牛奶中四環素類獸殘的快速檢測關鍵技術的應用

□ 張 銳 鄂爾多斯市食品檢驗檢測中心

從20世紀70年代開始，各類動物中都開始出現了促進生長、發情等的獸藥，其獸藥量的增長速度逐年遞增，這就在無形之中加劇了我國食品組織以及產品的藥物殘留危害。在牛乳中，VA、VB的數值含量會比較高，其會在一定程度上促進人們的骨骼發育以及生長，所以，乳制品已經成為人們生活中必不可少的一類物質。四環素等獸藥的應用不僅會影響到生態環境，還會給人們的自身安全形成威脅。需要對食品進行更為全面的管理以及監控，提升其實際檢測方式的靈敏程度。

1 牛奶中四環素類獸殘的快速檢測關鍵性技術

現階段，微生物法、免疫學快速檢測是獸藥殘留檢測使用頻率最高的技術方式，通過合理地使用這些技術來快速地篩查乳及乳粉中β-興奮劑類殘留物質。免疫學快速檢測是基于抗原-抗體特異性反應的檢測方法。常見的免疫分析有放射免疫、酶聯免疫吸附試驗和膠體金免疫分析、熒光免疫分析等。放射免疫由于采用放射性物質作為標記物，雖然靈敏度高，但不利于環境保護，限制了其廣泛應用。酶聯免疫要求獸藥小分子和載體蛋白偶聯，用作抗體生產的免疫原和檢測的包被原，目前已開發了多種藥物殘留的ELISA試劑盒。

2 實驗材料以及實驗方式

2.1 實驗儀器

實驗主要使用的是美國Waters公司研發而成的Waters Oasis HLB固相萃取柱、Waters2695高效液相色譜儀配2489紫外檢測器、日本EYELA公司研制的EYELAOSB-2000旋轉儀蒸發儀、我國上海醫療器械集團研發的H66MC超聲波發生器等。

2.2 溶液試劑

甲醇、乙腈以及四環素、土霉素、金霉素、強力霉素等，其純度均要超過95%。

2.3 制備標準貯備液及標準工作溶液

首先，在制備標準儲備溶液時，必須要精確地稱取一定質量的四環素、土霉素、金霉素、強力霉素。將四環素、土霉素、金霉素、強力霉素的質量調控在10 mg，純度要為100%的質量。稱取完成后，要使用甲醇對其進行溶解的處理，讓其定容到100 mL左右，濃度大學為每升100 mg，將其儲備液放置到-18 ℃內的棕色瓶體之中，其存放的時間大約會超過12個月，狀態相對來說會比較穩定。其次，在制備混合標準工作溶液的過程中，需要分析其實際的需求，以其需求為基準，制備相應濃度的混合標準工作溶液，在使用混合標準工作溶液之前進行制備即可。

2.4 制備試樣

在這些樣品取出500 g，并對其樣品進行較為充分的攪拌，之后在將其樣品全部放置到干凈的容器當中，密封其物質，同時要做好相應的標記工作，把其物品放置到環境為-18 ℃內，冷東西給的存放。另外，還需要稱取混勻試樣5 g，其稱取的重量需要精確到0.01 g。用HLB固相萃取柱進行處理，等其樣品溶液全部流出之后，要依照一定的順序進行水和甲醇+水形式的淋洗，同時還要摒棄所有的流出液。讓其壓強始終在2.0 kPa的數值范圍內，實時地開展減壓的處理工作，其減壓抽干的時間約為5 min，最后在使用甲醇+乙酸乙酯洗脫。甲醇+乙酸乙酯的溶液含量約為10 mL。

3 結果與討論

3.1 定性測定

待測樣品中化合物色譜峰的保留時間與標準溶液相比變化范圍應在±2.5%之內。

3.2 定量測定

根據樣液中被測四環素類獸藥殘留的含量情況，選定峰高相近的標準工作溶液。標準溶液的色譜圖參見圖1.

圖1 標準品重構離子色譜圖

4 結語

乳制品當中一旦殘留獸藥，就會導致人體受到損傷。乳制品獸藥殘留的問題已經引起了我國社會各級的關注，在2014年，我國和歐盟乳品檢測系統相同步，使用了較為高效快速的形式進行獸藥殘留的檢測。色譜法的定型以及定量的分析效果比較優異，其檢測方式的準確性也比較高。但是在檢測一些復雜性的樣品過程中，其所損耗的成本費用會比較高，快速檢測工作的開展也會受到不同程度的約束以及限制。毛細管電泳技術的成本也比較高，檢測范圍比較小，應當依據現場的實際檢測狀況，選用和其相適宜的檢測技術。