牛冷凍精液人工授精技術(shù)操作規(guī)程

肖 華 尹曉玲 瞿 軼

（建始縣長梁鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心，湖北建始 445302）

1 前言

牛冷凍精液人工授精技術(shù)，能最大限度發(fā)揮公畜種用價(jià)值，避免多種疾病的傳播感染，是當(dāng)前最為高效的家畜繁殖技術(shù)。這些年，本地組織多次人工授精雜交改良工作，文下總結(jié)經(jīng)驗(yàn)就操作規(guī)程做詳細(xì)闡述，技術(shù)性要點(diǎn)以供參考和借鑒。

2 牛冷凍精液人工授精技術(shù)操作規(guī)程

2.1 準(zhǔn)確鑒定母牛發(fā)情

提升輸精成活率，正確鑒定母牛發(fā)情，合適時(shí)機(jī)選擇配種很關(guān)鍵。

根據(jù)以往生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，不同胎次、年齡、品種的母牛，在發(fā)情、外排卵等情況有著顯著的差異。此外，考慮到母牛發(fā)情時(shí)間短，想要做到適時(shí)輸精，單靠外部觀察是不夠的，還需要配合直腸觸摸卵巢、卵泡的發(fā)育情況而定，以把控好準(zhǔn)確的輸精時(shí)間。通常情況下，在發(fā)情后期—排卵期這段時(shí)間，安排授精受胎率最高。當(dāng)前，母牛發(fā)情的鑒定，需結(jié)合外部觀察法、直腸檢查法而定。

2.1.1 外部觀察法

母牛發(fā)情初期，食欲不振，興奮不安。檢查外陰部，內(nèi)粘膜微紅，輕微腫脹，有稀薄液體外流，有母牛或公牛緊隨其后。母牛發(fā)情中期，異常興奮，高潮后大叫。檢查外陰部，內(nèi)粘膜潮紅，粘液呈牽絲狀。該期母牛，接受母牛騎跨。母牛發(fā)情后期，靜立不動(dòng)。檢查外陰部，內(nèi)粘膜有褶皺，呈粉紅，流透明狀液體，更多粘附在母牛臀部，此時(shí)為輸精的最佳時(shí)機(jī)。

2.1.2 直腸檢查法

手伸進(jìn)直腸觸摸卵巢，通過發(fā)育掌握發(fā)情情況。

初期，卵巢小而堅(jiān)硬，突出表面，沒有彈性。

中期，卵泡增大，體液增多，光滑而有彈性。

后期，體積不再增大，卵泡開始變軟，像成熟的葡萄，有波動(dòng)感，一觸即破。

此時(shí)為輸精最佳時(shí)機(jī)，首次輸精后，間隔1天，在重復(fù)輸精1次，每個(gè)輸精期可輸精2次。

2.2 輸精前準(zhǔn)備工作

2.2.1 消毒工作

操作室內(nèi)注意衛(wèi)生，佩戴工作服，勤剪指甲，減少地面粉塵。防蚊蟲、老鼠入室，器械用紫外線燈消毒，場(chǎng)內(nèi)用新潔爾滅溶液灑施，避免塵土飛揚(yáng)。

2.2.2 準(zhǔn)備母牛

保定母牛，用衛(wèi)生紙擦拭母牛臀部，而后用新潔爾滅溶液擦拭，做好消毒工作。

2.2.3 準(zhǔn)備輸精槍

消毒輸精槍，整齊擺放在消毒盤，用砂紙蓋好，避免受二次污染。

輸精時(shí)，每頭準(zhǔn)備一支或用一次性槍套。

2.3 做好牛凍精解凍工作

2.3.1 顆粒凍精解凍

水浴鍋（保溫杯）內(nèi)的水溫調(diào)至42℃，將有解凍液的安瓿放入42℃熱水中預(yù)熱30 s，將安瓿拿出，用消毒好的紗布抹去安瓿周圍的水分，再用金屬鑷子將端開口，口徑的大小以能放入一顆凍精為好，然后把安瓿的2/3放在溫水中，并輕微的搖動(dòng)，使安安瓿中的凍精溫度均勻，使之全部融化，拿出水面，然后在25℃左右的恒溫的顯微鏡下檢查精子的活力，取1小滴精液在載玻片上再壓上蓋玻片，在顯微鏡上檢查精子活力，解凍后的活力必須在0.3以上才能進(jìn)行輸精。

