IL-6聯合CA125、HE4在早期卵巢癌患者診斷中的臨床價值*

李 娜，尹晶晶，劉 懿，鄧 凱，習 文，劉軍輝

(西安交通大學醫學院第一附屬醫院檢驗科，陜西西安 710061)

卵巢癌是發病率僅次于宮頸癌和子宮體癌的女性生殖系統惡性腫瘤，盆腔檢查、經陰道超聲(TVUS)和血清糖類抗原125(CA125)水平檢測是診斷卵巢癌的主要模式[1]。但是，由于卵巢癌早期缺乏特異性的臨床癥狀和有效的檢測手段，只有大約20%的卵巢癌患者可以在早期(Ⅰ～Ⅱ期)被發現[2]，而對于大多數卵巢癌患者都是在晚期(Ⅲ～Ⅳ期)被診斷[3]，致使Ⅲ期和Ⅳ期卵巢癌患者的5年生存率僅為36%和17%，相反，當卵巢癌在早期被診斷時，卵巢癌患者的5年生存率顯著提高，特別是當腫瘤局限于卵巢時，患者的5年生存率能提高到89%，10年生存率能到84%[4]。

鑒于早期診斷的臨床意義，在過去的幾十年里，已有多個預測模型被開發應用于卵巢癌的早期診斷中[5-6]。目前研究最多的是CA125，其次是人附睪蛋白4(HE4)。HE4和CA125聯合檢測用于卵巢癌的診斷，有利于提高診斷的靈敏度和特異度。白細胞介素-6(IL-6)主要參與調節機體的免疫應答，最初被認為是一種炎性因子，后來在惡性腫瘤生物學功能的研究中發現，IL-6和許多惡性腫瘤的癌變過程相關，IL-6的高表達可以促進腫瘤的發展，并和多種惡性腫瘤的預后相關。

為了實現卵巢癌的早期診斷，有必要對多種生物標志物進行聯合檢測以提高對疾病診斷的靈敏度和特異度，更好地區分惡性和良性腫瘤。本研究中，筆者通過對早、晚期卵巢癌組，卵巢良性疾病組和健康對照組，進行IL-6、CA125和HE4的相關檢測，分析這幾個指標與卵巢癌臨床分期和病理特征的相關性，進而評估IL-6聯合CA125、HE4作為新的締合物在早期卵巢癌診斷中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年1月至2017年12月，在西安交通大學醫學院第一附屬醫院住院的擬行手術治療的盆腔腫物患者137例；根據術后病理結果將患者分為卵巢良性疾病組和卵巢癌組，其中卵巢良性疾病組40例，平均年齡(60.6±13.6)歲；卵巢癌分期采用國際婦產科聯盟(FIGO)2014年標準予以分期，其中早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)組21例，平均年齡(63.6±11.2)歲，晚期卵巢癌(Ⅲ～Ⅳ期)組36例，平均年齡(61.8±10.5)歲；另選本院40例體檢合格的健康女性作為健康對照組，平均年齡(56.5±10.3)歲。所有研究對象均排除其他原發性惡性腫瘤，卵巢良性疾病組排除嚴重內科器質性疾病。3組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1檢測方法 標本采集：住院擬行手術治療的患者(術前)、體檢者，均在早晨空腹狀態下進行靜脈采血，3～4 mL，室溫靜置30 min，3 500 r/min，離心10 min，分離血清檢測。

1.2.2儀器與試劑 采用為羅氏公司cobas e602全自動免疫化學發光分析儀及配套試劑，檢測血清中CA125、HE4和IL-6的表達水平。檢測過程嚴格按照儀器和試劑操作說明書進行，每日檢測前執行配套質控，確認質控結果在允許范圍內后開始常規標本檢測。

1.2.3判定方法 血清IL-6、CA125 和HE4的參考范圍分別為0～6 pg/mL、0～35 U/mL和0～150 pmol/L，檢測結果大于參考范圍作為陽性判定標準，聯合檢測以任一指標升高判定為陽性。以病理結果作為診斷的金標準。

