CYP2D6基因多態(tài)性與老年抑郁癥及其療效的關(guān)聯(lián)研究

近年來(lái)，老年抑郁癥的發(fā)病率逐年增加，臨床主要表現(xiàn)為心境顯著而持久地低落、思維和行為異常等。該病發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，包括遺傳因素、環(huán)境因素、心理因素、社會(huì)因素等，其中遺傳因素為重要因素。例如，相關(guān)研究顯示ABCB1基因多態(tài)性以及P-gp表達(dá)水平的不同可能與重性抑郁障礙具有相關(guān)性[1]；MTHFR TT型可能是抑郁癥發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素[2]。研究表明CYP2D6基因多態(tài)性可能影響利培酮與氟西汀聯(lián)合治療難治性抑郁癥，但目前關(guān)于CYP2D6基因多態(tài)性與老年抑郁癥之間的相關(guān)性研究較少，因此，本研究針對(duì)該問(wèn)題展開討論。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取2018年1月～2019年3月在南京醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院治療的老年抑郁癥患者100例作為研究組，入組標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合國(guó)際疾病分類第10版(ICD-10)中抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)漢密爾頓抑郁量表(HAMD)評(píng)分≥17分；(3)入組前至少14 d內(nèi)未服用相關(guān)藥物、未使用電抽搐或經(jīng)顱磁刺激治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)腦器質(zhì)性及軀體疾病所引起的繼發(fā)性抑郁狀態(tài)；(2)頭部外傷史、躁狂發(fā)作史或其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病；(3)嚴(yán)重的心臟、肝腎功能疾病；(4)有精神活性物質(zhì)或其他物質(zhì)成癮性物質(zhì)濫用者。其中女60例，男40例，年齡≥60歲，平均年齡(68.79±6.35)歲。同時(shí)選取同院體檢健康者100例作為對(duì)照組，其中女59例，男41例，年齡≥60歲，平均年齡(68.13±6.12)歲。兩組患者一般臨床資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集和儲(chǔ)存 對(duì)所有入組對(duì)象采集清晨空腹靜脈血3 ml，置于EDTA抗凝管中搖勻，然后在4 ℃3000 rpm離心15 min，棄去上層血漿，按照QIAampDAN Blood Mini Kit(QIAGEN)試劑盒說(shuō)明書步驟提取DNA，采用0.7%瓊脂糖凝膠對(duì)5 μl提取產(chǎn)物進(jìn)行電泳鑒定，在紫外燈下觀察電泳結(jié)果，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后方可使用，將樣本置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 基因型檢測(cè) 采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法對(duì)CYP2D6基因進(jìn)行擴(kuò)增，在反應(yīng)體系中加入模板DNA1.5 μl、PCR緩沖液42.1 μl、Taq酶0.4 μl、MgCl23 μl、dNTPs 1 μl、擴(kuò)增產(chǎn)物414 bp，使總體積為50 μl。反應(yīng)體系循環(huán)：95 ℃ 4 min，95 ℃ 20 s、59 ℃ 30 s、72 ℃ 45 s，共循環(huán)3次，72 ℃ 7 min。取PCR反應(yīng)產(chǎn)物10 μl，加入HphI內(nèi)切酶2.5 U，37 ℃靜置12 h。采用1.5%瓊脂糖凝膠120V對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物電泳30 min，使用溴乙錠進(jìn)行染色，根據(jù)電泳結(jié)果確定基因分型。

1.2.3 治療方法 對(duì)研究組使用帕羅西汀治療，每天1次，每次20 mg，治療6周，根據(jù)治療后第6周末HAMD減分率將患者分為有效組和無(wú)效組，其中有效組HAMD減分率≥50%，無(wú)效組HAMD減分率<50%[3]。根據(jù)治療后是否發(fā)生不良反應(yīng)，將患者分為無(wú)不良反應(yīng)組和有不良反應(yīng)組，比較不同組別患者CYP2D6基因型及等位基因的分布。

2 結(jié)果

2.2 兩組CYP2D6基因型和等位基因頻率分布比較 兩組CYP2D6 2850C>T、100C>T、1758G>A基因型及等位基因頻率分別經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。采用Logistic回歸分析基因型和等位基因頻率與抑郁癥的相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)，校正P值和校正OR值均大于0.05。見(jiàn)表1。

