外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及組織ER表達情況及與子宮肌瘤的相關性研究

李輝，劉麗偉

(平頂山市第一人民醫院婦產一科，河南 平頂山 467000)

流行病學研究顯示，子宮肌瘤的發病率可達233~455/1萬人左右[1]。臨床上子宮肌瘤治療后的總體病情緩解率較低，治療后的復發率較高。在探討子宮肌瘤的發病機制的過程中發現，細胞生物學因子的改變可能在促進瘤體的增大、平滑肌細胞膜受體敏感性的改變等過程中發揮了重要的作用。其中胰島素樣生長因子 （insulin like growth factor，IGF）的高表達能夠通過誘導平滑肌細胞的增殖，抑制平滑肌細胞的凋亡等，進而促進瘤體的形成[2，3]；雌激素受體（estrogen receptor，ER）的激活，能夠通過誘導下游雌激素信號通路的上調，增加瘤體纖維成分的增生，促進包膜的形成[4，5]。部分研究在探討子宮肌瘤發病機制的過程中已經揭示了ER受體與子宮肌瘤的發病關系，認為高表達的ER受體是促進肌瘤發生的重要風險，但關于IGF的分析研究不足。為了進一步揭示IGF等因子與子宮肌瘤的發病關系，從而為臨床上子宮肌瘤的綜合性治療提供理論基礎，本次研究選取2016年2月-2017年8月在我院接受子宮部分切除術的患者為研究對象，探討了相關指標的表達，報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2016年2月-2017年8月在我院接受子宮部分切除術的150例患者為研究對象。納入標準：⑴年齡≥18周歲；⑵因子宮肌瘤或器官脫垂等因素行子宮部分切除者；⑶無其他盆腔病變者。排除標準：⑴合并其他系統嚴重疾病者；⑵合并惡性腫瘤疾病者。根據病理結果分為對照組和觀察組，其中對照組65例，年齡19～50歲，平均36.23±4.79歲；觀察組85例，年齡 20～48歲，平均36.25±4.38歲。兩組患者年齡分布等一般資料方面無明顯差別，具有可比性。本項研究經醫院倫理委員會評審通過，且所有患者均知情同意。

1.2 檢測方法 采集空腹靜脈血約5ml并分作兩份，一份自然抗凝后以3000r/min離心10min，取上清液采用酶聯免疫吸附法測定血清中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平，檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物有限公司，具體檢測步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

采用石蠟切片脫蠟至水，采用離子水進行反復洗滌，加入牛奶液體封閉抗體，封閉時間為5min，加入ER蛋白抗體（鼠來源，ABCUM公司），37℃孵育2h，采用磷酸鹽緩沖液洗滌3次，滴加熒光染色標記的二抗抗體 （購自abcum公司），37℃孵育30min，加入磷酸鹽緩沖液進行洗滌，采用南京凱基生物制劑公司生產的顯色劑進行顯色，封片，鏡下觀察。

1.3 評價指標 觀察兩組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達。比較不同特征子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達的差異，分析影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達的因素。

1.4 統計學處理 數據錄入后，采用SPSS 11.5軟件進行分析。計數和計量資料分別采用例和均數±標準差表示。外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平的比較采用t檢驗進行分析，ER表達情況的比較采用卡方檢驗進行處理，采用回歸分析法分析影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達的因素。P＜0.05：差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽性表達的比較 表1顯示，觀察組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽性表達率高于對照組。

表1 兩組患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽性表達的比較

2.2 不同特征子宮肌瘤患者IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽性表達的比較 表2顯示，未絕經、肌瘤數目≥2個、肌瘤直徑≥5cm的子宮肌瘤患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽性表達率較高，不同年齡、生育史、合并高血壓、糖尿病患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽性表達率無差別。

表2 不同特征子宮肌瘤患者IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和ER陽性表達的比較

2.3 影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平及ER表達的因素分析 回歸分析結果顯示，是否絕經、肌瘤數目是影響子宮肌瘤患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽性表達率的因素。見表3。