2 結 果

2.1卵巢病變組與健康對照組血清IL-6、CA125和HE4的表達水平 晚期卵巢癌組(Ⅲ～Ⅳ)、早期卵巢癌組(Ⅰ～Ⅱ)、卵巢良性疾病組和健康對照組四組間IL-6、CA125和HE4的表達水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05)；其中，卵巢癌組(早期、晚期)的IL-6、CA125和HE4的表達水平明顯高于卵巢良性疾病組和健康對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)；卵巢良性疾病組與健康對照組比較，IL-6、CA125表達水平明顯升高，差異具有統計學意義(P<0.05)，HE4水平則無顯著變化(P>0.05)。結果見表1。

表1 卵巢病變組與健康對照組血清IL-6、CA125和HE4的表達水平

2.2血清IL-6、CA125和HE4及聯合檢測在早期、晚期卵巢癌中的診斷價值評價 單獨使用IL-6、CA125和HE4診斷早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ)，CA125表現出較高的靈敏度(61.9%)，HE4則表現出較高的特異度(82.5%)和陽性預測值(63.2%)，多指標聯合測定靈敏度、特異度、陽性預測值等相比單獨測定均有所提升，IL-6+CA125+HE4聯合測定的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為85.7%、90.0%、81.8%、92.3%；晚期卵巢癌(Ⅲ～Ⅳ)的診斷中各生物標志物單獨檢測和聯合測定均表現出較優異的診斷價值，聯合測定表現更佳。見表2。

表2 血清IL-6、CA125和HE4水平及聯合檢測在早期、晚期卵巢癌中的診斷價值評價(%)

表3 血清IL-6、CA125和HE4及聯合檢測的ROC曲線分析

2.3血清IL-6、CA125和HE4及聯合檢測在早期卵巢癌診斷中的ROC曲線分析 以卵巢良性疾病組+健康對照組為參照繪制ROC曲線并計算AUC，CA125+HE4+IL-6診斷早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)和卵巢癌(Ⅰ～Ⅳ期)的AUC分別為0.955 4、0.974 0，結果見表3、圖1。

注：A為5種不同的生物標志物及組合在早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ)診斷中的ROC曲線；B為5種不同的生物標志物及組合在卵巢癌(Ⅰ～Ⅳ)診斷中的ROC曲線

圖1血清IL-6、CA125和HE4及聯合檢測的ROC曲線分析

3 討 論

近年來，卵巢癌的發病率迅速上升，GLOBOCAN統計數據顯示，2012年全球新增卵巢癌病例238 719例，死亡151 917例[7]；在中國，2012年約有34 575名婦女被新診斷為卵巢癌，有近14 676名婦女死于這種疾病[8]。面對這種情況，卵巢癌的早期診斷和治療就顯得極為迫切與重要，卵巢癌早期診斷并獲得最佳腫瘤細胞減滅術是影響卵巢癌患者預后和提高生存率的2個主要因素，這突出了敏感和可靠的策略對早期發現卵巢癌的關鍵性，以及盡早進行腫瘤細胞減滅術的重要性。