2.3 研究組HAMD評(píng)分與基因型的關(guān)系 研究組不同基因型患者的HAMD總分及各因子分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表1 兩組患者CYP2D6基因型及等位 基因頻率比較[n(%)]

表2 研究組HAMD評(píng)分與CYP2D6基因型的關(guān)系

2.4 不同療效患者CYP2D6基因型及等位基因頻率比較 經(jīng)過(guò)治療后，治療有效患者70例，治療無(wú)效患者30例。CYP2D6 2850C>T分組、100C>T分組、1758G>A分組中，有效組和無(wú)效組等位基因頻率比較，差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。采用Logistic回歸分析基因型和等位基因頻率與療效的相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)，校正P值均小于0.05，OR值均大于1。見(jiàn)表3。

表3 不同療效組患者CYP2D6基因型及等位基因頻率比較[n(%)]

2.5 不同不良反應(yīng)患者CYP2D6基因型及等位基因頻率比較 經(jīng)過(guò)治療，發(fā)生不良反應(yīng)患者57例，未發(fā)生不良反應(yīng)患者43例。CYP2D6 2850C>T分組、100C>T分組、1758G>A分組中，有不良反應(yīng)組和無(wú)不良反應(yīng)組等位基因頻率比較，差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。采用Logistic回歸分析基因型和等位基因頻率與不良反應(yīng)的相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)，校正P值均小于0.05，OR值均大于1。見(jiàn)表4。

3 討論

據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)數(shù)據(jù)報(bào)告顯示，老年抑郁癥的發(fā)病率為3%～10%，老年人群由于受到各方面因素的影響，抑郁癥的發(fā)病率明顯高于其他年齡段人群[4,5]。老年抑郁癥的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，如遺傳因素、腦萎縮、軀體生理變化、單胺類遞質(zhì)分泌水平變化、下丘腦-垂體-腎上腺軸以及下丘腦-垂體-甲狀腺軸等神經(jīng)通路的損傷等。其中遺傳因素占主要作用。研究發(fā)現(xiàn)[6]，腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及G196A基因多態(tài)性與老年抑郁癥的發(fā)生具有相關(guān)性，老年抑郁癥患者攜帶ApoEζ4等位基因更易發(fā)生較為嚴(yán)重的認(rèn)知損害[6]，可能與抗抑郁藥物對(duì)其認(rèn)知癥狀的療效欠佳有關(guān)[7]。

表4 不同不良反應(yīng)組患者CYP2D6基因型及 等位基因頻率比較[n(%)]

CYP450為人體內(nèi)廣泛存在的代謝酶，其參與多種外源性藥物的生物轉(zhuǎn)化，可參與介導(dǎo)抗抑郁藥物的Ⅰ相代謝過(guò)程。若患者CYP酶活性高，則藥物清除率較快，血藥濃度可能偏低，藥物治療效果欠佳；若CYP酶活性較低，則藥物清除率較慢，藥物易在體內(nèi)蓄積，從而導(dǎo)致藥物不良反應(yīng)發(fā)生率升高。CYP450酶中CYP2D6占重要地位，盡管其在肝臟代謝酶中僅占1%～2%，但經(jīng)CYP2D6酶代謝的藥物可達(dá)25%以上。CYP2D6基因具有顯著的基因多態(tài)性，不同個(gè)體間該酶的活性相差較大，可達(dá)1 000倍[8]。但目前關(guān)于CYP2D6基因多態(tài)性與老年抑郁癥的發(fā)生是否具有相關(guān)性以及帕羅西汀治療老年抑郁癥的療效和不良反應(yīng)的研究較少，因此本研究針對(duì)該問(wèn)題進(jìn)行分析。

本研究結(jié)果顯示，研究組與對(duì)照組CYP2D6 2850C>T、100C>T、1758G>A基因型及等位基因頻率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HAMD總分及各因子分與基因型之間無(wú)相關(guān)性(P>0.05)；Logistic回歸分析顯示，基因型和等位基因頻率與抑郁癥的相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)，校正P值和校正OR值均大于0.05。結(jié)果表明，CYP2D6基因多態(tài)性與老年抑郁癥的發(fā)生無(wú)相關(guān)性。相關(guān)研究表明[9]，CYP2D6 C188T基因多態(tài)性與難治性抑郁癥無(wú)顯著相關(guān)性，與本研究結(jié)果一致，但該研究只針對(duì)CYP2D6其中一個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行研究，未對(duì)另外兩個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行研究，而本研究對(duì)CYP2D6三個(gè)位點(diǎn)均進(jìn)行研究，研究較為充分，可信度更高。