表3 -1影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ水平的因素分析

表3 -2影響子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅱ水平的因素分析

表3 -3影響子宮肌瘤患者ER表達的因素分析

3 討論

多種因素均可以影響平滑肌細胞增殖、新生血管的形成，促進平滑肌細胞敏感性的上升和子宮肌瘤的發病。在年齡大于35歲的育齡期女性人群中，子宮肌瘤的發病風險更高[6]。手術治療或者保守性的治療措施如高頻消融等技術的應用，已經在子宮肌瘤的常規治療領域取得了較為理想的治療效果，但其治療后的復發率較高，反復子宮肌瘤手術導致的經濟、心理負擔及個體創傷等方面的問題仍然較為嚴重[7，8]。本研究通過對于子宮肌瘤發病過程中相關蛋白水平因子的表達分析探討，一方面可以為臨床上降低子宮肌瘤的復發問題提供理論參考，另外可以為臨床上子宮肌瘤患者的綜合性藥物治療或者疾病的預防等提供依據。

IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ是生長因子家族的重要成員，其對于血管內皮細胞、平滑肌細胞及間質細胞成分的促增殖作用，能夠提高子宮平滑肌細胞的持續性增殖及間質成分的纖維化，并為肌瘤病灶增大過程中的新生血管的形成、血流灌注的保障等提供前提。相關基礎方面的研究也顯示，IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ能夠通過對于平滑肌細胞DNA的誘導擴增作用，提高平滑肌細胞DNA上游轉錄啟動子及增強子的活性，促進平滑肌細胞紡錘體分離、提高細胞分裂的速度[9，10]；ER主要表達于卵巢上皮、子宮內膜上皮及子宮平滑肌細胞膜表面，在與配體結合的過程中，可通過下游ER/AKT信號通路或者MAPK信號通路的激活，提高平滑肌細胞持續性增殖形成瘤體的風險[11]。部分研究已經揭示了ER的表達在影響到子宮肌瘤的形成、復發等方面中的價值[12]，但對于IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的探討較少。

本研究通過血清學指標的檢測及免疫組化分析研究方法發現，在子宮肌瘤患者的血清中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表達濃度明顯上升，同時在肌瘤病灶組織中ER蛋白的表達水平也明顯上升，高于正常子宮平滑肌組織，差異具有統計學意義，表明IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ或者ER的異常表達可能均影響到了子宮肌瘤的病情進展或者發生過程[13]：⑴IGF-Ⅰ、IGF-II的高表達對于子宮肌瘤的增殖影響，能夠通過增加平滑肌細胞膜表面糖蛋白受體的敏感性，促進平滑肌細胞增生修復過程的激活和平滑肌細胞間質成分中Ⅳ型膠原纖維的增生；ER蛋白的陽性表達程度的提高，可以影響肌瘤組織變性、體積的改變過程，并能夠協同刺激新生毛細管內皮細胞的移行，促進新生血管的形成，增加肌瘤病灶組織的血流灌注。王波等[14]研究者在探討了73例樣本量的子宮肌瘤患者，發現IGF-Ⅰ、IGF-II表達水平可平均上升25%以上，同時患者的肌瘤病灶范圍越大、病程越長、治療后的肌瘤復發率越高，IGF-Ⅰ、IGF-II濃度越高。在探討相關指標與子宮肌瘤患者臨床病理特征的關系過程中發現，在未絕經、肌瘤數量較多、體積較大的患者中，外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平、組織ER陽性率均較高，這提示了相關指標與肌瘤患者的病情進展密切相關，而其中的機制則主要考慮與外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平對于肌瘤周邊平滑肌細胞的細胞周期的調控影響有關，同時未絕經患者體內殘存的性激素活性較高，ER受體的活躍程度或者陽性表達率也可顯著上升[15]。但本次研究并未發現合并有基礎性疾病如糖尿病或者高血壓對于子宮肌瘤患者體內相關指標的影響，提示基礎性疾病并不能影響到體內生物學因子的活性。最后，本研究發現是否絕經、肌瘤數目是影響子宮肌瘤患者的外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ等的重要因素，進一步提示了IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ等與子宮肌瘤患者的病情關系。

綜上所述，子宮肌瘤患者外周血IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ水平和組織中ER陽性表達率較高，且與患者是否絕經和子宮肌瘤的大小、數目具有一定的相關性。