冠心病患者血清軟骨寡聚基質蛋白水平變化及其與冠狀動脈鈣化的關系

何雨峰 李寧俠 李建華 強 鋒 楊澤華

冠狀動脈粥樣硬化型心臟病簡稱冠心病(coronary heart disease，CHD)，是因冠狀動脈管壁形成粥樣斑塊造成血管狹窄從而引發的臨床綜合征。冠狀動脈硬化進展期易發生冠狀動脈鈣化，而冠狀動脈鈣化是CHD的重要影像特征，與粥樣硬化嚴重程度呈顯著相關[1]。臨床常用CT冠狀動脈鈣化積分評估冠狀動脈鈣化的程度，冠狀動脈鈣化積分升高與CHD急性事件發生率呈正相關，積分越高的患者急性心肌梗死及心源性猝死的發生率越高[2]。雖然CT定量冠狀動脈鈣化積分可反映冠狀動脈鈣化程度，預測未來心血管事件，但反復CT檢查增加患者放射線暴露的風險，且CT定量冠狀動脈鈣化評分不適于持續動態觀察CHD患者粥樣硬化的進展，探討可反映冠狀動脈鈣化程度的血清學指標成為臨床研究的熱點[3]。

軟骨寡聚基質蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，COMP)屬糖蛋白G家族，由5個相同含有755個氨基酸的亞單位構成，常用于骨關節炎、類風濕性關節炎等的診斷和療效評估。近年來的研究發現，血管壁基質中的COMP參與血管鈣化的發生，血液透析患者血清COMP濃度與血管鈣化和心血管事件成正相關[4]。目前，COMP與CHD患者冠狀動脈鈣化的關系研究較少。為此，本研究通過對CHD患者血清COMP水平變化及其與冠狀動脈鈣化的關系，分析探討COMP與冠狀動脈鈣化積分的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月至2018年2月在西安醫學院第二附屬醫院就診的237例CHD患者，將其納入觀察組，其中男性131例，女性106例；年齡52～77歲，平均年齡(66.05±7.26)歲；體質量指數(23.87±3.26)kg/m2。抽取同期在醫院正常體檢的237名健康者，將其納入對照組，其中男性136名，女性101名；年齡51～77歲，平均年齡(66.42±6.14)歲；體質量指數(23.56±3.39)kg/m2。兩組受試者性別、年齡、體質量指數、個人史、家族史及合并疾病等一般資料比較差異均無統計學意義，具有可比性。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①有CHD的臨床癥狀，冠狀動脈CT血管成像或冠狀動脈造影至少1支冠狀動脈血管狹窄程度＞50%，符合CHD的診斷標準[5]；②年齡≥50歲，性別不限；③首次確診，既往無CHD史；④患者對研究知情并簽署知情同意書。

(2)排除標準：①合并嚴重肝腎功能不全、老年性瓣膜病、高血壓心臟病、風濕、類風濕關節炎、骨關節炎、肥厚型心肌病及原發性甲亢者；②對碘造影劑過敏者；③合并感染性疾病、血液系統疾病、惡性腫瘤、結核、甲狀腺疾病者；④合并免疫系統疾病、結締系統疾病者；⑤精神疾病、認知功能障礙、視聽功能障礙，不能正確交流者；⑥擬納入或已納入其他臨床研究者。

1.3 儀器設備

采用BS-800M型全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫療電子設備有限公司)；BC-5380型全自動血液細胞分析儀(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司)；特定蛋白分析儀(深圳市國賽生物技術有限公司)。

1.4 觀察與評價指標

(1)實驗室檢查。兩組受試者入組后抽取空腹靜脈血，采用ELISA法測定血清COMP水平。觀察組患者同時檢測血脂、同型半胱氨酸(Hcy)、白細胞(white blood cell，WBC)以及C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。

(2)冠狀動脈鈣化積分(CAC scoring，CACS)。參照Agatston等[6]和馮勤穎等[7]方法進行計算：①CT值＞130 HU、鈣化面積＞1 mm2；②鈣化面積×鈣化灶峰值計分，130～199 HU=1分，200～299 HU=2分，300～399 HU=3分，≥400 HU為4分，一條血管各鈣化灶積分之和為該支血管總積分，以0分為無鈣化，≤100分為輕度鈣化，101～400分為中度鈣化，＞400分為重度鈣化；③根據評分將患者分為≤100分和＞100分，分別代表無明顯鈣化和明顯鈣化。

1.5 分析方法

(1)以是否明顯鈣化作為應變量，將年齡(＜60歲=0，60～75歲=1，＞75歲=2)、性別(女=0，男=1)、體質量指數(＜24 kg/m2=0，≥24 kg/m2)、CHD家族史(否=0，是=1)、吸煙(否=0，是=1)、飲酒(否=0，是=1)、高血壓(否=0，是=1)、糖尿病(否=0，是=1)、低密度脂蛋白(LDL-C＜3.12 mmol/L=0，≥3.12 mmol/L=1)、高密度脂蛋白(HDL-C＜1.04 mmol/L=0，≥1.04 mmol/L=1)、總膽固醇(TC＜5.2 mmol/L=0，≥5.2 mmol/L=1)、甘油三脂(TG＜1.7 mmol/L=0，≥1.7 mmol/L)、WBC(＜10×109/L=0，≥10×109/L=1)、Hcy(＜10μmol/L=0，≥10μmol/L=1)、CRP(連續變量)、COMP(＜157.2 ng/ml=0，≥157.2 ng/ml=1)引入二分類多因素logistic分析。