2.3.2 細(xì)管凍精解凍

調(diào)溫水浴鍋至42℃，取細(xì)管凍精放水浴鍋內(nèi)，輕微搖晃待溶解后取出，用干凈紗布擦拭細(xì)管表面水珠。而后剪掉封口端，將精液及時(shí)注入到輸精槍內(nèi)。恒溫狀態(tài)下，取一滴精液加蓋載玻片，檢查精子活力，活力在0.3以上方可使用。

2.4 選擇合理的輸精技術(shù)

從輸精技術(shù)方法來看，主要有：陰道開張器輸精法、直腸把握輸精法兩種方法，具體的操作規(guī)程參照如下：

2.4.1 陰道開張器輸精法

取開膣器經(jīng)潤滑消毒后，緩慢放進(jìn)陰道內(nèi)將其打開。而后，借助手電燈光尋找子宮外口。取吸有精液的輸精管，將尖端緩慢插入子宮頸內(nèi)1～2cm，而后緩慢徐徐的將精液注射到子宮頸內(nèi)，待注入后緩慢取出。接著，緩慢取出開膣器。取開膣器期間，注意不要閉合太嚴(yán)，以避免損傷陰道內(nèi)粘膜。該輸精技術(shù)，由于使用開膣器加輸精管，操作起來較繁瑣，很容易造成母牛不安，損傷內(nèi)粘膜。為此，輸精期間，部位要淺些。但是，期間以造成精液倒流，受精率不高，較初學(xué)者使用多，現(xiàn)實(shí)應(yīng)用不多。

2.4.2 直腸把握輸精法

母牛輸精前，配種員將左手五指合攏并捏成圓錐形，緩慢地伸入直腸，掏出宿糞后，隔著直腸壁探摸子宮頸位置，并把子宮頸外端半握在左手掌的位置，讓子宮頸緊貼在骨盆腔上，然后左手配合右手將裝有精液的輸精槍以35°～45°傾斜向上從陰門插入陰道，向上斜插入5～12 cm，輸精管再向前水平插入直抵子宮頸外口，呈螺旋形活動(dòng)向前插入子宮頸內(nèi)，當(dāng)輸精槍感覺穿過2～3個(gè)子宮頸內(nèi)橫行皺褶時(shí)，即可開始緩慢輸精。

2.5 人工輸精應(yīng)該注意的幾個(gè)問題

使用的所有器械，都要經(jīng)過嚴(yán)格消毒。同時(shí)，注意外陰部的消毒，避免人為傳染生殖性疾病。輸精期間，操作要細(xì)心、要膽大。此外，輸精牛群多時(shí)，現(xiàn)有的輸精器不夠用，切忌不能重復(fù)使用，務(wù)必徹底消毒后方可再用。

規(guī)范輸精流程，掌握準(zhǔn)確的輸精方法。期間，注意冷凍精液質(zhì)量要達(dá)標(biāo)，解凍后的精子及時(shí)配種。輸精部位準(zhǔn)確，確保進(jìn)入子宮頸內(nèi)，避免滯留外口而影響受胎率。每次輸精做好記錄，便于后期加強(qiáng)管理。

第三，做好配種檢查，留意特殊情況。比如：個(gè)別妊娠前期假發(fā)情，做好直腸檢查，避免誤配而增加流產(chǎn)率。個(gè)別屢配不中，應(yīng)認(rèn)真檢查，分析誘因，對(duì)癥治療，確保康復(fù)率。