骨髓增殖性腫瘤病人外周血中細胞因子水平的表達及其意義

徐海濤,姚福生

骨髓增殖性腫瘤(MPN) 中最常見的4種亞型分別是慢性粒細胞白血病(CML)、真性紅細胞增多癥(PV) 、原發性血小板增多癥(ET) 和原發性骨髓纖維化(PMF)。細胞因子是一類可溶性蛋白質，在許多生物過程中發揮重要的調節作用[1]。已有研究表明，一些異常細胞因子的產生以及部分細胞因子水平的失調，參與許多疾病包括腫瘤的發生和發展[2]。國外有一些研究發現部分細胞因子水平在MPN 病人中同樣出現失調[3-4]。但國內MPN病人細胞因子水平情況報道較少。本文擬對MPN病人外周血細胞因子水平進行檢測，并對其在MPN發病機制中的作用進行初步探討。

1 資料與方法

1.1一般資料收集2013年5月至2017年2月安慶市立醫院血液科收治的68例骨髓增殖性腫瘤(MPN)病人作為研究對象，其中男性37例，女性31例，年齡(51±6)歲，年齡范圍為14～79歲。按照世界衛生組織的診斷標準[5]，其中PMF組11 例，PV組22例，ET組16例，CML組19例；另選擇同期院內體檢健康職工20例為對照組，其中男性11例，女性9例，年齡(47±5)歲，年齡范圍為27～76歲。排除標準：(1)合并感染的病人；(2)免疫缺陷或免疫抑制的病人。本研究獲安慶市立醫院倫理委員會批準，病人或近親屬對研究方案均簽署知情同意書。

1.2標本采集收集病人和健康體檢者空腹靜脈血4 mL，檢測細胞因子白細胞介素(IL)-1β、IL-2R、IL-6、IL-8、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及IL-10等。

1.3細胞因子水平的檢測細胞因子IL-1β、IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α及IL-10均采用免疫熒光法進行檢測，試劑由美國luminex公司提供。由安慶市立醫院免疫實驗室于采血當日進行檢測。

2 結果

2.1外周血細胞因子水平的比較PMF組中，IL-2R、IL-6、IL-8及IL-10平均值較對照組明顯升高，差異有統計學意義(P=0.001、0.021、0.031、0.026)；PV組中，IL-2R及IL-8平均值較對照組明顯升高(P=0.012、0.046)，其余細胞因子差異無統計學意義(P>0.05)；ET組中，IL-2R及IL-8平均值較對照組明顯升高(P=0.026、0.017)，其余細胞因子差異無統計學意義(P>0.05)；CML組中，IL-2R、IL-6及IL-8平均值較對照組明顯升高(P=0.031、0.026、0.019)，其余細胞因子差異無統計學意義(P>0.05)。與ET和PV相比，PMF病人表現出更高的IL-2R、IL-6和IL-10濃度。與ET和PV相比，CML病人IL-6的濃度也更高。與CML相比，PMF病人表現出更高濃度的IL-2R，具體數據見表1。

2.2MPN各亞組間IL水平與臨床特征的關系檢測了MPN各亞組間年齡、性別、白細胞計數(WBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板計數(PLT)、乳酸脫氫酶(LDH)、脾大、紅細胞輸注次數、JAK2V617突變與不同IL水平之間的相關性，結果發現，MPN各亞組間年齡、性別、脾大、LDH與不同IL水平間均無相關性；PV組IL-2R與HGB呈正相關；ET組IL2-R與WBC、PLT均呈正相關；PMF組IL-2R與WBC、紅細胞輸注次數及JAK2V617突變均呈正相關。

3 討論

MPN是獲得性造血干細胞發生變化導致外周血細胞(包括紅細胞，白細胞或血小板)產生失調的血液病[6]。現已證實JAK2V617F基因突變是MPN發病的一個主要機制[7]。Janus激酶/信號轉導與轉錄激活子(JAK/STAT)信號通路的活化與MPN發生密切相關，而JAK/STAT信號通路是細胞因子信號通路的主要介導者[8]，因此，細胞因子與MPN同樣密切相關。但國內相關研究報道較少。雖然細胞因子水平有顯著的異質性，但本研究表明：MPN病人中，IL-2R及IL-8水平較對照組明顯升高。此外，不同MPN各亞組間細胞因子水平也明顯不同：與ET組和PV組相比，PMF組病人表現出更高的IL-2R、IL-6和IL-10濃度，CML病人IL-6的濃度也更高。IL-2R與MPN各亞組的臨床特征相關：PV組IL-2R與HGB呈正相關，ET組IL-2R與WBC、PLT均呈正相關，PMF組IL-2R與WBC、紅細胞輸注次數及JAK2V617突變均呈正相關。

表1 初診MPN病人與對照組外周血細胞因子濃度比較

注：兩兩比較為LSD-t檢驗，a、b、c、d分別為和對照組、PMF組、PV組、ET組比較，P<0.05

Tefferi等[4]對127例PMF的外周血細胞因子進行測定，結果發現：IL-2R、IL-6、IL-8及IL-10的濃度較健康對照組明顯升高，這與我們的研究一致，但IL-1β及TNF-α的濃度較對照組也顯著升高。同時，他們研究還發現，IL-2R及IL-8與較短的生存期相關。并且IL-8 與PMF的全身癥狀有關，IL-12和IL-2R濃度的升高提示需要輸注紅細胞，IL-8與IL-2R水平的升高與白細胞增多密切相關。Pourcelot等[3]對17例PV和21例ET的細胞因子進行檢測發現，除IL-1β外，IL-4、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α的濃度均明顯升高；PV組與ET組相比，ET組IL-8明顯升高，IL-6、IL-10及TNF-α兩組間差異無統計學意義。Pardanani等[9]對PMF病人的外周血細胞因子及相關臨床特征進行研究，結果表明 IL-2R及IL-8與較短的生存周期及白血病轉化有關，而且IL-8 可能通過新生血管形成促使腫瘤微環境的形成。

國外已有研究證實，JAK2V617突變幾乎在所有的PV以及55%～65%ET或PMF中都有表達。 在JAK2V617F的已知下游效應物中，STAT5轉錄因子在MPN的發病中起關鍵作用。當STAT5轉錄靶標出現失調時，MPN就處于疾病活化狀態。與STAT5在MPN病理生理學中的重要作用一致，JAK2V617F表達無法在STAT 5a/b缺陷小鼠中產生疾病[10]。在JAK2V617表達的MPN小鼠模型中，STAT3的缺失，導致小鼠的臨床癥狀加重[11]，生存期縮短[12]。此外，STAT3通過激活JAK途徑，還激活IL-6及IL-10等細胞因子參與MPN的發生、發展[13]。

綜上所述，MPN病人中細胞因子的表達出現失調，不同MPN亞組間各種細胞因子的表達水平也不盡相同，但MPN各亞型的IL-2R及IL-8水平較對照組均明顯升高，并且細胞因子水平與MPN臨床特征存在一定的相關性，細胞因子介導的JAK/STAT信號通路的持續激活可能是導致MPN 發生、發展的重要因素。但由于我們的病例數較少，因此還需進一步研究。