(2)以是否明顯鈣化為應變量，將自變量賦值后引入多因素logistic分析，COMP預測明顯鈣化的靈敏度、特異度、最佳截斷值(Cut-off)和受試者工作(receiver operating characteristic，ROC)曲線下面積(area under curve，AUC)采用ROC曲線分析。

1.6 統計學方法

本研究所有數據均輸入Excel2007建立數據庫，采用SPSS 23.0軟件進行統計學數據分析。計量資料采用均數±標準差(x-±s)表示，采用獨立樣本t檢驗，以p＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組COMP水平相比較

對照組受試者COMP水平為(111.74±21.86)ng/ml，觀察組患者COMP水平為(162.74±22.61)ng/ml，兩組比較差異有統計學意義(t=19.082，p＜0.001)。

2.2 CHD有無鈣化患者COMP水平相比較

經對觀察組CHD患者進行CACS評分，其中0分21例，1分61例，3分63例，4分92例；無明顯鈣化患者共82例(占34.60%)，明顯鈣化患者155例(占65.40%)。無明顯鈣化患者COMP水平為(145.42±17.17)ng/ml，明顯鈣化患者COMP水平為(170.37±16.14)ng/ml，明顯鈣化組COMP水平顯著高于無明顯鈣化組，差異有統計學意義(t=8.719，p＜0.001)。以CACS評分為金標準，繪制COMP預測明顯鈣化的ROC，確定COMP預測CACS的最佳截斷值為157.2 ng/ml，預測的靈敏度為73.5%，特異度為86.6%，AUC為0.85，95%CI為0.806～0.905，ROC曲線如圖1所示。

圖1 明顯鈣化和無明顯鈣化COMP預測明顯冠狀動脈鈣化的受試者工作曲線圖

2.3 影響CHD患者冠狀動脈鈣化的多因素logistic分析

以是否明顯鈣化作為應變量，將年齡、性別、體質量指數、CHD家族史、吸煙、飲酒、高血壓、糖尿病、LDL-C、HDL-C、TC、TG、WBC、CRP和COMP水平引入二分類多因素logistic分析，年齡、吸煙、糖尿病、CRP和COMP水平是冠狀動脈鈣化的獨立影響因素(OR=5.857，OR=2.688，OR=3.684，OR=1.082，OR=4.639；p＜0.05)，見表1。

3 討論

冠狀動脈鈣化是冠狀動脈粥樣硬化的重要特征，冠狀動脈狹窄程度越高，伴有鈣化的概率越大，與鈣化程度低的患者相比較，鈣化程度高的患者所有的CHD事件、非致死性心肌梗死及CHD猝死等危險事件的危險度更高[8]。

表1 影響冠狀動脈鈣化的多因素logistic分析

近年來的大量研究顯示，冠狀動脈鈣化過程是多因素、多機制共同參與的主動的和可調控的復雜病理生理過程，探討影響冠狀動脈鈣化的危險因素，并給予針對性防控成為目前研究的熱點[9-10]。本研究結果顯示，年齡、吸煙、糖尿病及CRP是冠狀動脈鈣化的獨立危險因素，與多數研究一致[11-14]。

COMP是表達于肌肉骨骼和心血管系統的細胞基質蛋白，血清COMP水平常做為診斷骨關節炎和類風濕性關節炎及預測預后的生物學指標[15]。Riessen等[16]報道，COMP是人血管細胞外基質的正常組分，與血管平滑肌細胞的黏附和趨觸性密切相關。血管平滑肌細胞增殖遷移是動脈粥樣硬化內膜增厚、冠狀動脈成形術后再狹窄和靜脈移植失敗的關鍵[17]。Adams-7可通過降解血管COMP促進血管平滑肌細胞的遷移和內膜增生，導致血清中COMP過表達[18]。Halasz等[19]報道，COMP參與膠原纖維的裝配，是人動脈粥樣硬化斑塊、狹窄斑塊及不同動脈粥樣硬化模型斑塊的基質重要組成成分。本研究結果顯示，觀察組患者血清COMP水平高于對照組，提示COMP參與CHD發病過程，CHD患者血清COMP水平升高，與Wang等[20]研究一致。

近年來的研究顯示，血管平滑肌細胞可產生COMP，主要存在于動脈中膜，參與血管平滑肌鈣化過程，并在鈣化過程中降解，導致血清COMP水平升高[21]。Bond等[22]報道，ApoE和COMP敲除的小鼠可促進膠原纖維增殖和冠狀動脈鈣化形成。Du等[23]研究顯示，COMP敲除可降低體外高鈣環境中培養的血管平滑肌細胞的鈣沉積量，COMP過表達可抑制氯化鈣誘導的主動脈器官培養模型的血管鈣化，COMP缺乏對冠狀動脈鈣化具有明顯促進作用。本研究結果顯示，明顯鈣化CHD患者COMP水平高于無明顯鈣化患者，多因素分析顯示，COMP是冠狀動脈鈣化的獨立危險因素，提示COMP參與CHD患者血管鈣化，血管鈣化患者COMP降解片段增加，導致血清COMP水平升高。AUC不受患病率和診斷界值影響，是診斷試驗的最佳評價指標，理想的AUC為1，ROC位于0.5～0.7之間為診斷價值低，位于0.7～0.9之間為診斷價值中等，＞0.9為診斷價值高，ROC顯示COMP預測CHD患者明顯鈣化的敏感度為73.5%，特異性為86.6%，AUC為0.85，95%CI為0.806～0.905。本研究結果提示，COMP預測CHD患者明顯冠狀動脈鈣化具有一定的臨床價值。

CHD患者COMP水平高于正常人群，是CHD患者冠狀動脈鈣化的獨立危險因素，預測冠狀動脈明顯鈣化具有一定的臨床價值。