知,5 份樣本中色氨酸均未檢測出,因而為第1限制性氨基酸。在A2、A3和B1樣本中,蛋氨酸的RC值也較小,均小于0.5,為第2限制性氨基酸。SRC值是評判食物中蛋白營養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo),SRC值越大,說明待評蛋白質(zhì)越接近標(biāo)準(zhǔn)模式,其營養(yǎng)價(jià)值越高;相反,SRC值越小,說明待評蛋白質(zhì)越偏離標(biāo)準(zhǔn)模式,其營養(yǎng)價(jià)值越低。5 份樣本的SRC值分別為36.3、18.88、20.69、-6.23、43.18,說明在這5 份樣本中,其蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值高低的順序?yàn)锽2>A1>A3>A2>B1。

表6 食用木槿新鮮花瓣中其他成分Table 6 Contents of bioactive components in the petals of Hibiscus syriacus L.
如表6所示,植物多糖具有較高的營養(yǎng)價(jià)值以及抗菌、抗氧化、抗衰老等作用,且植物多糖水溶性好,因此作為食用花卉,對其利用率高。在5 份樣本中,A1、A2和B2多糖含量較高,分別為1 301.45、1 405.57 mg/100 g和1 605.76 mg/100 g,其中B2是A3(412.45 mg/100 g)的4 倍。植物多酚作為一大類次級代謝產(chǎn)物,具有很強(qiáng)抗氧化性和清除自由基能力,原花青素是其中重要的一類[24-25],黃酮類化合物具有消除疲勞、保護(hù)血管、抗氧化、抗腫瘤、抑菌、抗病毒、抗輻射、抗過敏、降血糖等作用[26-27]。在5 份樣本中,原花青素較高的有A1、A2和B2,分別為36.60、46.63、63.17 mg/100 g,總黃酮較高的有A1和B2,分別為92.33、66.33 mg/100 g。
根據(jù)GB 18406.1—2001《農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無公害蔬菜安全要求》,要求新鮮食用蔬菜中亞硝酸鹽含量一般控制在432 μg/g以下,由表6可知,在木槿花5 份樣本中,亞硝酸鹽含量均較低,不存在顯著性差異,基本都在2 μg/g左右,遠(yuǎn)低于432 μg/g。
由于硒和VPP無具體數(shù)值需要剔除,用計(jì)算出來的必需氨基酸平均比值系數(shù)代替16 種氨基酸,利用軟件SPSS 19.0對5 份樣本的20 項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行主成分分析,得到各主成分的特征值,方差貢獻(xiàn)率和累計(jì)方差貢獻(xiàn)率,如表7所示。

表7 各主成分的特征值及方差貢獻(xiàn)率Table 7 Eigen values of principal components and their contribution rates to total variance
由表7可知,前4 個(gè)主成分的特征值大于1,累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到100.000%,該累計(jì)貢獻(xiàn)率大于85%,說明前4 個(gè)主成分能夠代表全部20 個(gè)指標(biāo)的大部分信息(100.000%)。因此,將樣品的20 個(gè)指標(biāo)綜合成4 個(gè)主成分。根據(jù)各主成分的載荷矩陣與特征值計(jì)算得到主成分的特征向量如表8所示。
根據(jù)表8,構(gòu)建各主成分成分得分與樣本各標(biāo)準(zhǔn)化后的指標(biāo)值之間的線性關(guān)系式:
第1主成分得分F1=-0.091X1+0.087X2+0.054X3-0.074X4+0.044X5+0.088X6+0.092X7+0.009X8+0.03X9+0.058X10+0.092X11+0.094X12+0.063X13-0.08X14-0.032X15+0.033X16-0.063X17-0.073X18-0.057X19-0.094X20
第2主成分得分F2=-0.078X1-0.071X2-0.128X3+0.01X4+0.185X5+0.085X6+0.068X7+0.184X8+0.157X9+0.096X10+0.012X11-0.023X12+0.018X13-0.029X14+0.174X15-0.098X16+0.121X17+0.052X18+0.099X19+0.04X20
第3主成分得分F3=-0.006X1+0.112X2-0.143X3+0.214X4-0.017X5+0.003X6+0.022X7-0.154X8+0.083X9+0.2X10+0.006X11+0.082X12-0.218X13-0.178X14-0.145X15+0.095X16-0.05X17+0.193X18+0.174X19-0.037X20
第4主成分得分F4=0.014X1+0.027X2+0.18X3-0.073X4+0.083X5-0.077X6-0.062X7+0.078X8-0.253X9+0.145X10-0.157X11+0.046X12+0.191X13-0.087X14+0.09X15+0.36X16+0.231X17+0.114X18+0.196X19-0.08X20