在過去的幾十年中，諸多研究已經制定出相關策略，以通過早期檢測來區分良性盆腔腫塊和卵巢癌，并開發可應用的術前因素來預測原發性腫瘤細胞減滅術的效果，而其中，血清生物標志物一直是這些研究的重點。多年來，CA125一直被用作診斷卵巢癌的生物標志物，并將其作為預測腫瘤細胞減滅術效果的潛在工具。但是，多個研究已證實其靈敏度和特異度不足以對卵巢癌進行早期的診斷和監測，主要原因是CA125在許多常見的良性婦科疾病和非婦科疾病中也會升高，而且，只有約50%的早期卵巢癌患者表現為CA125升高，其余的并不升高[9]。另一項研究發現，HE4(基因名稱WFDC2)被認為是卵巢癌最有希望的新血清標志物之一，HE4是最初發現于人附睪上皮細胞中的糖蛋白，在許多良性婦科腫瘤和內科疾病中并不升高，卻在不表達CA125的卵巢癌中有升高；盡管HE4在評估盆腔腫塊的惡性潛能方面看起來很有前景，但它并不是一個完美的生物標志物，事實上，影響HE4血清水平的因素很多，諸如年齡、吸煙、腎功能和非婦科癌癥等[10-11]。而相比CA125用于檢測卵巢惡性腫瘤，HE4具有同等的靈敏度和較高的特異度，并且兩個標記的組合可以互補，以提高卵巢癌診斷的靈敏度和特異度[12-13]；徐小娜[14]的研究結果顯示單用CA125診斷卵巢癌的靈敏度為75.6%、特異度為86.2%，單用HE4診斷卵巢癌的靈敏度為59.8%，特異度達到96.5%。另有研究發現CA125在早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)診斷中的靈敏度和陽性預測值分別為64.29%和53.57%，HE4的靈敏度和陽性預測值分別46.4%和43.3%[15]，陳燕等[16]的研究結果顯示CA125在Ⅰ期卵巢癌中的陽性率僅為36.36%，而HE4的陽性率為60.61%，這些研究結果也說明，單獨使用CA125或者HE4在卵巢癌的診斷中的價值，可能的主要貢獻來源于晚期卵巢癌患者(Ⅲ～Ⅳ期)，而在早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)診斷中的價值表現往往不佳。這也和本研究的結果相近，本研究結果顯示單獨使用CA125在早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)診斷中，其靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為61.9%、75.0%、56.5%、79.0%，而在晚期卵巢癌(Ⅲ～Ⅳ期)診斷中，其靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值明顯提高，分別達到88.9%、87.5%、86.5%、89.1%；若單獨使用HE4，其早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)和晚期卵巢癌(Ⅲ～Ⅳ期)中的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為57.1%、82.5%、63.2%、78.6%和86.1%、92.5%、91.2%、88.1%。近年來，使用多種生物標志物的幾種新算法已經被驗證可用于區分良性卵巢腫塊和卵巢癌，ROMA就是一種利用CA125、HE4和絕經狀態的生物標志物算法[17]，目前已在臨床得到了較為廣泛的應用，但這些不是真正的診斷測試，雖然可以使診斷靈敏度得到改善，但特異度和陽性預測值仍然具有一定的挑戰。IL-6是一種與多種病理狀態相關的細胞因子，相關研究表明IL-6能增強卵巢癌腫瘤細胞的存活，調節腫瘤組織和腹水中的免疫細胞浸潤，并增加對化療的抵抗[18]；另有報道，IL-6可以對內皮細胞增殖、遷移和血管生成產生直接影響，這是癌癥發生、發展初期最為關鍵的事件之一[19]，這些結果均支持了本研究結果，即IL-6作為重要的生物標志物在早期卵巢癌診斷中可能存在潛在的臨床應用價值。本研究結果顯示，當單獨使用IL-6作為生物標志物診斷卵巢癌時，其所表現出的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值較低，但當IL-6聯合CA125、HE4作為一種新的締合物診斷卵巢癌時，無論是在早期(Ⅰ～Ⅱ期)還是晚期(Ⅲ～Ⅳ期)，其靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值都大大提高，分別達到85.7%、90.0%、81.8%、92.3%和94.4%、97.5%、97.1%、95.1%。

本研究以卵巢良性疾病組+健康對照組為參照繪制ROC曲線并計算AUC，CA125、HE4、IL-6單獨診斷卵巢癌(Ⅰ～Ⅳ期)的AUC較低，特別是在早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)中，但是當CA125+HE4+IL-6聯合檢測用于診斷早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)和卵巢癌(Ⅰ～Ⅳ期)時，其AUC顯著升高，分別為0.955 4和0.974 0，兩者也較為接近，說明CA125+HE4+IL-6聯合檢測在早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)和卵巢癌(Ⅰ～Ⅳ期)中的診斷效能相當。

4 結 論

IL-6聯合CA125、HE4檢測具有較高的靈敏度、陽性預測值和ROC曲線下面積，是診斷早期卵巢癌(Ⅰ～Ⅱ期)較為理想的生物標志物組合，可提高對早期卵巢癌的診斷效率，有助于卵巢惡性腫瘤的早發現、早診斷和早治療。