組蛋白去乙?；?過表達對多種腫瘤預后影響的meta分析

劉哲然 鄧立彬 劉鈺君 江 峰 楊超智 王語晴 劉進生 胡 川

(南昌大學醫(yī)學院瑪麗女王學院，江西 南昌 330000)

組蛋白去乙?；?HDACs)可以通過緊密染色質結構和增加核小體正電荷沉默mRNA的轉錄。HDAC與組蛋白乙?；腹餐饔?，調節(jié)相關基因的激活和轉錄。組蛋白乙?；腿ヒ阴；缺碛^遺傳學修飾在腫瘤發(fā)生和進展中起著重要作用，包括抑制有關調節(jié)腫瘤增殖，轉移，浸潤；血管分化與形成的正?；颉?〕。HDAC2從屬于第Ⅰ類HDACs，只在細胞核內表達，它可以催化核心組蛋白分子末端的賴氨酸殘基去乙?；狗肿雍徒M蛋白結合更加緊密從而阻斷基因轉錄，在惡性腫瘤的產生和發(fā)展中起重要的調節(jié)作用〔2〕。研究表明在胃癌，食管癌，前列腺癌，腎癌等多種腫瘤中均能發(fā)現(xiàn)HDAC2的高表達〔3～6〕，提示HDAC2的高表達或許對腫瘤的發(fā)展進程和預后起到一定影響。目前，關于HDAC2過表達對于多種腫瘤預后的影響存在一定的爭議。本實驗嘗試運用meta分析的方法，通過在Pubmed，Medline，Cochrane Library，中國知網中進行關鍵字檢索和文獻追溯，通過提取包含風險比(HR)和95%的置信區(qū)間及可用于計算風險比的腫瘤患者生存期的生存曲線，運用統(tǒng)計學方法評價HDAC2基因高低表達對多種腫瘤患者的預后影響。

1 材料和方法

1.1文獻檢索策略 以“(HDAC2 or (histone deacetylase 2) or HD2 or RPD3 or YAF1) AND (cancer or carcinoma or tumor or tumors or neoplasm or neoplasms) AND 〔(survival or survivals) or prognosis or prognostic or (predictive value) or (progression or progressions) or outcome or follow-up or (risk or risks)〕”或“(組蛋白去乙?；?2 or HDAC2) AND (腫瘤or癌癥)”為關鍵詞在Pubmed，Medline，Cochrane Library，中國知網中進行檢索并輔以文獻追溯，收集從1990至2017年6月公開發(fā)表的文獻。

1.2納入與排除標準 納入標準：①原始文獻為已公開發(fā)表的文獻。②研究對象為任一腫瘤。③研究方法為免疫組化或RT-PCR。④研究中包含HR及95%置信區(qū)間或含有可用于計算HR的腫瘤患者總生存期(OS)或無病生存期(DFS)的生存曲線。

排除標準：①無對照實驗。②原始文獻數據不完整。③動物或細胞研究。④腫瘤患者生存期小于24個月。

1.3文獻篩選和資料提取 由兩名研究者獨立進行文獻質量評價，若匯總時數據不一致，則兩名研究者協(xié)商討論，若仍不一致，提交給第三名研究者決定。收集內容包括：腫瘤類型、作者、發(fā)表年限、樣本出處、樣本大小、使用方法、cut-off值、隨訪時間HR。

1.4統(tǒng)計學分析 統(tǒng)計學分析采用Review Manager 5.3(Cochrane Collaboration，Oxford，UK)。通過計算HR及95%置信區(qū)間評估HDAC2的表達與腫瘤患者總體生存率的關系。當異質性大于50%時，采用隨機效應模型進行分析，當異質性小于50%時，采用隨機效應模型進行分析。發(fā)表偏倚通過漏斗圖進行評估。

2 結 果

2.1納入文獻的情況和基本特征 在關鍵詞檢索后進行初次篩選，納入文獻623篇，通過逐層篩選，606篇因為以下原因被排除：①綜述或相關meta分析等無原始數據的文獻。②相關數據不完整，不存在或無法被提取。③患者存活期小于24個月。④采用不合適的方法評估HDAC2表達量。

納入研究的基本特征見表1。一共納入17篇文獻〔5～21〕，乳腺癌研究有5篇，肝癌有3篇，肺癌有2篇，其他腫瘤有7篇。7篇來源于歐洲，7篇來源于亞洲，2篇來源于美國。15篇文獻采用免疫組織化學(IHC)方法獲取數據，2篇文獻采用RT-PCR方法獲取數據。

表1 納入研究的基本特征

2.2HDAC2的表達對腫瘤患者預后的影響 研究數據合并后，對數據進行異質性檢驗，I2=94%，說明文獻間異質性較大，采用隨機效應模型進行分析。研究數據合并后顯示HDAC2高表達的腫瘤患者的總生存期普遍短于低表達患者CI(HR=1.63，95%CI=1.16～2.30，P=0.005)，見圖1。通過亞組分析進一步探究HDAC2高表達與消化道腫瘤患者及乳腺癌患者的預后關系，分別對乳腺癌組和消化道腫瘤患者組進行異質性分析，消化道腫瘤組I2=46%，采用固定效應模型，乳腺癌患者組I2=95%，采用隨機效應模型。合并后發(fā)現(xiàn)HDAC2高表達對于消化道腫瘤患者的預后有顯著的負面影響(HR=2.03，95%CI=1.63～2.53，P<0.000 01)，對乳腺癌患者無顯著差異(HR=1.55，95%CI=0.82～2.95，P=0.19)。見圖2。

圖1 HDAC2表達與多種腫瘤預后關系的meta分析

圖2 HDAC2表達與消化系統(tǒng)腫瘤預后關系的meta分析

2.3敏感性分析和發(fā)表偏倚 通過采用不同的統(tǒng)計模型和排除低質量研究進行敏感性分析，發(fā)現(xiàn)結果并沒有產生顯著改變，說明了現(xiàn)有分析結果的穩(wěn)定性。發(fā)表性偏倚漏斗圖各點基本對稱分布，說明不存在明顯的發(fā)表偏倚，見圖3。

圖3 HDAC2表達與多種腫瘤預后關系的漏斗圖

3 討 論

本研究通過合并17篇可用的臨床文獻揭示了HDAC2基因的表達在多種腫瘤患者預后中所起的重要作用。發(fā)現(xiàn)HDAC2的高表達對于多種腫瘤患者的預后有明顯的負面影響。其影響可能是通過組蛋白去乙酰化，使其與攜帶負電荷的DNA相互結合，抑制抑癌基因的表達與轉錄，致使細胞的過度增殖。HDAC2亦可作用于細胞周期素和周期蛋白依賴性激酶(CDK)，細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CDKi)及視網膜母細胞瘤相關基因(Rb)等與參與維持正常細胞周期和細胞凋亡的相關因子，影響細胞的分裂，分化和凋亡，對腫瘤細胞的增殖產生影響〔22〕。

有文獻〔23〕稱HDAC2的高表達與腫瘤的級別和增殖活性呈正相關，還能促進腫瘤細胞的轉移。通過亞組分析，本研究進一步發(fā)現(xiàn)，HDAC2的高表達對于消化系統(tǒng)腫瘤患者的預后有顯著的負面影響。總體來說，HDAC2表達量越高，患者的總生存期越短。揭示HDAC2可能是消化系統(tǒng)腫瘤生存率的獨立預后因子。

同時本次Meta分析存在一些局限性：①可能存在漏篩，錯篩部分符合標準文獻的情況；②異質性較大，可能需要進一步分離異質性。