蒸發光散射檢測器和示差檢測器應用于食品中三氯蔗糖測定的比較

梁漢旺

深圳市計量質量檢測研究院 廣東 深圳 518000

三氯蔗糖無臭無吸濕性，甜度是蔗糖的500到700倍，化學名為蔗糖衍生物，經過蔗糖乳化而成，也稱為三氯半乳化蔗糖。在進行強力甜味劑的研究過程中，人們普遍認為三氯蔗糖的甜度較高，甜味純正，容易容易化于甲醇溶液、水、乙醇中。根據歐美發達國家關于三氯蔗糖的安全性的批準原則，被稱為最優秀的功能性甜味劑之一。三氯蔗糖的使用范圍和限量經過食品添加劑的使用衛生標準的鑒定，在我國已經得到了批準，確認三氯蔗糖使用安全。我國相關的國家標準采用的是蒸發光檢測器法、高效液相色譜法，對于三氯蔗糖均能得到很好的分析結果。目前多采用高效液相色譜法離子色譜法等眾多方法在研究和檢測方面均發揮出有效作用。檢測人員日常的檢測過程中，一般根據實際情況進行檢測方法的選擇。

1 試驗

1.1 材料與方法 在實驗中采用了高效液相色譜儀高效液示差檢測器的三氯蔗糖的純度為99%。HLB固相萃取柱為六毫升，其他添加劑包括亞鐵氫化鉀、中性氧化鋁等，運用實驗用水為超純水。

1.2 實驗方法 溶液的配制，放置至室溫以酸性溶液，在250毫升燒杯中稱取乙酸鋅，21.91克，加水約50 ml，加入5 ml的水，溶解后稀釋到刻度搖勻，在進行溶解的過程中，使用水稀釋達到刻度，精確成三氯蔗糖0.1011g，放置在50毫升燒杯中亞鐵氰化鉀溶液加水，使得超聲溶解到室溫，轉移到100 ml容器中，稱取亞鐵氫化鉀10.62g。

樣品的制備，加入亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液，使用果凍樣品用80℃水，提取5克與50 ml離心管中抽干之后進行純化搖勻，用水定量至5 ml，下層水浴中80℃，氮氣吹到5 ml以下，在零下10℃下，離心旋轉五分鐘，1萬轉每分鐘轉移上清液，到另1A5式ml離心管中，6 ml甲醇洗脫用氮氣吹干，加入1 ml 10%已經溶解殘渣，用濾網過濾后進行樣品溶液的提取，加入甲醇15 ml進行超聲，10分鐘水平震蕩，10分鐘轉移上清液，在漩渦中轉移上清液，放置室溫，此方法重復3遍[1]。

儀器條件，在高效液相測普世差檢測器中進行進樣量的等度洗脫。資生堂色譜柱，規格為150 mm×4.6 mm，5 UM，在高效液相色譜蒸發光檢測器中，進行霧化器溫度的設定為30℃，液相色譜梯度洗脫程序為零，到8分鐘達到10%到30%，到12分鐘，達到30%到60%，12到16分鐘達到60%到95%，20分鐘以上為95%B，增益1.N2流量1.0L每分鐘。

2 結果與分析

2.1 經過樣品前處理條件較為優化，提取后將提取液半固體食品液體等添加三氯蔗糖食品固體增加不同步驟樣品的機制差別較大，此時根據食品的機制不同，直接采用固相萃取小柱進行凈化，還有脂肪和蛋白的樣品，例如糖果烘烤，食品方便米面等等。在樣品的機制差別較大的時候，需要去除蛋白和脂肪，在進行固相萃取小柱凈化，再進行溶劑的選擇時，機制的差別較大，因此容積的提取效率基本一致，不同比例的甲醇，經過考察發現水、甲醇、乙醇通過實驗，在提取效率上均可達到90%以上。

2.2 由于水有良好的浸潤效果，用于多類食物在進行三氯蔗糖的提取時，加入5 ml水進行充分浸潤，然后加入甲醇，不僅可以初步去除蛋白質，而且可以充分提取果凍樣樣品。3.21致，儀器條件優化，檢出限水平為10 mg每公斤，由于蒸發光檢測器需要進行蒸發和物化，因此在進行蒸發和物化的關鍵步驟上，要進行重復性的視察檢測器的檢測。而蒸發光檢測器首先要將洗脫液霧化形成氣溶膠，在加熱的過程中進行光散射，側池中的檢測對于不發揮發性溶質顆粒要進行通用性檢測，在蒸發光檢測器進行檢測，液體折光指數差值，檢測器是用于視差檢測器的，檢出限水平為1 mg每公斤，當蒸發溫度為80℃時，解除限水平為2 mg每公斤，能夠滿足檢測要求。

2.3 除去蛋白的方法的選擇在比較了亞鐵氫化鉀溶液0.5125 ml各自不同的檢測效果之后，發現從沉淀劑加入2 ml以上時，四種不同體積的平均回收率可以達到91%，92%，84%、81%。加入1 ml蛋白沉淀實驗進行考察，以調味乳為例，添加量為50 mg，綜合考慮0.5 ml的沉淀試劑進行沉淀之后，沉淀層更加緊實，離心后傾到比較松散，后續操作方便。如下表。

三氯蔗糖線性方程、相關系數、檢出限和定量限

除去脂肪的方法，對于三氯蔗糖進行去脂，在固相萃取液的流速的控制上需要較慢，對脂肪提取，比較正乙烷和石油醚時，采用正乙烷對脂肪去除更加徹底。凈化條件優化后洗脫液的選擇是非常關鍵的，這對于固相萃取技術來說，直接影響到目標物的回收率，而洗脫液的選擇使目標物能夠從固相萃取液中洗脫，使目標物吸附在固相萃取柱上[2]。淋洗液的遠需選擇原則，則是要將雜質去除，分別使用10%甲甲醇進行淋洗，使用5 ml水和5 ml10%甲醇依次進行靈犀。此時按照儀器條件進行測定，結果沒有得到目標物的情況下，發現淋洗液中有少量的目標物，因此淋洗液也因為5 ml10%甲醇和5 ml水選用甲醇進行洗脫，目標物的洗脫率接近100%，洗脫一的選擇非常關鍵，例如甲醇為5 ml時，將洗脫液的體積設為5 ml，就可滿足實驗的需求。

結語

根據實驗表明，樣品機制較為復雜時，一般采用蒸發光檢測器進行檢驗，樣品含量較低，從回收率的結果來看，選用機制標準曲線進行比對，發現采用蒸發光散射檢測器用于視差檢測，對于三氯蔗糖含量較高的樣品更為適合。