研究顯示[10,11]，CYP2D6快代謝型和慢代謝型患者的代謝水平存在差異，例如慢代謝型患者使用文拉法辛治療后更易出現(xiàn)相關(guān)不良反應(yīng)，如反胃、惡心、嘔吐等；使用氟西汀后原形藥物及其活性代謝物濃度過(guò)高而引起嚴(yán)重不良事件；CYP2D6 C188T基因多態(tài)性與利培酮聯(lián)合氟西汀治療難治性抑郁癥的療效及不良反應(yīng)具有相關(guān)性[9]。但目前帕羅西汀治療老年性抑郁癥的療效及不良反應(yīng)與CYP2D6基因多態(tài)性是否具有相關(guān)性的研究較少。本研究結(jié)果顯示，CYP2D6 2850C>T、100C>T、1758G>A分組中，有效組和無(wú)效組等位基因頻率比較差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，有不良反應(yīng)組和無(wú)不良反應(yīng)組等位基因頻率比較差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明2850C>T、100C>T、1758G>A等位基因與療效及不良反應(yīng)相關(guān)。采用Logistic回歸分析基因型和等位基因頻率與療效的相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)，校正P值和校正OR值均小于0.05。采用Logistic回歸分析基因型和等位基因頻率與不良反應(yīng)的相對(duì)危險(xiǎn)度(OR)，校正P值和校正OR值均小于0.05。結(jié)果表明，CYP2D6 2850C>T、100C>T、1758G>A中不同等位基因攜帶者可影響臨床治療療效以及藥物不良反應(yīng)。分析其原因可能是[9]100C>T堿基突變導(dǎo)致34 Pro(脯氨酸)置換為Ser(絲氨酸)，從而導(dǎo)致酶活性不穩(wěn)定，代謝能力降低，從而影響療效及不良反應(yīng)；1758G>A G堿基突變亦可導(dǎo)致酶活性發(fā)生變化，從而導(dǎo)致不良反應(yīng)增加。因此, CYP2D6酶的基因多態(tài)性是引起帕羅西汀個(gè)體差異的重要因素，使用藥物前，首先檢測(cè)患者CYP2D6酶的基因多態(tài)性，將代謝酶的多態(tài)性與用藥選擇相結(jié)合，根據(jù)患者CYP2D6酶的基因型選擇藥物，有利于預(yù)測(cè)藥物作用的強(qiáng)度以及不良反應(yīng)發(fā)生的概率，從而有利于調(diào)整用藥劑量，達(dá)到個(gè)體化用藥，進(jìn)而提高臨床用藥的安全性和可靠性。例如，韋龍靜等[12]研究發(fā)現(xiàn)，CYP2D6*10(rs1065852)不同基因型患者文拉法辛的代謝率存在差異，因而在對(duì)該類患者使用文拉法辛治療時(shí)，建議藥物加量時(shí)應(yīng)更加緩慢謹(jǐn)慎。

另外，研究顯示[13～15]，抗抑郁藥物可對(duì)CYP2D6酶產(chǎn)生抑制作用，如帕羅西汀、氟西汀、氟伏沙明等，均可抑制CYP2D6酶，由于對(duì)抑郁癥患者進(jìn)行治療時(shí)通常會(huì)聯(lián)合使用抗抑郁藥物，更易誘發(fā)藥物相互作用，從而影響療效和安全性。因此，在對(duì)老年抑郁癥患者進(jìn)行治療時(shí)，建議檢測(cè)CYP2D6酶多態(tài)性及表觀基因型，從而更有利于選擇藥物和調(diào)整藥物劑量。

綜上所述，CYP2D6基因多態(tài)性與老年抑郁癥的發(fā)生不相關(guān)，但與老年抑郁癥的療效及不良反應(yīng)具有相關(guān)性。將CYP2D6基因多態(tài)性與用藥選擇相結(jié)合，更有利于預(yù)測(cè)藥物作用的強(qiáng)度以及不良反應(yīng)發(fā)生的概率，從而達(dá)到個(gè)體化用藥。