表8 各主成分的載荷矩陣和特征向量Table 8 Principal component loadings matrices and characteristics vectors
根據(jù)綜合評價(jià)函數(shù)中各主成分的系數(shù)為其對應(yīng)的方差貢獻(xiàn),建立樣品的綜合評價(jià)模型:F=0.509F1+0.236F2+0.148F3+0.107F4。由該模型計(jì)算可得到5 個(gè)樣本的綜合評分及排名如表9所示。5 個(gè)樣本的綜合評分結(jié)果為B2>A2>A1>B1>A3,其中B2和A2的分值比較接近,說明從礦物質(zhì)、生物活性物質(zhì)和氨基酸各指標(biāo)綜合的主成分分析角度來說,B2和A2具有更高的價(jià)值。

表9 樣品綜合評價(jià)結(jié)果及排序Table 9 Comprehensive evaluation and ranking order of different samples
結(jié)果表明,木槿花中含有蛋白質(zhì)、脂肪、粗纖維、糖、各種礦質(zhì)元素和維生素等基本營養(yǎng)元素。與綠葉類蔬菜相比,蛋白質(zhì)、脂肪、膳食纖維、鈣、鐵、鋅的含量略高或基本相同,鎂和鉀含量較高,鎂對心臟血管具有重要的保護(hù)作用,可防治中風(fēng)、冠心病[28],鉀則有明顯的降血壓作用[29-30]。與食用玫瑰花相比,木槿花的蛋白質(zhì)、脂肪、膳食纖維、VC以及大多數(shù)礦質(zhì)元素均略低,因此,其營養(yǎng)價(jià)值低于食用玫瑰花。但從氨基酸組成的分析結(jié)果可知,木槿花的呈味氨基酸含量高于玫瑰花,呈味氨基酸賦予了木槿花瓣入菜肴時(shí)鮮美的口感,這是作為優(yōu)良食材的必備因素之一。對木槿花必需氨基酸組成分析表明,蛋氨酸含量較低,色氨酸未檢測出,因此,蛋氨酸和色氨酸為其限制性氨基酸,其他必需氨基酸含量則與標(biāo)準(zhǔn)氨基酸模式基本一致,如在菜肴中添加富含色氨酸和蛋氨酸的原材料,如芝麻、葵花籽等,可增加木槿花的營養(yǎng)價(jià)值。此外,木槿花中含有具有保健作用植物多糖、黃酮類化合物和原花青素等功能性成分。綜上所述,木槿作為食用花卉,其營養(yǎng)成分種類齊全,含量豐富,既具有增加口感的營養(yǎng)成分,又具有增強(qiáng)保健作用的功能性成分,與現(xiàn)代人膳食理念一致,是一種具有推廣和應(yīng)用價(jià)值的食用花卉。
從木槿花5 份不同樣本營養(yǎng)成分的比較結(jié)果來看,營養(yǎng)成分組成基本一致,但具體的含量有明顯差異:在礦質(zhì)元素含量上,B2樣本優(yōu)勢比較明顯,其鈣、鐵、鋅、硒的含量在5 份樣本中均最高;在功能性成分含量上,原花青素和多糖在B2、A2和A1樣本中明顯較高,總黃酮在A1和B2樣本中較高;5 份樣本VE含量相差較大,A2和A3相對較高,但總體上木槿花的維生素含量比普通綠葉蔬菜要低,因此,這種情況下樣本之間的差異意義不大。主成分分析結(jié)果表明,B2具有最高分值,其次為A2,2 種分值比較接近。根據(jù)以上因素綜合考慮,在本實(shí)驗(yàn)所選擇的5 個(gè)不同品系中,B2和A2樣本營養(yǎng)價(jià)值最高。由此可見,決定木槿花營養(yǎng)價(jià)值的主要原因是遺傳因素,B2和A2樣本屬于食用木槿的同一變型,即紫花重瓣木槿,因此,在營養(yǎng)價(jià)值的各項(xiàng)指標(biāo)上均比較相近。但本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,環(huán)境因素對木槿花營養(yǎng)價(jià)值的高低也有影響,B2和A2分別栽培在浙江蒼南和浙江龍泉,栽培地理環(huán)境、氣候以及水肥管理等都不相同,造成2 個(gè)品系在具體的營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)指標(biāo)上也有較大差異。綜上所述,紫花重瓣木槿變型在作為食用木槿品種選育上具有較大的發(fā)展前景,同時(shí),合適栽培地的選擇和科學(xué)的水肥管理也是關(guān)鍵。