九江地區835例遺傳咨詢患者外周染色體核型分析

柯買春

(九江市婦幼保健院，江西 九江332000)

閉經、習慣性流產、不孕癥、停育、生育畸形兒或智力低下兒等異常史是育齡男女常見的病理現象，這些病理現象可造成育齡男女的生育障礙[1-3]。它可由多種原因造成：環境因素、遺傳因素、免疫生殖因素和內分泌異常等等。染色體是人類細胞遺傳學研究的主要對象，所以對有閉經、習慣性流產、不孕癥、停育及生育畸形兒或智力低下兒等異常史的育齡男女進行染色體檢查十分必要。本文對2016年3月-2017年2月就診于九江市婦幼保健院門診婦產生殖科的835例遺傳咨詢患者進行染色體分析，探尋染色體異常與生育障礙的關系，為臨床診斷、遺傳咨詢和生育指導提供參考性依據，并將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年3月-2017年2月來自我院九江市婦幼保健院門診婦產生殖科835例遺傳咨詢就診患者，其中男401例，年齡21~47歲；女434例，年齡16~41歲。就診原因包括閉經、習慣性流產、不孕癥、死胎停育、生育畸形兒或智力低下兒史及婚檢等。

1.2 方法 對受檢者抽取肝素抗凝外周血2~3ml接種于含25%小牛血清的1640養基中恒溫無菌培養72h，收獲前2~4h秋水仙素處理，再用0.4%kcl低滲液孵育細胞30min，使細胞分散開來。然后用甲醇：冰醋酸（3：1）混合液固定細胞，冰凍懸液滴片，80℃烤片3h，常規Try-Giemsa制備G帶，在顯微鏡高倍鏡鏡下計數30個分裂相，并對其中3個核型進行分析，對嵌合體要加大計數到100個，100個核型中有2個或以上多一條染色體以及3個或以上少一條染色體就應該報為嵌合體。結果按人類細胞遺傳學國際命名體制（ISCN.1995）的標準命名。

2 結果

2.1 遺傳咨詢患者異常核型檢測結果分析 835例遺傳咨詢患者，其中異常核型99例，占比11.9%，包括男性48例，女性51例，其中常染色體異常核型23例、性染色體異常核型11例、多態性65例。

2.2 常染色體異常核型患者的具體情況分析 23例常染色體異常核型包括倒位11例、易位8例、21號染色體的衍生體4例，結果見表1。

2.3 性染色體異常核型患者的具體情況分析 11例性染色體異常核型包括特納綜合征4例、克氏綜合征4例、超Y2例、Y染色體的臂間倒位1例，結果見表2。

2.4 多態性異常核型患者的情況分析 見表3。

3 討論

常染色體異常與生育障礙 本文結果顯示染色體異常是導致患者習慣性流產、不孕癥、停胎停育及生育異常兒的重要原因。本文835例遺傳咨詢患者中異常者99例，常染色體異常者23例，占2.7%，其中5例平衡易位、3例羅伯遜易位、11例倒位以及4例衍生體，臨床表現均為不同程度的死胎、流產、不孕及無精少精癥。

表1 常染色體異常核型患者的具體情況分析

表2 性染色體異常核型患者的具體情況分析

表3 多態性類型及臨床表現[n（%）]

平衡易位 平衡易位在染色體結構異常中較為常見，因其沒有遺傳物質的丟失，表型一般正常，在減數分裂過程中，易位染色體將形成易位型的四射體，可形成18種子，其中1/18可生育正常兒，1/18可生育表型正常的攜帶者，其余16/18都因部分三體或單體而導致流產或死胎[4]，本文5例平衡易位均有習慣性流產或不孕史。

羅伯遜易位 羅伯遜易位是近端著絲粒染色體間的整臂易位，包括同源羅伯遜易位和非同源羅伯遜易位，因丟失的小染色體幾乎全是異染色質，遺傳物質幾乎沒有丟失，所以表型一般正常。同源羅伯遜易位不能產生正常配子，不能生育正常兒，而非同源羅伯遜易位在產生的配子1/4是正常的，1/4的可能是攜帶者，其余1/2是單體或三體，會造成胎兒流產或死胎[5]。

倒位 染色體倒位由于只是染色體基因順序的重新組合，遺傳物質沒有丟失，故表型正常。但在減數分裂過程中同源染色體之間進行交換，可形成4種配子，1種正常、1種為倒位攜帶者、另外2種為部分重復和丟失的重組型，將導致死胎、流產或畸形兒出生[6]。

性染色體異常與生育障礙 性染色體異常主要表現為X和Y染色體的異常，特納綜合征和克氏綜合征為兩種主要類型。本文835例受檢者中查出特納綜合癥患者4例（患者主要表現為不孕、閉經和流產）、克氏綜合征4例、2例超Y嵌合體患者 （主要臨床表現為不孕）和1例Y染色體倒位（患者多次停胎）。目前認為，正常情況下，卵母細胞有2條完整的X染色體，如果X染色體缺少一條或部分缺失或細胞系中比例減少都將影響性腺功能發育，導致青春前期卵巢的發育缺陷和卵巢激素缺乏，青春期時，卵巢功能容易衰竭，產生的卵泡數將變少或缺失，第二性征也不明顯[7，8]。X染色體異常為單體或部分單體或嵌合體，都沒有2條完整的X染色體，影響性腺的發育，所以臨床表現為不孕、流產和閉經等；而Y染色體上的基因參與生殖功能的調節，據報道14%的無精子癥患者和5%少弱精子癥患者都有染色體的異常[9，10]。所以性染色體異常是生殖異常的重要因素。

染色體多態性 染色體多態性是含有高度重復DNA的異染色質，主要存在于D、G組染色體隨體，1號、9號、16號染色體的次縊痕和Y染色體中。過去曾認為，染色體多態性沒有臨床意義，但近年不斷有報道染色體多態性會導致患者流產、不孕、死胎和無精子癥等[11，12]。本文835例受檢者中有65例為染色體多態性，常染色體多態性56例，主要導致患者流產、死胎、停胎和不孕等；Y染色體多態性9例，主要引起患者無精少精和不孕。常染色體多態性可能由于異染色質中高度重復的DNA在減數分裂過程出現重組異常進而影響基因調節和細胞分化從而使胚胎發育障礙而致死胎、流產等，而Y染色體多態性主要表現為大Y、小Y。有學者認為大Y染色體過多重復的染色質可影響精子生成與發育相關基因的正常發揮，妨礙精子生成[13]。而小Y染色體可造成高度重復的DNA或AZF區基因的缺失，從而導致性腺發育或精子形成的異常。

本研究顯示，染色體異常可以導致育齡男女不孕、閉經、停胎停育、流產以及生出畸形兒等異常現象，也證實了細胞染色體檢查的重要性。希望本文的研究結果能為產前診斷，臨床咨詢及生殖工作提供參考性意見。